不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛生長性能、瘤胃發酵及血液參數的影響

高朝煜 王晶晶 邱清華 祝仰祥 邱鑫君 曹兵海 蘇華維

(中國農業大學動物科技學院，北京 100193)

熱應激是指動物受到的環境刺激超過其本身體溫調節能力時，所引起的包括非特異性反應和特異性障礙在內的全身性適應癥，在全球變暖的大趨勢下，這無疑會降低動物的生產效率[1]。牛皮下脂肪厚、汗腺不發達，是典型的耐寒不耐熱的恒溫哺乳動物，有大量研究證實了高溫對肉牛生長過程的不利影響[2]。熱應激條件下，機體血流速度加快，從而增加肉牛皮膚與環境間的熱傳導和對流[3]，除此之外，也加快了肉牛的排汗和呼吸頻率，增強了機體的蒸發散熱機制，有70%～85%的熱量散失是通過出汗和呼吸完成的[4]。在熱應激反應中，下丘腦-垂體-腎上腺軸起到關鍵作用，這種作用將神經信息轉換成生理反應，不僅改變肉牛的血清生化指標，也通過影響瘤胃微生物進而影響瘤胃發酵模式，進一步導致營養物質消化率、瘤胃內總揮發性脂肪酸(TVFA)產量改變[5]。以血清中激素水平為例，熱應激條件下肉牛血清中催乳素水平持續上升，引起發情周期延長、配種受胎率下降等繁殖性能損害[6]；從瘤胃發酵模式考慮，熱應激會導致肉牛瘤胃中的pH降低，乳酸濃度增加[7]，總揮發性脂肪酸濃度下降[8]，從而對營養物質表觀消化率產生影響，使生產性能下降[9]。在國內，針對肉牛熱應激的研究主要集中在飼料添加劑對熱應激的緩解作用，通過改變飼糧結構減少體內產熱從而緩解熱應激的研究并不多見。為此，本試驗比較了熱應激條件下育肥期荷斯坦閹牛飼喂不同營養水平飼糧后在生長性能、瘤胃發酵及血清生化指標上的差異，以期為通過調節飼糧營養水平來緩解肉牛育肥過程中熱應激的養殖模式提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗時間與地點

試驗時間：2018-06-15—2018-09-29，共105 d，其中預試期15 d，正試期90 d。試驗地點：中國農業大學肉牛試驗基地，位于北京市昌平區南口鎮。

1.2 試驗設計與飼糧

試驗采用單因素試驗設計，選用10頭體重為(705.6±34.1)kg的20月齡健康荷斯坦閹牛，按照隨機區組設計分成2組，每組5頭，分別飼喂總可消化養分(TDN)為78%、粗蛋白質(CP)含量為12%的高營養水平飼糧和TDN為73%、CP含量為11%的低營養水平飼糧。高營養水平飼糧的配方依據《日本飼養標準·肉用牛(2008年版)》[10]設計，低營養水平飼糧的配方參考肉牛育肥場常用營養水平設計。試驗飼糧組成及營養水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養水平(干物質基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of test diets (DM basis) %

續表1項目Items低營養水平組Lownutrientlevelgroup高營養水平組Highnutrientlevelgroup食鹽NaCl0.670.83小蘇打NaHCO30.670.83石粉Limestone0.670.83預混料Premix1)0.670.83合計Total100.00100.00營養水平Nutrientlevels2)有機物OM94.6894.75粗蛋白質CP10.912.0中性洗滌纖維NDF30.420.8酸性洗滌纖維ADF16.210.4鈣Ca0.470.45磷P0.270.30總可消化養分TDN7378

1.3 飼養管理

本試驗采用全混合日糧(TMR)飼喂，每天飼喂2次(08:00和17:00)。所有牛只自由采食、自由飲水。試驗期間，每間隔 1 d清理1次水槽，保證試驗牛的健康飲水；每5 d清理1次牛舍，保證試驗牛健康舒適的生活環境。

1.4 樣品收集與測定

1.4.1 溫濕度信息的采集及呼吸頻率計次

正試期內，每天用溫濕度記錄儀記錄牛舍的溫度和濕度(數據采集間隔為30 min/次)，用于計算牛舍的溫濕度指數(THI)，并于每天06:00和14:00記錄試驗牛的呼吸頻率(RR)。THI計算公式：

THI=0.81×T+RH×(T-14.40)+46.40[11]。

式中：T為環境溫度；RH為相對濕度。

THI低于74，表明肉牛未遭受熱應激；若THI在75～78，肉牛為輕度熱應激狀態；THI若THI在79～83，肉牛為中度熱應激狀態；若THI大于84，則肉牛為重度熱應激狀態[11]。

1.4.2 生長性能的測定

在正試期的第1天和第90天晨飼前對試驗牛稱重，每天記錄飼喂量及剩料量，用于計算干物質采食量(DMI)、平均日增重(ADG)和飼料轉化效率(FCR)。

1.4.3 營養物質表觀消化率的測定

正試期內每個月連續3 d采集試驗牛飼料樣、剩料樣及糞樣。采用直腸取糞法收集糞樣(200 g左右)，每天采4次，加入10%的酒石酸，混勻并置于65 ℃烘箱中，烘干回潮，將粉碎后的樣品做好標記，保存待測。試驗采用內源指示劑法推算各營養物質的表觀消化率，計算公式為：

某營養物質表觀消化率(%)=100×(bc/ad)[12]。

式中：a為飼糧中該營養物質的含量；b為糞中該營養物質的含量；c為飼糧中酸不溶灰分的含量；d為糞中酸不溶灰分的含量。

測定試驗期間所采集的飼料樣、剩料樣和糞樣中干物質(DM)、CP、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)的含量，其中CP含量的測定方法為凱氏定氮法，EE含量的測定方法為索氏浸提法，Ash含量的測定方法為高溫灼燒法，NDF和ADF含量的測定方法為濾袋法。所有常規營養指標的測定均按照張麗英[13]主編《飼料分析及飼料質量監測技術》(第3版)中描述的方法進行。

1.4.4 瘤胃發酵參數的測定

正試期內，每15 d為1個采樣周期，分別在試驗的第15、30、45、60、75、90天采集瘤胃液樣品，共6次，采集方法為：試驗牛采食2 h后，用瘤胃液抽取管及真空泵采集瘤胃液約100 mL。將采集的瘤胃液立即轉入10 mL離心管和100 mL小方瓶中。待所有試驗牛采樣結束后，將離心管中瘤胃液以3 000 r/min的速度離心15 min，取上清液分裝在1.5 mL離心管中，做好標記并置于-80 ℃的冰箱中待測。

采集到瘤胃液后，立即測定并記錄其pH。瘤胃液中揮發性脂肪酸(VFA)濃度采用氣相色譜法進行測定。

1.4.5 血液參數的測定

正試期內，每15 d為1個采樣周期，分別在試驗的第15、30、45、60、75、90天采集血液樣品，共6次，采集方法為：晨飼前使用一次性靜脈采血針和真空負壓采血管對試驗牛進行尾靜脈采血。采集的血液于實驗室靜置2 h后，以3 000 r/min的速度離心15 min，制備血清并進行分裝。其中用于檢測血清生化指標及內分泌激素的樣品置于-20 ℃的冰箱中保存，用于檢測血清抗氧化指標及熱休克蛋白70(HSP70)的樣品置于-80 ℃待測。

血清生化指標采用HITACHI-7020型全自動生化分析儀檢測，包括葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、肌酐(CRE)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量及谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性。血清HSP70、生長激素(GH)、胰島素(INS)、皮質醇(COR)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測。血清過氧化氫酶(CAT)活性采用可見光法檢測，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性采用比色法檢測，超氧化物歧化酶(SOD)活性采用WST-1微板法檢測，總抗氧化能力(T-AOC)采用2,2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)快速法檢測。

1.5 數據統計分析

試驗數據先由Excel 2010進行初步整理，然后采用SPSS 22.0進行獨立樣本t檢驗(ttest)，當P<0.05時，認為差異顯著；當P<0.01時，認為差異極顯著；當0.05≤P<0.10時，認為差異有顯著的趨勢。

2 結果與分析

2.1 試驗期間的環境情況

正試期每天的溫度、相對濕度及THI的變化情況如圖1所示。試驗全期平均THI為74.42，表明試驗牛已經產生了熱應激。

圖1 正試期內溫度、相對濕度及THI變化情況Fig.1 Temperature,relative humidity and THI changes during formal test period

2.2 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛呼吸頻率的影響

圖2展示了正試期內2組試驗牛在06:00和14:00的呼吸頻率。結果顯示，試驗期內各采樣時期的06:00和14:00，低營養水平組和高營養水平組的呼吸頻率差異均不顯著(P>0.05)。

圖2 荷斯坦閹牛06:00和14:00的呼吸頻率Fig.2 Respiratory rate of Holstein steers at 06:00 and 14:00

2.3 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛生長性能的影響

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛生長性能的影響見表2。試驗全期(第1～90天)，高營養水平組荷斯坦閹牛的DMI顯著低于低營養水平組(P<0.05)，而ADG在數值上高于低營養水平組，FCR在數值上低于低營養水平組。

表2 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛生長性能的影響Table 2 Effects of diets with different nutrient levels on growth performance of fattening Holstein steers under heat stress conditions

2.4 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛營養物質表觀消化率的影響

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛營養物質表觀消化率的影響見表3。在第1～30天、第31～60天期間，高營養水平組CP的表觀消化率有高于低營養水平組的趨勢(P=0.090、P=0.061)；在第61～90天期間，高營養水平組NDF及ADF的表觀消化率顯著低于低營養水平組(P<0.05)；在第31～60天期間，高營養水平組OM的表觀消化率有高于低營養水平組的趨勢(P=0.083)。

表3 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛營養物質表觀消化率的影響Table 3 Effects of diets with different nutrient levels on nutrient apparent digestibility of fattening Holstein steers under heat stress conditions %

2.5 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛瘤胃發酵參數的影響

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛瘤胃液pH的影響見表4。在第15、30、45天，不同營養水平飼糧對荷斯坦閹牛的瘤胃液pH沒有產生顯著影響(P>0.05)；在第60和90天，高營養水平組的瘤胃液pH顯著低于低營養水平組(P<0.05)；在第75天，高營養水平組的瘤胃液pH有低于低營養水平組的趨勢(P=0.069)。

表4 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛瘤胃液pH的影響Table 4 Effects of diets with different nutrient levels on pH of rumen fluid of fattening Holstein steers under heat stress conditions

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛瘤胃液揮發性脂肪酸濃度的影響見表5。在各采樣時間點，高營養水平組與低營養水平組瘤胃液中乙酸濃度均沒有顯著差異(P>0.05)；在第90天，高營養水平組瘤胃液中丙酸濃度極顯著高于低營養水平組(P<0.01)；高營養水平組瘤胃液乙酸/丙酸的值在第75天顯著低于低營養水平組(P<0.05)，在第90天極顯著低于低營養水平組(P<0.01)；與低營養水平組相比，高營養水平組瘤胃液中戊酸濃度在第15和75天有上升的趨勢(P=0.050、P=0.077)，在第90天顯著升高(P<0.05)；低營養水平組瘤胃液中異戊酸濃度在第15、30、90天極顯著低于高營養水平組(P<0.01)；高營養水平組與低營養水平組瘤胃液中總揮發性脂肪酸濃度在各采樣時間點均差異不顯著(P>0.05)。

表5 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛瘤胃液揮發性脂肪酸濃度的影響Table 5 Effects of diets with different nutrient levels on volatile fatty acid concentrations in rumen fluid of fattening Holstein steers under heat stress conditions

續表5項目Items低營養水平組Lownutrientlevelgroup高營養水平組HighnutrientlevelgroupSEMP值P-value第30天Day301.121.060.150.871第45天Day451.040.920.090.573第60天Day600.910.590.110.170第75天Day751.010.720.090.135第90天Day900.930.860.040.443丁酸Butyricacid/(mmol/L)第15天Day1512.3214.530.530.027第30天Day3013.1813.000.970.939第45天Day4512.4011.100.770.448第60天Day6014.3114.290.640.991第75天Day759.2911.291.080.412第90天Day9011.6411.050.660.709異戊酸Isovalericacid/(mmol/L)第15天Day151.242.720.28<0.001第30天Day301.362.960.30<0.001第45天Day451.361.870.190.203第60天Day601.292.170.300.156第75天Day750.951.710.210.058第90天Day901.231.980.160.007戊酸Valericacid/(mmol/L)第15天Day151.001.830.220.050第30天Day300.981.310.100.121第45天Day451.001.210.090.282第60天Day601.071.420.130.205第75天Day750.711.360.180.077第90天Day900.941.310.080.013總揮發性脂肪酸TVFA/(mmol/L)第15天Day1591.2999.212.610.137第30天Day3091.62101.445.090.388第45天Day4587.9090.683.860.755第60天Day6098.4898.422.720.992第75天Day7577.2797.027.640.230第90天Day9084.7297.626.280.341

2.6 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清生化指標的影響

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清生化指標的影響見表6。在整個試驗期內，不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清中TG、TP、ALB、UN、CRE、HDL-C含量與AST、ALP活性沒有產生顯著影響(P>0.05)；與低營養水平組相比，高營養水平組血清中TC、LDL-C含量在第30天均有下降的趨勢(P=0.078、P=0.080)；高營養水平組血清中ALT活性在第90天顯著低于低營養水平組(P<0.05)；高營養水平組血清中HSP70含量在第75和90天有低于低營養水平組的趨勢(P=0.097)。

表6 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清生化指標的影響Table 6 Effects of diets with different nutrient levels on serum biochemical indexes of fattening Holstein steers under heat stress conditions

續表6項目Items低營養水平組Lownutrientlevelgroup高營養水平組HighnutrientlevelgroupSEMP值P-value總蛋白TP/(g/L)第15天Day1552.7249.442.670.570第30天Day3054.8350.822.090.376第45天Day4546.5846.382.280.969第60天Day6048.8852.332.830.584第75天Day7551.2644.723.190.334第90天Day9056.7855.722.550.849白蛋白ALB/(g/L)第15天Day1530.9629.501.100.539第30天Day3029.8027.720.780.202第45天Day4527.5328.951.130.571第60天Day6028.9531.051.410.502第75天Day7531.4631.601.080.952第90天Day9033.5432.140.920.478尿素氮UN/(mmol/L)第15天Day152.303.260.140.377第30天Day302.712.690.180.955第45天Day452.942.740.080.224第60天Day603.002.400.250.266第75天Day753.033.090.190.883第90天Day902.933.170.130.413肌酐CRE/(μmol/L)第15天Day1574.2469.102.680.368第30天Day3078.1579.823.270.819第45天Day4566.1871.482.580.344第60天Day6070.3571.233.760.907第75天Day7573.1276.702.730.551第90天Day9077.3473.881.780.361高密度脂蛋白膽固醇HDL-C/(mmol/L)第15天Day151.041.070.050.785第30天Day300.930.870.030.372第45天Day450.850.840.040.960第60天Day600.910.930.040.840第75天Day751.011.000.050.903第90天Day901.141.040.040.266低密度脂蛋白膽固醇LDL-C/(mmol/L)第15天Day150.650.620.040.737第30天Day300.600.550.040.080第45天Day450.520.550.030.635第60天Day600.490.520.020.500第75天Day750.540.550.030.945第90天Day900.620.640.020.616熱休克蛋白70HSP70/(pg/mL)第15天Day15777.72562.7599.260.312

續表6項目Items低營養水平組Lownutrientlevelgroup高營養水平組HighnutrientlevelgroupSEMP值P-value第30天Day30692.98676.22101.560.941第45天Day45720.17611.44103.360.634第60天Day60572.88494.4163.990.578第75天Day75687.66436.9775.180.097第90天Day90687.57425.1176.680.087

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清激素含量的影響見表7。在整個試驗期內，高營養水平組與低營養水平組試驗牛血清中激素含量均沒有顯著差異(P>0.05)。

表7 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清激素含量的影響Table 7 Effects of diets with different nutrient levels on serum hormone contents of fattening Holstein steers under heat stress conditions

不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清抗氧化指標的影響見表8。與低營養水平組相比，高營養水平組血清中ROS含量在第15、45、75和90天有降低的趨勢(P=0.067、P=0.064、P=0.096、P=0.050)，血清中CAT活性在第45天顯著低于低營養水平組(P<0.05)；高營養水平組血清中氧化應激指數(OSI)在第15和90天有低于低營養水平組的趨勢(P=0.057、P=0.075)，在第45天則顯著低于低營養水平組(P<0.05)；在整個試驗期內，低營養水平組與高營養水平組血清中GSH-Px與SOD活性、MDA含量、T-AOC均沒有顯著差異(P>0.05)。

表8 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清抗氧化指標的影響Table 8 Effects of diets with different nutrient levels on serum antioxidant indexes of fattening Holstein steers under heat stress conditions

續表8項目Items低營養水平組Lownutrientlevelgroup高營養水平組HighnutrientlevelgroupSEMP值P-value氧化應激指數OSI第15天Day150.950.620.090.057第30天Day301.180.820.150.267第45天Day451.200.680.130.037第60天Day601.080.720.120.145第75天Day750.900.650.070.110第90天Day900.950.680.080.075

3 討 論

3.1 THI與呼吸頻率

THI是將溫度和濕度結合起來，綜合評價環境最常用的一個指標[14]。據報道，當環境中THI大于74時，肉牛就會產生熱應激[11]。在本研究中，試驗全期平均THI為74.42，表明試驗牛已經產生了熱應激。06:00和14:00是一天中有代表意義的時刻，因此本研究采集了這2個時刻下試驗牛的呼吸頻率。結果顯示，14:00的呼吸頻率在數值上高于06:00。由于目前沒有熱應激條件下肉牛呼吸頻率范圍的標準[15]，故本試驗參考奶牛熱應激呼吸頻率的標準：無熱應激每分鐘20次，輕度熱應激每分鐘50～60次，中度熱應激每分鐘80～120次，重度熱應激每分鐘120～160次[16]。本試驗中，試驗牛的呼吸頻率在一定程度上符合輕度熱應激及以上劃分標準。

3.2 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛生長性能和營養物質表觀消化率的影響

熱應激條件下，肉牛的采食量下降、機體基礎代謝率和糖異生加強致使機體出現生長緩慢、免疫能力下降等負面影響[11]。在本研究中，高營養水平組的DMI顯著低于低營養水平組，該結果與Drackley等[17]、閆方權等[18]在奶牛上研究結果一致。此外，從數值上看，高營養水平組的ADG和FCR優于低營養水平組，這也表明提高飼糧的營養水平在一定程度上改善了荷斯坦閹牛遭受熱應激時的生長性能。本研究中，高營養水平組DM的表觀消化率在熱應激期時出現高于低營養水平組的趨勢，這與前人的研究基本一致。在第61～90天，高營養水平組NDF與ADF的表觀消化率顯著低于低營養水平組，這與高營養水平組試驗牛飼糧中的精料比例較高，使得瘤胃液pH下降，導致瘤胃中纖維分解菌數量減少有關[19]。在第1～60天期間，高營養水平組CP的表觀消化率有高于低營養水平組的趨勢，這可能是因為隨精料比例的增加，瘤胃微生物產生了更多的氨態氮(NH3-N)，因而增強了微生物蛋白的合成和后續的消化吸收過程。

3.3 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛瘤胃發酵的影響

瘤胃液pH用于評價瘤胃發酵狀況，主要受飼糧結構、唾液分泌量、采食速度、瘤胃內揮發性脂肪酸和其他有機酸的生成、瘤胃吸收和排出速度等因素的影響，其變化主要與飼糧組成和營養水平有關[20]。給奶牛飼喂不同精粗比的飼糧，隨著精粗比的上升，瘤胃液pH有下降的趨勢[21]。本試驗中，在第60和90天，高營養水平組的瘤胃液pH顯著低于低營養水平組，這與以上研究結果一致，但在其他采樣時間，不同營養水平飼糧沒有對瘤胃液pH產生顯著影響，其原因還需要進一步的研究。瘤胃發酵模式和揮發性脂肪酸產量受飼糧營養水平和結構的影響。當飼糧中精料比例升高(淀粉含量較高)時，瘤胃中淀粉分解菌占據主要優勢，使瘤胃發酵模式主要以丙酸發酵為主，丙酸和乳酸產量升高；此外，飼糧中淀粉含量升高使得瘤胃中的原蟲活性增強、數目增多，造成瘤胃中丁酸的濃度及血液中的β-羥丁酸含量升高[22]。纖維含量較高的飼糧導致瘤胃中的纖維分解菌占主要優勢，乙酸和甲烷產量提高，乙酸發酵增加[23]。本研究中高營養水平組瘤胃液中丙酸濃度在第90天顯著高于低營養水平組，高營養水平組瘤胃液乙酸/丙酸的值在第75和90天顯著低于低營養水平組，這主要是因為高營養水平組絲糧的精料水平較高，使得瘤胃中淀粉分解菌占據優勢地位，纖維降解菌作用減弱，這也佐證了高營養水平組NDF和ADF的表觀消化率低的結果。研究表明，瘤胃液中戊酸和異戊酸濃度隨著非纖維性碳水化合物/中性洗滌纖維的提高而顯著增加[20]。本試驗中，高營養水平組瘤胃液中異戊酸濃度幾乎全期都顯著高于低營養水平組。已有研究證實飼糧中添加異戊酸可以降低瘤胃液中NH3-N濃度并增加機體的內源氮沉積[24]，結合本試驗中高營養水平組CP的表觀消化率較高，說明高營養水平組瘤胃中出現了更適宜的能氮平衡，這也從側面證實了為何高營養水平組在熱應激條件下生長性能更好。

3.4 不同營養水平飼糧對熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清生化指標的影響

研究表明，肉牛血清中GLU的含量會隨著熱應激時間的延長而降低[25]。本研究中，第1～60天，不同營養水平飼糧并沒有對試驗牛血清中GLU含量產生顯著影響；但與第61～90天相比，熱應激期血清GLU含量在數值上要低，這可能是因為機體需要分解糖原來抵抗熱應激。Scharf等[26]報道，當肉牛處于慢性熱應激時，血清中GLU含量會降低，本研究結果與該結論相符。ALT和AST活性是判斷肝臟損傷的指標，研究表明，在一定范圍內提高飼糧的能量水平能夠降低奶牛血清中ALT與AST的活性[18]。在本研究中，不同營養水平飼糧對第90天試血清ALT活性產生了影響，說明在長期熱應激條件下，適當提高飼糧營養水平能降低肝臟的損傷程度。HDL-C與LDL-C作為載脂蛋白，與血液中膽固醇的運輸與血脂的代謝功能息息相關。HDL-C主要負責逆向轉運膽固醇，將脂類由外周轉運至肝臟，并將其分解代謝；LDL-C負責轉運血液中的膽固醇，將脂類由肝臟向外周轉運[27]。本研究結果表明，在第30天時，與低營養水平組相比，高營養水平組試驗牛血清中LDL-C的含量有下降的趨勢，這與血清中TCHO含量檢測結果相一致，進一步證實了高營養水平對熱應激下育肥荷斯坦閹牛脂質代謝方面的改善作用。熱休克蛋白(HSP)是機體熱應激后起受損細胞分子伴侶功能的有益化合物[28]，在所有HSP中，HSP70是對溫度最敏感且熱應激后最易誘導的蛋白質[29-30]。據報道，HSP70的含量在熱應激時升高[31]。在本研究中，高營養水平組血清中HSP70的含量有低于低營養水平組的趨勢，也說明了提高飼糧營養水平對熱應激的緩解起到了積極作用。

GH具有促進骨骼、內臟和全身生長的作用，并促進蛋白質的合成和脂肪的分解。INS是體內唯一的降血糖激素，同時具有促進糖原、脂肪和蛋白質合成的作用，還能與GH協同，對動物的生長起促進作用[32]。據報道，熱應激條件下奶牛血液中INS含量會下降，導致機體分解代謝加強，同時抑制了GH的分泌，導致奶牛的生產性能下降、免疫力降低[33]。血液中COR的含量被廣泛用作評價應激的指標，但其作用機理尚不明確。有報道指出，動物處于急性熱應激時，血清COR含量顯著升高，但在慢性熱應激時，血清COR含量可能會降低[34]。在本研究中，不同營養水平飼糧沒有對試驗牛血清中GH、INS及COR含量產生顯著影響，可能與飼糧營養水平的差異不夠明顯有關。

研究表明，熱應激能使肉牛機體內ROS與自由基的含量增加[35]，導致機體氧化和抗氧化系統的平衡被打破[36]。氧化應激是基于促氧化劑和抗氧化劑之間的不平衡定義的，因此我們不僅要分別評估氧化劑和抗氧化劑的濃度，還要通過比例分析它們之間的關系，這個比例就是OSI(OSI=ROS/T-AOC)。Abuelo等[37]認為，OSI可以作為評估氧化應激程度和量化奶牛氧化還原狀態的一個新指標，因為在他們的研究中，通過OSI的聯合評估，發現了單獨評估促氧化劑或抗氧化劑時不存在的差異。因此，OSI的增加表明氧化應激的風險增高，而這種風險可能是ROS過量產生和身體抗氧化能力下降的結果。ROS是在代謝和生理過程中產生的，主要通過酶和非酶的抗氧化機制去除它們在生物中可能發生的有害氧化反應[38]。動物體內清除ROS的酶主要包括SOD、GSH-Px和CAT。T-AOC代表體內酶性和非酶性抗氧化物的總體水平，能直接反映機體抗氧化系統的功能狀態。MDA是脂質過氧化終極產物之一，能引起細胞代謝及功能的障礙[39]。研究表明，肉牛產生熱應激時，血液中T-AOC、SOD與GSH-Px活性下降，MDA含量增加[35]。本研究結果表明，不同營養水平飼糧并沒有對試驗牛的血清T-AOC、SOD和GSH-Px活性產生顯著影響，而在第15、45和90天，高營養水平組試驗牛血清ROS含量有低于低營養水平組的趨勢，OSI的結果也表現出了相同的趨勢。綜合試驗全期來看，說明提高飼糧營養水平對因熱應激導致的氧化應激起到了一定的緩解作用。

4 結 論

提高飼糧營養水平降低了熱應激下育肥荷斯坦閹牛的DMI和瘤胃液pH，并在數值上提高了生長性能，同時促進了瘤胃中的丙酸發酵，還降低了熱應激條件下育肥荷斯坦閹牛血清中HSP70的含量，在一定程度上緩解了氧化應激的損害。