蜂王漿抗氧化作用研究進展

王 琦，劉玉玲，蘭鳳明，王 志

（吉林省養蜂科學研究所，吉林 吉林 132108）

自由基是一些帶有未成對電子的原子或基團，化學性質活潑，具有很強的氧化性（HAN L，2017）。生物體在日常新陳代謝過程或受電磁輻射、環境污染外界因素影響會產生一系列的自由基，主要指活性氧，如O2-、OH-、DPPH（王晨慧，2020） 等。自由基的強氧化性對生物體內的蛋白質、核酸、脂肪等分子具有很強的破壞作用，干擾細胞的正常生理活動（Floyd，2010；何軒，2013）。為了減少自由基的損傷，維持正常的生命活動，生物體內具有一套完整的自由基清除系統，使生物體氧化和抗氧化作用達到動態平衡（劉國艷，2002）。而當這種平衡被打破后，生物體便會出現氧化應激反應，造成氧化損傷。據研究，細胞線粒體、DNA、脂質過氧化等氧化損傷可引起細胞損傷、腫瘤、免疫損傷等疾病，也是衰老的主要原因之一（FINKEL ，2000）。因此，針對抗氧化機理、抗氧化物質展開研究對人類健康具有重要意義。

目前，已有多項研究表明一些食品及其提取物具有良好的自由基清除和抗氧化能力（吳國宏，2020；Ruch，1989；Frankel，1995）。蜂王漿是蜂群中哺育蜂頭部腺體的分泌物，主要用于哺育3 日齡以下幼蟲和飼喂蜂王，同時對蜜蜂的級型分化起著重要作用（王華峰，2018）。蜂王漿營養價值豐富，富含氨基酸、蛋白質、糖類、脂肪酸、維生素等人體必需的營養物質。此外，蜂王漿中特有的王漿酸（10-HDA）、王漿主蛋白（MRJPs 蛋白質族）等活性物質使得蜂王漿具有一定的藥用價值（Filippo，2016）。已有研究表明，蜂王漿在抗菌消炎、抗衰老、預防癌癥以及保護神經系統等方面均有一定的積極意義。除此之外，蜂王漿還是一種不可多得的抗氧化劑，因此，已有學者在該領域展開了一系列研究。

1 蜂王漿中的主要抗氧化物質

蜂王漿的抗氧化功效與其高活性成分有關，總體而言，目前蜂王漿中抗氧化物質大致可分為酶類和非酶類兩種。蜂王漿中的王漿酸（10-HDA）、王漿主蛋白（MRJPs） 等蛋白質類、肽類、酚類、超氧化物歧化酶等物質均具有一定的抗氧化活性，這些物質的協同作用能夠有效清除生物體內活性氧，減輕生物氧化損傷。

1.1 10-HDA 的抗氧化作用

10-HDA，即10-羥基- 癸烯酸，蜂王漿中特有的一種不飽和脂肪酸，因此也被稱為王漿酸，可占蜂王漿濕重的1.4%～1.8%左右（Bogdanov S，2011）。10-HDA的抗氧化作用與其化學結構密切相關。在10-HDA 的第10個碳原子上存在一個羥基, 此羥基由于氧原子的電負性較大,故氫原子上的電子較易失去,從而起到抗氧化作用（侯春生，2008）。Makino（2016） 發現10-HDA 的抗氧化作用是通過提高EC-SOD 的表達所實現的；結果表明，蜂王漿中10-HDA 及其衍生物4-HPO-DAEE 以及其他兩種脂肪酸（10-HDAA、DEA） 均能通過抑制組蛋白脫乙酰酶的活性來增強組蛋白H4 的乙酰化來提高ES-SOD 的表達，其中10-HDA 衍生物4-HPO-DAEE 的作用更強，這源于它除H4 外還能夠提高H3 的乙酰化。

1.2 蛋白質及其酶解產物的抗氧化作用

MRJPs 是蜂王漿中特有的蛋白質族，具有極高的生物活性，有著一定的抗氧化活性。Park（2020） 研究了重組蛋白AmMRJPs1-7 的抗氧化功效，結果表明，AmMRJPs1-7 可以通過降低Caspase-3 的活性起到抗氧化的作用，其中AmMRJPs2-5 的效果明顯；而且研究還證實了AmMRJPs1-7 清除DPPH 自由基的抗氧化能力，同樣是AmMRJPs2-5 的效果明顯。Gu（2018） 將蜂王漿酶解，并測定了其抗氧化活性，結果表明相同濃度下酶處理的蜂王漿對DPPH 的清除活性比蜂王漿高20%。朱作藝（2020） 發現蜂王漿蛋白肽對ABTS 自由基、DPPH 自由基、羥自由基以及超氧陰離子均有清除能力，其中對羥自由基的清除能力最強，多肽的抗氧化活性受氨基酸序列影響；此外，蜂王漿原蛋白并不具備抗氧化活性，其抗氧化活性主要來自蛋白酶的水解產物。Nagai T（2006） 使用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶三種蛋白酶對蜂王漿進行處理后測定其抗氧化活性，結果發現與蜂王漿水提物和酶提物相比，經過蛋白酶處理的蜂王漿抗氧化活性較高。這表明蜂王漿經蛋白酶處理后的分解產物的抗氧化活性確實高于蜂王漿本身，但蜂王漿本身是否也存在抗氧化作用仍需要進一步研究。

1.3 超氧化物歧化酶（SOD） 的抗氧化作用

超氧化物歧化酶（SOD） 能夠催化超氧陰離子自由基發生歧化反應，生成氧和過氧化氫，在人體的氧化和抗氧化平衡中起到至關重要的作用。Jeon（2014） 采用H2O2處理人類肝癌細胞HepG2，對蜂王漿的抗氧化作用進行了研究，結果表明，蜂王漿能有效減少過氧化脂的生成量，SOD 活性明顯增高，并表現出明顯的濃度依賴性，這與SOD 的自由基清除作用有關。與Jamnik（2007） 發現蜂王漿在酵母細胞中起抗氧化作用存在劑量依賴的結論相符。Asadi（2019） 研究了使用蜂王漿對精索靜脈曲張大鼠的保護作用，該病由氧化應激反應所導致，睪丸中的脂質過氧化增多，并破壞精子生成周期，最終導致不孕不育；研究發現RJ 治療組大鼠體內SOD 水平顯著上升，具有明顯的抗氧化作用，能夠有效改善由該病所引起的睪丸退化。

2 蜂王漿抗氧化活性的影響因素

通過研究發現，蜂王漿中含有大量具有抗氧化作用的活性物質，能夠起到清除機體自由基，維持氧化-抗氧化平衡的作用。而因取漿時間、貯藏溫度、處理方式等差異，蜂王漿的抗氧化活性也存在一定差異。

2.1 取漿時間

Zheng（2011） 對24 h、48 h、72 h 采收的蜂王漿成分進行了分析，結果表明，24 h 樣品中10-HDA和蛋白質含量隨著時間增加而減少，而SOD 活性則無明顯變化。Liu（2008）則認為24 h 采收的蜂王漿中SOD 活性在大多數情況下顯著高于48 h 和72 h，這可能與蜂群的地理、遺傳差異有關。因此，隨著采收時間的增加，蜂王漿中抗氧化活性物質減少，可能會對蜂王漿抗氧化效果產生影響。這在諶迪（2020） 的研究中得到了驗證，蜂王漿的抗氧化活性與MRJPs 含量存在一定正相關性；不同月份采收的蜂王漿中MRJPs 含量存在差異，總抗氧化活性也不同，其中5 月和9 月采收的蜂王漿總抗氧化能力最強。這與不同月份的氣溫不同有關，因此貯藏溫度對蜂王漿抗氧化活性也存在影響。

2.2 貯藏

陳婉玉（2013） 發現蜂王漿中SOD 活性與貯藏溫度及貯藏時間有關，其活性隨著貯藏溫度的升高和貯藏時間的延長而降低。而在朱紅娟（2013） 的研究中卻發現，蜂王漿的DPPH 自由基清除能力雖然在貯藏期中有所下降，但除了新鮮蜂王漿外，清除能力最強的為4℃下貯藏了6 個月的樣品。這可能與蜂王漿中其他不同活性成分的共同作用有關，具體機理尚待研究。

2.3 不同處理

姜建輝分析了新疆黑蜂蜂王漿的水溶性蛋白酶解產物的最佳酶解條件，結果顯示在溫度37℃、反應時間3 h、pH 2.0、E/S 2.5%時，酶解產物抗氧化活性最佳。Nabas Z（2014） 將蜂王漿和不同益生菌進行混合測定其抗氧化活性，結果表明，蜂王漿與益生菌的合生元作用具有顯著的抗氧化作用；其中添加7.5%蜂王漿和2.5%蜂王漿的嗜酸乳桿菌發酵乳樣品在500μg/mL 濃度下，對自由基可達96.8%和93.3%的清除率。王藝（2019） 研究了超聲波處理對蜂王漿蛋白功能和結構的影響，結果表明，超聲波處理能夠改善蜂王漿水解物的抗氧化活性，這與超聲波改變了其蛋白質結構有關。

2.4 其他蜂王漿產品

除新鮮蜂王漿外，市面上仍有許多蜂王漿產品銷售。陳艷珍（2014） 發現，由真空低溫干燥制成的蜂王漿凍干粉仍具有抗氧化功效，可提高實驗小鼠體內兩種抗氧化酶SOD 和CAT 的活性，從不同程度上延緩由于注射D-半乳糖引起小鼠體內的擬衰老變化。通過環糊精包和技術支撐的蜂王漿-β- 環糊精包合物能夠有效提高蜂王漿的穩定性和水溶性（劉佳霖，2018）。劉佳霖（2019） 研究發現蜂王漿-β- 環糊精包合物內活性物質營養價值與新鮮蜂王漿基本一致，自由基清除能力和總抗氧化能力有所減弱，但其抗氧化作用更加持久，而且具有良好的穩定性和水溶性等優點。

3 展望

蜂王漿是蜂王發育、產卵的“秘密武器”，其營養價值不言而喻。各國學者自發現蜂王漿的抗氧化作用以來便開展了一系列的研究，但有一些問題尚未解決。首先，關于蜂王漿中的王漿主蛋白本身是否具有抗氧化活性仍存在一定爭議，一部分學者認為其本身就具有一部分活性；但另一部分學者則認為原蛋白并不具備抗氧化活性，而其經過酶解后的產物具有抗氧化活性。其次，蜂王漿在貯藏過程中抗氧化活性變化的相關機理有待進一步研究。最后，大部分研究均從單一角度或少數幾個角度進行分析，如王漿酸的抗氧化活性研究、不同處理下王漿主蛋白抗氧化活性的變化等；而實際上，蜂王漿的抗氧化作用是在如王漿酸、王漿主蛋白、酚類、酶類等多種因素的共同作用下發揮作用的。因此，統籌多種不同因素對蜂王漿的抗氧化作用及其機理進行分析是其未來的研究方向之一。

此外，已有研究表明過度的氧化應激反應是阿爾茨海默等神經類疾病的誘因之一（Swomley，2017）。而近年來，人們逐漸發現了蜂王漿對神經系統的保護與修復作用（Yamaura，2013），因此該領域可能是未來蜂王漿抗氧化作用及藥用價值的研究方向之一。