農藥殘留檢測技術關鍵環節控制

李紫蘭

（宣城市農產品質量安全監管局，安徽 宣城 242000）

現代農作物種植離不開農藥的使用，農藥為預防病蟲害和提高農作物產量具有重要價值。但是，農藥一旦使用不科學，就會給植物性產品質量和食用者生命安全帶來威脅。隨著我國農業技術的發展，農藥殘留檢測手段和靈敏度都在逐步提升。本文從農藥殘留檢測的樣品前處理、定性、定量檢測分析和檢測過程的質量控制4個環節進行闡述。

1 農藥殘留檢測樣品前處理過程控制

1.1 待檢樣品的稱取

待檢樣品須通過天平進行稱取。首先準備1個開口大的容器，將待檢樣品進行剪碎或研磨處理，減少樣品在容器壁上的粘連。若樣品為冷凍樣品，需要將冰晶一同進行勻漿處理，解凍樣品需要盡快檢測，避免反復凍融。

1.2 待檢樣品的提取

實驗室一般采用勻漿提取（組織搗碎法）。該方法快速、簡單，對儀器設備沒有較高要求，且提取效果好。若樣品含水量低，可以在處理前加入適量蒸餾水，室溫靜置30 min 再勻漿提取。若樣品含水量高，如橙子、番茄或冷凍產品，可以先用食品料理機打碎再進行勻漿提取，具體試驗方法可參照SOP進行。

1.3 鹽析

實驗室用乙腈作為提取劑時，需完全分離乙腈和水相，提高農藥殘留的回收量[1]。在鹽析過程中，若加鹽量不足或振蕩不充分，則會導致乙腈和水相不易分開，造成農藥殘留的回收率降低。因此，只有加入足量的鹽形成過飽和溶液，才能促進乙腈和水相完全分離。由于某些農藥不耐熱，所以需要控制加鹽的順序來把控系統放熱，在加入乙腈充分混勻后再添加足量的鹽。否則，會影響農藥殘留的回收率。

1.4 濃縮

濃縮的方式和濃縮裝置有關。氣流吹蒸濃縮裝置適合體積小、易揮發的提取液，主要通過空氣流（或氮氣流）吹動帶出溶劑，因此該方法的農藥損失量大。旋轉蒸發裝置不僅熱量傳遞快，還可以一邊減壓一邊旋轉，不會發生爆沸，最后獲得的農藥殘留的回收率較高。在使用過程中，為避免發生爆沸，需要注意水塔溫度，最好低于40℃且濃縮液的體積不宜超過瓶身的1/3。若濃縮后不需要凈化，可以用梨形瓶進行濃縮。若需要凈化，則使用茄形瓶進行濃縮。濃縮結束后需要繼續冷卻，溫度不超過5℃，可以提高回收率。

1.5 凈化

凈化的方法有柱層析法、吹掃蒸餾法、液—液分配法、固相萃取法等。一般采用QuEChERS 方法，原理同固相萃取法，即利用吸附劑填料與基質中的雜質相互作用來吸附雜質，最終獲取純度較高的回收物[2]。若用乙腈作為提取劑，在凈化結束后不能直接用氣相色譜儀或氣質聯用儀測定，需要用氮氣吹干乙腈，再用丙酮或乙酸乙酯等溶劑溶解后進行上機檢測，否則會損害色譜柱。

2 農藥殘留定性檢測異常分析

2.1 假陽性結果分析

2.1.1 基質干擾產生假陽性

基質干擾產生假陽性主要出現于氣相色譜和氣相色譜/質譜法。若樣品勻漿過程中待檢樣品某次成分（蒜氨酸）、酶和底物發生反應產生含硫化合物，如氨、丙酮酸，這些物質和有機磷、有機農藥性質相似，傳統凈化也無法去除，因此用氣相色譜和氣相色譜/質譜法不能分辨出植物性產品自身是否存在農藥殘留問題。解決方法：可將蔥、蒜等植物樣品切斷，微波加熱25 s 再進行提取；而花椰菜、結球甘藍、白菜等十字花科植物含有硫氰酸酯和異硫氰酸酯類化合物，此類物質和氧樂果、甲胺磷、三唑酮等農藥相似；香料、茶葉、香菇等植物由于具有小分子氣味也會產生基質干擾，可使用基質加標并利用液相二級質譜測定[3]。

2.1.2 試劑、樣品、操作過程中出現污染

如試劑盒內的某個試劑不純造成假陽性；試劑制備或處理前沒有更換槍頭或清洗相關器皿；進樣過程中枕頭清洗不完全。解決方法：每批樣品檢測設有空白對照，上機時按從低到高的標準工作液濃度進行檢測，增添洗針進樣方式。

2.2 假陰性結果分析

第一，待檢樣品提取方法不合理，沒有嚴格按照SOP 操作，實驗員隨意更改提取條件或試劑配方，造成目標物丟失。解決方法是嚴格參照SOP 操作進行待檢樣品提取，對酸堿度敏感的目標物要在中性條件下提取。第二，某些農藥不耐熱（辛硫磷、敵百蟲等）或對酸堿過于敏感（滅菌丹、克菌丹等），進樣時自我分解出現假陰性。解決方法是進樣時對柱溫或流動相進行適當調節。第三，濃縮過程中使用旋轉蒸發吹過干，造成目標物流失。解決方法是用旋轉蒸發吹近干時取出，再用橡皮球慢慢吹干或自然晾干。第四，凈化過程中目標物未淋洗掉或沒有吸附到柱子上。解決方法是可以參照相似相容的原則選擇合適的淋洗試劑，根據基質類型合理選擇凈化柱。

3 農藥殘留定量檢測的關鍵控制

3.1 標準溶液的配置

在植物性產品農藥殘留檢測中，標準溶液的配置直接關乎結果的準確性和靈敏度。使用前，查看試劑有效期限和使用說明。配置時根據逐級稀釋的方式進行配置，新配置的標準溶液需要對第1 次測定的圖譜進行保存，在相同操作條件下可以使用這次圖譜，若差異大，則需要重新配置標準溶液。單點校正時選取的校正點和目標物濃度相差不易超過2 倍，曲線校正時，目標物的待測濃度要落在校準曲線范圍之內，否則會影響結果的準確性。

3.2 基質效應的消除

在利用氣相色譜儀或氣相色譜—質譜聯用儀測定時，若分析物不能匹配標準質譜圖或目標物回收率不在計算范圍內都會出現基質效應，可以用不含待測物的基質標準液進行校正。當檢查樣本種類較多，可以對樣本進行分類檢測，每類樣本用1 個基質標樣，減少污染或干擾。還可以通過多次凈化提取液，對其最終的提取液進行稀釋，減少樣品濃度來消除基質效應。

4 檢測過程的質量控制

質量控制直接決定了樣本農藥殘留檢測的精密度和最終結果，只有對污染、加標回收率、目標物回收率和超標物質進行把控，才能提高檢測結果的準確性。第一，排除檢測過程中的污染，不同批次檢測需要設置相應的空白試驗，當空白值較高時分析是否有試劑污染、用具污染或樣品殘留。第二，不同批次植物性產品農藥殘留檢測時利用加標回收率提高結果準確性，每個加標做2～3個平行。第三，每次測定樣品時，每24 個樣品配套1 個加樣回收率試驗，加樣水平是方法定量限的2 倍，當回收率超過70%～120%則重新檢測[4]。第四，當檢測值接近限量值或超標，可以重復1次試驗確保準確率。若結果相同，可用氣質聯用儀進行定性試驗。

5 結語

農藥殘留問題不僅影響農產品質量和食用者的生命健康，也會污染生態環境。因此，必須通過強有力的手段，規范農藥在農業生產中的使用。雖然提高農藥檢測方法的準確性和靈敏度可以減少農藥殘留高的農產品流入市場，但是無法從根源上解決問題，需要提高農藥生產、流通和使用的規范性，政府和市場應對農戶進行系統性的農藥劑量和使用培訓，杜絕濫用農藥。