一例維氏氣單胞菌引起羅非魚病的診治

梁前才

(茂名市農(nóng)業(yè)科技推廣中心，廣東 茂名 525000)

2020年6月，茂名市電白區(qū)一個養(yǎng)殖戶報告羅非魚發(fā)病死亡，每天死亡達(dá)50～400尾。現(xiàn)將該羅非魚發(fā)病的診治情況介紹如下，供從業(yè)人員參考。

一、發(fā)病情況

發(fā)病池塘面積31 畝，平均水深約3.5 米，有豬糞直排入塘，屬當(dāng)?shù)氐湫土_非魚養(yǎng)殖模式。6月2日把羅非魚苗種移到成魚塘，苗種規(guī)格約130克/尾，共放養(yǎng)8.6 萬尾。同時過塘大規(guī)格鰱鳙苗種，過塘后羅非魚從開始每天死亡400多尾到后期每天死亡50 多尾。病魚的上下頜、口腔、鰓蓋、眼睛、鰭基及魚體兩側(cè)輕度充血，解剖發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)有少量食物，有典型的淡水魚出血病癥狀。癥狀嚴(yán)重的羅非魚體表嚴(yán)重充血，眼眶周圍也充血，眼球突出，肛門紅腫，腹部膨大，腹腔內(nèi)積有淡黃色透明腹水或紅色渾濁腹水。同塘配養(yǎng)的鰱鳙魚沒有發(fā)生病害。

二、病害診斷

根據(jù)病魚的癥狀對羅非魚的體表和鰓采樣鏡檢，沒有發(fā)現(xiàn)寄生蟲。由于有部分病魚出現(xiàn)羅非魚鏈球菌病突眼的癥狀，在有典型癥狀的羅非魚腦、腎、肝的部位采樣，按照羅非魚鏈球菌PCR檢測方法進(jìn)行檢測，結(jié)果不是羅非魚鏈球菌引起的病害。對羅非魚病灶部位進(jìn)行采樣，用MRS肉湯平皿培養(yǎng)基接種培養(yǎng)，培養(yǎng)后有典型細(xì)菌菌落，用TSA培養(yǎng)基進(jìn)行純化培養(yǎng)后送檢，用細(xì)菌16S rDNA基因擴(kuò)增測序法進(jìn)行檢測，對檢測結(jié)果比對后確定細(xì)菌是維氏氣單胞菌，因此確定是由維氏氣單胞菌引發(fā)的羅非魚病。

三、治療過程與藥敏試驗(yàn)

1.沒有確診前的治療措施 在養(yǎng)殖場進(jìn)行病害檢測采樣時，沒有確診羅非魚病因，筆者根據(jù)發(fā)病魚的癥狀，并結(jié)合多年羅非魚病害處理的經(jīng)驗(yàn)，初步確定該羅非魚病是由細(xì)菌引起。當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的羅非魚主要用于加工出口，不能用磺胺類藥物。為了減少羅非魚發(fā)病死亡數(shù)量，當(dāng)時指導(dǎo)養(yǎng)殖戶用氟苯尼考(5%)拌料投喂羅非魚，每天1 次，每千克魚用藥量30 毫克/天，共用藥4 天；用聚維酮碘全池潑灑1 次，到第4 天羅非魚死亡得到了控制。

2.藥敏試驗(yàn) 筆者用硫酸新霉素、鹽酸土霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、磺胺嘧啶、磺胺甲唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、恩諾沙星、氨芐西林鈉、硫氰酸紅霉素、強(qiáng)力霉素、交沙霉素和鹽酸環(huán)丙沙星共14 種商用藥敏紙片，對菌株進(jìn)行了簡單的藥敏試驗(yàn)。由于是對養(yǎng)殖戶生產(chǎn)中病害防控的藥敏試驗(yàn)，未測定菌株最小抑菌濃度與試驗(yàn)菌株液的濃度。

藥敏試驗(yàn)平皿培養(yǎng)基為MHA培養(yǎng)基，挑選發(fā)病魚接種培育后典型的菌株在液體MRS培育基上培育24小時后，用針管吸取1毫升菌株液放在藥敏試驗(yàn)平皿上，用涂布棒在培育基上均勻涂布，每個試驗(yàn)平皿放4 個不同的藥敏紙片，設(shè)3 個平行試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)平皿經(jīng)過24 小時的培養(yǎng)，按照藥敏紙對菌株抑制圈的大小分為極敏感、敏感、無明顯效果3個等級(非NCCLS標(biāo)準(zhǔn)和CLSI標(biāo)準(zhǔn))。試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)病菌株對甲砜霉素、鹽酸環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素、鹽酸土霉素、交沙霉素、氟苯尼考、磺胺二甲嘧啶7種抗菌藥物的敏感性最強(qiáng)，其余7種抗菌藥物無明顯抑菌圈產(chǎn)生。其中對氟苯尼考、磺胺二甲嘧啶為極敏感，對甲砜霉素、鹽酸環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素、鹽酸土霉素、交沙霉素為敏感，對其他7種藥物無明顯效果。

四、分析與小結(jié)

維氏氣單胞菌是一種條件致病菌，其感染水產(chǎn)動物引起的疾病有腐皮病、敗血癥等。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)，該細(xì)菌感染魚后可導(dǎo)致35%～90%的發(fā)病率，發(fā)病后也具有一定的死亡率。此次維氏氣單胞菌引發(fā)羅非魚病的原因如下。

1.環(huán)境與氣候因素 該養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖模式當(dāng)?shù)胤Q為立體養(yǎng)殖模式，即池塘旁邊養(yǎng)豬，利用豬糞育肥水質(zhì)或者充當(dāng)魚的餌料的養(yǎng)殖模式。該模式使養(yǎng)殖水體有機(jī)質(zhì)增多，存在引起羅非魚病害的有害菌群。當(dāng)?shù)?月已屬高溫季節(jié)，氣溫在25～34℃，表層水溫在25～30℃，適合維氏氣單胞菌引發(fā)水產(chǎn)養(yǎng)殖病害。

2.品種與養(yǎng)殖操作因素 羅非魚相對耐低氧，對水質(zhì)要求不高，病害不多，但特定條件下對真菌、細(xì)菌病的抵抗力不強(qiáng)，容易發(fā)生病害。筆者根據(jù)多年的水產(chǎn)技術(shù)服務(wù)經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為，水溫低于16℃、羅非魚體表損傷的情況下極易發(fā)生水霉病，水溫高于30℃時容易發(fā)生羅非魚鏈球菌病。此次由維氏氣單胞菌引發(fā)的病害與羅非魚品種有關(guān)，同時與養(yǎng)殖操作有關(guān)。過塘前苗種停料1 天，但苗種是捕撈后直接稱重、干法搬運(yùn)過塘，搬運(yùn)距離有200 多米。搬運(yùn)過程造成羅非魚體表受傷、鱗片脫落，受傷羅非魚受細(xì)菌感染引發(fā)了病害。

近年來，羅非魚養(yǎng)殖病害多，如羅非魚鏈球菌病，每年都造成茂名地區(qū)羅非魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)較大的損失，但維氏氣單胞菌引發(fā)羅非魚病相對較少。養(yǎng)殖管理過程中要盡可能減少魚體受傷，減少維氏氣單胞菌病發(fā)生的條件。發(fā)病后用磺胺二甲嘧啶拌料投喂可獲得較好的效果，但以出口歐美為目的養(yǎng)殖池塘要使用氟苯尼考治療，保證符合出口地區(qū)的食品質(zhì)量安全要求。另外，水產(chǎn)技術(shù)推廣技術(shù)人員根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，在病原檢測確診前要盡快采用合理治療措施，以減少病害造成的損失。