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淺議小反芻獸疫研究概況

2021-12-02 01:47:54
中國畜禽種業 2021年2期
關鍵詞:檢測方法

(山東省臨朐縣動物衛生監督所 262600)

1 病原學特點

小反芻獸疫也稱小反芻獸假性牛瘟、肺腸炎、口炎肺腸炎復征,是由PPRV(小反芻獸疫病毒)引起小反芻獸的一種急性、發熱性、高度接觸性傳染病,主要感染山羊和綿羊等小反芻動物,小反芻獸疫病毒(PPRV) 屬于副黏病毒科麻疹病毒屬,與牛瘟病毒、人麻疹病毒、犬瘟熱病毒等屬于同屬類病毒。病毒粒子呈現多樣性,其中最常見的表現形式為粗糙球形;病毒主要由核衣殼和外部囊性膜組成,核衣殼長度約為1000nm,平均直徑為500nm,表現為螺旋對稱性,主要由核衣殼蛋白、大蛋白和磷蛋白構成。外部囊性膜厚度為8~14nm,囊膜中有明顯的纖突,主要成分為無神經氨酸酶和血凝酶。

病毒不耐高溫,在50℃環境下30min 即可喪失感染性,但在酸堿度環境中相對穩定,在pH4-10 區間內可以保持較長時間的活性,該病毒對一般消毒劑如酒精、乙醚和化學滅活劑等都具備較高的敏感性,在酚類物質作用下,24h 內可以將其滅活,失去感染宿主的能力和致病性。

2 流行病學硩硦

2.1 易感動物硩硦

小反芻獸疫的天然宿主是綿羊和山羊,一般認為山羊更易感,也有研究稱它們易感性幾乎相當,但綿羊的發病率和死亡率卻偏髙。野生動物也有被感染的報道,主要有單峰駱駝、湯氏瞪羚、印度水牛等。需要注意的是大家畜中牛一般呈現亞臨床感染,并能產生抗體;豬感染后既不表現出臨床癥狀,也不排毒。至今尚未曾見到人感染本病的報道。硩硦

2.2 傳染源硩硦

患病動物和隱性感染的動物是小反芻獸疫的主要傳染源,未表現臨床癥狀的病羊最為危險。病畜或帶病畜的呼吸道、消化道均可排毒。

2.3 傳播途徑硩硦

該病主要經呼吸系統傳播,具有高度的接觸傳染性。既可通過直接接觸等感染進行水平傳播,也可通過精液、乳汁等感染進行垂直傳播,還可通過家畜調運、引種及野生動物的遷徙等跨區域傳播。被這些分泌物、排泄物污染的水源、溝槽、墊料等雖然都會成為傳播媒介,但并不會長時間保持傳染性,因此小反芻獸疫傳播距離非常有限。

2.4 流行性特點

小反芻獸疫傳染性強,傳播速度快,沒有明顯的季節性,四季均發,在雨季和干燥寒冷的季節更為頻發,易感羊群發病率在60%以上,且病死率可達50%以上,嚴重者可達100%,該病常以零散疫點的形式發生,在某些年份呈暴發流行之后,一般有5~6 年的緩和期。該病主要導致小反芻動物的腹瀉、發熱、腸炎和口炎等,是一種急性高度接觸性傳播類疾病,其中羊感染性小反芻獸疫也被稱為假性羊瘟。小反芻獸疫在非洲、中東和亞洲等多地發生過,對養殖產業造成了巨大的影響。2007 年在我國西藏阿里地區于爆發過該病,患病羊數量達到6000 余只,死亡1500 余只,嚴重制約了當地羊養殖業的發展,并且帶來了巨大的經濟損失。

3 小反芻獸疫的診斷

3.1 臨床剖檢診斷

該病可通過臨床癥狀及病理學變化診斷,發病后病畜表現體溫升高,呼吸困難;眼、鼻大量排出分泌物,初呈水樣后呈膿樣,口腔黏膜充血,口、鼻腔黏膜出現大量部分粘連的極其微小的略呈灰色的壞死點、糜爛斑;病畜發熱2~3d 后開始腹瀉,并伴隨嚴重脫水、消瘦、虛脫;懷孕母羊可發生流產。

剖檢可見膿性黏膜炎、結膜炎、支氣管肺炎,肺尖肺炎;消化道黏膜常見嚴重的充血、潰爛及出血,有時大腸縱向折疊頂部出現嚴重的出血,有時形成斑馬樣條紋;腸淋巴組織發生壞死、萎縮,腸系膜淋巴結輕微腫大、水腫;腎和膀胱可見充血;母羊可見陰戶甚至陰道糜爛。肺臟組織組織學檢查可見多核巨細胞及細胞內嗜酸性包涵體出現。上述方法可作出懷疑或初步診斷,如需確診需要進行對該病進行特異性診斷。

3.2 實驗室診斷

目前,常用的實驗室診斷技術主要有病毒分離、聚合酶鏈式反應、酶聯免疫吸附試驗、病毒中和試驗、瓊脂凝膠免疫擴散、對流免疫電泳、膠體金試紙以及其他檢測方法,其中聚合酶鏈式反應和競爭ELISA 應用廣泛,是世界動物衛生組織指定的標準檢測方法。在血清學檢測中,商品化的ELISA 試劑盒具有較高的特異性和敏感性,可以檢測病毒的N 或H 蛋白的抗體,可以評估群體血清水平。但是,現在仍然沒有一種血清學方法能夠區分受感染動物和預防接種動物。

3.2.1 病原學診斷硩硦

小反芻獸疫病原學診斷方法目前主要采取病毒分離鑒定、捕獲酶聯免疫吸附試驗、瓊脂凝膠免疫擴散、對流免疫電泳等方法。1995 年,Forsyth 和其他的研究人員一起建立了用于鑒別診斷的RT-PCR 的方法。Forsyth 和Barrett 在研究的過程中根據N 基因和F 基因進行了引物設計,并且構建了以PCR 為基礎的檢測手段進行RT-PCR 檢測,使用RT-PCR 進行病毒檢測的手段不斷得到推廣和應用,得到了人們的廣泛關注和認可。cDNA(互補脫氧核糖核酸)探針法和RT-PCR 兩種方法在病毒檢測和核算分析中得到了廣泛應用,尤其是后者具備操作簡便的特點,可以借助序列檢測的方式來對病毒強弱程度進行分析,可以用來與牛瘟病毒的鑒別診斷。George A 等以M 或N 基因建立的單一RT-PCR 和多重PCR 更為敏感。由SaravananP 等建立的PCR-ELISA 方法,能檢測早期感染的小反芻獸疫病毒,因為其采用一種標記的探針檢測病毒核酸擴增產物,其靈敏度比常規RT-PCR 増髙10 倍。我國毛立等建立了小反芻獸疫病毒特異、敏感的RT-PCR 診斷方法。此外,實時熒光定量PCR和環介導等溫擴增(LAMP)技術也可用于PPRV 的特異性的檢測。硩硦

3.2.2 免疫學診斷硩硦

一般,抗體滴度檢測需采集雙份血清進行試驗,抗體滴度升高4 倍以上才具有示病意義。目前常用方法有ELISA 試驗、中和試驗、熒光抗體試驗、瓊脂免疫擴散試驗等。在患病畜血清中,針對N 蛋白的抗體占主導地位,其抗原性穩定。國內邱文英[1]等建立了靈敏度高、特異性強的單抗競爭性ELISA 方法。血細胞凝集試驗、乳膠凝集試驗和病毒中和試驗也是用于小反芻獸疫抗體檢測的方法。其中,病毒中和試驗是國際貿易中要求必須進行的一項檢測,其靈敏度高、特異性強,但缺點是非常耗時,影響其在實際工作中的推廣和應用。硩

4 小結

近年來,鑒于小反芻獸疫給家畜養殖帶來的危害與經濟損失,在實際生產中,已越來越為廣大養殖戶所重視。在寧夏[2],從2014 年2 月起,全區范圍內對所有養殖、調運環節羊只使用小反芻獸疫疫苗進行強制免疫。通過此類方法,2014~2017 年,小反芻獸疫全年免疫密度維持100%,抗體陽性率超過70%以上。目前,全國各地基本都在使用此類方法,在疫苗運輸、使用、貯藏等等環節加強監管,各市、縣(區)動物疾病預防控制中心做好免疫效果監測評價的同時,陸續推出的重大疫病應急預案、嚴格的消殺工作以及強制免疫程序,這在很大程度上阻斷了該病的傳播及發生,也為有效防控該病打下了堅實的基礎。

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