肉雞馬立克氏病的診斷

孫泉云 朱九超

上海市動物疫病預防控制中心，上海 201103

馬立克氏?。∕D）是由馬立克氏病病毒（MDV）引起的一種雞傳染性腫瘤病，以淋巴組織的增生和腫瘤形成為特征，外周神經、性腺、虹膜、各種臟器、肌肉和皮膚發生單核細胞浸潤[1]。本病常見于50～70日齡的雞群，可引起較高的發病率和死亡率，是嚴重威脅養禽業的重要傳染病之一，且一旦發生無有效防控藥物。2021年1-4月，上海某區12家肉雞養殖場和專業戶飼養的肉雞群發生以消瘦、精神萎靡、陸續死亡、病程較長為特征的病例，經臨床檢查和實驗室檢測診斷為馬立克氏病，現將有關診斷情況予以簡要報告。

1 臨床癥狀和剖檢變化

通過對12 家發病雞場（專業戶）的詢問了解、查看檔案資料以及對雞群的臨床檢查，發現雞群于50～60日齡出現臨床病癥，表現為打堆、廢食、消瘦、皮膚蒼白、羽毛粗亂、眼睛半閉、精神不振、共濟失調、肢體麻痹和癱瘓或顯現劈叉式體征，最終衰竭死亡，死亡率15%～90%，平均為35%，飼養的肉雞品種為嶺南黃，感染肉雞總數達13.7 萬羽。發病后，經使用氨基糖苷類、磺胺類等抗菌素藥物治療無效。雞場（戶）按常規免疫程序開展了禽流感、新城疫、傳染性支氣管炎等疫苗的免疫，雞苗均來源于上海志忠禽業專業合作社，且雙方已有15年的供銷合作歷史，雛雞在孵化廳均已經接種馬立克氏病疫苗，且所用疫苗和接種程序經查規范。

剖檢可見明顯雞MD 病變，以內臟型腫瘤、皮膚型腫瘤為主，偶見眼型腫瘤。在卵巢、肝臟、心臟、腎臟、脾臟、肺臟、腺胃、肌胃以及胰臟等內臟器官均可發現腫瘤，腫瘤為圓形或近圓形結節，突出于臟器表面，質地堅硬，呈灰白色。

2 實驗室檢測

2.1 細菌培養

無菌采取病雞的肝臟、肺臟、脾臟、心臟等器官，接種于血瓊脂培養皿上，置于37 ℃溫箱培養3 d，觀察細菌生長及菌落形成。

2.2 瓊脂免疫擴散（AGID）試驗

取病雞含有羽髓的羽毛數根，將羽髓擠出與PBS混合均勻后備用。在制備好的瓊脂平板上打梅花形孔，然后將雞馬克立氏病病毒標準陽性血清加入到瓊脂平板中間孔內，周邊孔則依次加入標準陽性抗原和待檢羽髓液，置于37 ℃恒溫培養箱中反應，分別在24、48 h觀察結果。

2.3 PCR和ELISA試驗

取病雞的肝臟、肺臟、脾臟、心臟等器官剪碎、研磨，PBS 勻漿，離心，取上清提取核酸，采用PCR方法進行馬立克氏病病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、禽肺病毒和禽腺病毒的病原學檢測；取組織上清，采用ELISA 方法進行禽白血病病毒P27 抗原的檢測。

3 結 果

3.1 細菌培養

經觀察，未見細菌生長和菌落形成。

3.2 瓊脂免疫擴散（AGID）試驗檢測抗原

待檢羽髓液與標準陽性血清孔間產生明顯可見沉淀線，且此沉淀線與標準血清與標準抗原孔間的沉淀線末端相融合，判定為陽性。

3.3 病毒檢測

經PCR 檢測，僅馬立克氏病病毒為陽性，禽流感病毒、新城疫病毒、禽肺病毒和禽腺病毒均為陰性；經ELISA檢測，禽白血病病毒P27抗原為陰性。

3.4 追溯調查

經現場流行病學調查，初步認為上海志忠禽業專業合作社由外省引入種蛋時未做好徹底消毒是引發此次疫情的主要風險因素（該省不少雞場先于上海發生了馬立克氏病超強毒株感染），加之涉疫雞場（戶）棚舍簡陋、陰濕，雞群整體健康度差，促發MD疫情發生。

4 討 論

1）根據本次發病雞群的臨床癥狀和實驗室檢測結果，綜合判定為馬立克氏病。但此次疫情涉及上海市某區12家養雞場（專業戶），范圍廣、時間長、損失大，表明馬立克氏病仍然是危害養雞業的重要疫病，必須予以高度重視和持續嚴密防控。

2）隸屬于皰疹病毒科的MDV 對外界環境抵抗力強，感染雞場難以凈化和根除病毒，且自20 世紀80年代Richard 等[2]從HVT 免疫雞群中分離到超強MDV 毒株以來，野外毒株的毒力不斷變異趨強，已經突破現有疫苗的免疫保護，給養雞業帶來嚴重的損失[3]。因此，養雞場（戶）一方面要落實嚴格的生物安全措施，防止因引種、引蛋而發生輸入性疫情，另一方面要了解和掌握本地區和毗鄰地區的雞群疫病動態，強化疫情監測，從而有效預防疫病的發生。