不同種類酵母菌對自動(dòng)尿有形成分分析儀檢測結(jié)果的影響及解決辦法

曹穎儀， 于曉陽

（廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510220）

有研究發(fā)現(xiàn)，酵母菌對UF-5000自動(dòng)尿有形成分分析儀（簡稱UF-5000）檢測紅細(xì)胞有明顯影響[1-3]，但不同種類的酵母菌對紅細(xì)胞檢測結(jié)果影響的相關(guān)研究較少。為此，本研究擬分析不同種類和濃度酵母菌對尿液樣本紅細(xì)胞檢測結(jié)果的影響，并提出相關(guān)解決辦法。

1 材料和方法

1.1 樣本來源

隨機(jī)選取100例新鮮清潔中段尿樣本，每20例混合于同一容器中，分別取5 mL作為標(biāo)準(zhǔn)尿液。尿液樣本納入標(biāo)準(zhǔn)：尿液密度為1.010～1.025 kg/L，尿紅細(xì)胞<3個(gè)/高倍鏡視野，尿白細(xì)胞<5個(gè)/高倍鏡視野，上皮細(xì)胞<10個(gè)/高倍鏡視野，干化學(xué)隱血試驗(yàn)陰性。酵母菌選取白念珠菌（ATCC 90028）、近平滑念珠菌、光滑念珠菌（非模式菌株），購自廣東省臨床檢驗(yàn)中心。

1.2 儀器與試劑

UF-5000全自動(dòng)尿有形成分分析儀（日本Sysmex公司）及原裝配套試劑。

1.3 方法

將不同種類的酵母菌與標(biāo)準(zhǔn)尿液混合，按10個(gè)/μL、102個(gè)/μL、103個(gè)/μL、104個(gè)/μL、105個(gè)/μL相應(yīng)比例稀釋。按UF-5000操作手冊進(jìn)行操作，確保質(zhì)控在控，對各濃度和種類菌尿樣本進(jìn)行5次平行測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

不同濃度的酵母菌尿樣本紅細(xì)胞計(jì)數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。白念珠菌較易被識(shí)別，光滑念珠菌、近平滑念珠菌較難被識(shí)別；當(dāng)白念珠菌>104個(gè)/μL時(shí)，可識(shí)別出類酵母菌。UF-5000會(huì)將酵母菌誤判為紅細(xì)胞，誤判紅細(xì)胞的濃度隨酵母菌濃度的升高而升高。尿液酵母菌>104個(gè)/μL時(shí)，UF-5000對紅細(xì)胞的誤報(bào)已超出臨床決定水平。見表1、表2、表3。

表1 不同濃度白念珠菌尿樣本紅細(xì)胞檢測結(jié)果比較

表2 不同濃度光滑念珠菌尿樣本紅細(xì)胞檢測結(jié)果比較

表3 不同濃度近平滑念珠菌尿樣本紅細(xì)胞檢測果比較

3 討論

本研究結(jié)果顯示，酵母菌主要干擾UF-5000檢測紅細(xì)胞的結(jié)果，對白細(xì)胞、細(xì)菌并無太大影響。菌尿會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞濃度呈線性增加，且濃度超過一定程度才能識(shí)別出類酵母菌。而不同類型酵母菌在UF-5000上顯示出的紅細(xì)胞形態(tài)信息亦有差別，提示需謹(jǐn)慎審核檢測報(bào)告。值得注意的是，當(dāng)菌尿濃度在106～108個(gè)/μL時(shí)，UF-5000誤報(bào)紅細(xì)胞數(shù)已超出臨床決定水平，但儀器并未提示光滑念珠菌和近平滑念珠菌陽性，這可能會(huì)導(dǎo)致在臨床工作中出現(xiàn)誤報(bào)。

尿有形成分檢查是尿常規(guī)檢測的重要組成部分，對尿路系統(tǒng)診斷、治療、監(jiān)測等都有較大意義[4]。有學(xué)者分析了酵母菌對其他尿液分析儀的影響，發(fā)現(xiàn)尿液成分的復(fù)雜性及各檢測項(xiàng)目與一些成分在染色方面存在一定相似之處，又因儀器分析尚存在一定局限性，導(dǎo)致儀器檢測結(jié)果產(chǎn)生誤差[5-6]。

出現(xiàn)紅細(xì)胞假陽性的主要原因在于紅細(xì)胞檢測主要在surface通道完成，根據(jù)前向散射光強(qiáng)度、消偏振側(cè)向散射光強(qiáng)度進(jìn)行分類，而酵母菌大小一般為<10 μL，與紅細(xì)胞大小相似，其雙折射性較小，也與紅細(xì)胞相似，所以UF-5000檢測尿液中酵母菌超過一定濃度時(shí)，會(huì)將芽孢狀念珠菌誤認(rèn)為紅細(xì)胞。

在工作中也發(fā)現(xiàn)部分尿白細(xì)胞升高的患者對紅細(xì)胞也會(huì)產(chǎn)生干擾，且儀器中會(huì)報(bào)告紅細(xì)胞異常升高，但本研究未能進(jìn)一步闡述。

紅細(xì)胞檢測結(jié)果可參照儀器紅細(xì)胞/酵母菌劃分異常值，當(dāng)紅細(xì)胞>20個(gè)/μL，且前向散射光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度較低類酵母菌大量出現(xiàn)時(shí)，在散點(diǎn)圖上，紅細(xì)胞與類酵母菌重疊出現(xiàn)，難以區(qū)分，需鏡檢鑒別。

當(dāng)UF-5000報(bào)告類酵母菌陽性，且檢測出大量紅細(xì)胞時(shí)，不排除紅細(xì)胞假陽性可能，應(yīng)進(jìn)行鏡檢確認(rèn)紅細(xì)胞的真實(shí)形態(tài)及數(shù)量。

對于類酵母菌報(bào)告為陰性，而干化學(xué)法潛血試驗(yàn)陰性，并出現(xiàn)大量紅細(xì)胞（紅細(xì)胞形態(tài)提示混合性紅細(xì)胞）時(shí)，需考慮類酵母菌假陰性可能性大，可能是類酵母菌未達(dá)到儀器檢測限，或不同種類念珠菌未被檢出，應(yīng)進(jìn)行鏡檢，有條件的情況下，應(yīng)優(yōu)先選擇離心鏡檢，排除漏診可能。

綜上所述，真菌尿?qū)F-5000的影響不容忽視，應(yīng)重視尿液復(fù)檢規(guī)則的制定，鏡檢仍是尿常規(guī)檢測的金標(biāo)準(zhǔn)[7]。本研究對UF-5000檢測所得數(shù)量以及鏡檢計(jì)數(shù)數(shù)量換算并未作進(jìn)一步研究，后續(xù)將進(jìn)行分析。