血清MK、S100A9、PTX3水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累的相關性*

陳袁園 袁伯穩 張海濤 賁秀鸞 劉媛媛

(南通大學附屬海安醫院 1.兒科；2.檢驗科，江蘇 海安 226600)

過敏性紫癜是一種多系統性血管炎，與免疫球蛋白A介導的免疫反應有關，主要影響皮膚、關節、腸道和腎臟[1]，是兒童非血小板減少性皮膚紫癜的最常見原因之一[2]。S100鈣結合蛋白A9(S100A9)在炎癥過程和免疫應答的調節中起重要作用[3]。S100A9可用于鑒定過敏性紫癜患兒疾病嚴重程度[4]。正五聚素蛋白3(Pentraxin protein 3，PTX3)促進纖維細胞分化并參與調節炎癥和補體激活[5]。PTX3在過敏性紫癜的多系統性血管炎中具有重要作用，參與紫癜性腎炎的發展，并可作為早期生物標志物預測過敏性紫癜[6]。中期因子(midkine,MK) 促進細胞生長，遷移和血管生成[7-8]。Su等[9]發現血清MK水平在過敏性紫癜患兒中顯著升高。因此，本研究旨在探討血清中MK、S100A9、PTX3水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累的相關性以及診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入2015年3月～2019年3月我院收治的過敏性紫癜患兒118例為觀察組。納入標準：均經我院病理科依照歐洲風濕病聯盟和兒科風濕病歐洲學會定義的標準進行確診[10]。排除標準：①患有精神疾病者。②長期使用皮質類固醇激素及免疫抑制劑者。③患有其他腎臟疾病者。④患有癌癥者。納入同期至我院進行健康體檢的兒童118例為對照組。患兒家屬均簽署知情同意書，并經醫院倫理委員會批準。

1.2 指標檢測 采集觀察組和對照組清晨肘前靜脈血6 mL，進行酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。MK的ELISA試劑盒購自上海遠慕生物科技有限公司(貨號：YM-QP11653)。S100A9的ELISA試劑盒購自上海群己生物科技有限公司(貨號：KA1050)。PTX3的ELISA試劑盒購自上海古朵生物科技有限公司(貨號：GD-G10815)。根據試劑盒的說明書進行ELISA檢測。采用生化檢測儀測定血尿或蛋白尿水平。

2 結果

2.1 兩組小兒的年齡、性別、體質量指數等一般資料比較 兩組小兒的年齡、性別、體質量指數等一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組基礎臨床資料

2.2 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的表達量 觀察組患兒血清中MK、S100A9、PTX3的表達量均顯著高于對照組兒童(P<0.05)，見表2。

表2 兩組小兒血清中MK、S100A9、PTX3的表達量

2.3 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的ROC曲線、AUC、靈敏度、特異度和截斷值 以MK的陽性臨界值為268.32(pg/mL)，其診斷靈敏度為89.35%，特異度為86.32%；以S100A9的陽性臨界值為24.53(μg/ mL)，其診斷靈敏度為94.26%，特異度為94.21%；以PTX3的陽性臨界值為1.97 (ng/mL)，其診斷靈敏度為90.18%，特異度為91.42%。見表3、圖1。

表3 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的AUC、靈敏度、特異度和截斷值

圖1 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的ROC曲線

2.4 血清中MK、S100A9、PTX3聯合診斷過敏性紫癜患兒 患有過敏性紫癜的為真陽性，未患有過敏性紫癜的為真陰性。以MK的陽性臨界值為268.32(pg/mL)，S100A9的陽性臨界值為24.53(μg/mL)，PTX3的陽性臨界值為1.97 (ng/mL)為診斷標準，三者滿足其一者為聯合診斷陽性，反之則為聯合診斷陰性；三者聯合對過敏性紫癜的診斷的的靈敏度為97.46%(115/118)，特異度為87.28%(103/118)，準確度為92.37%(218/236)，見表4。

表4 血清中MK、S100A9、PTX3水平聯合診斷過敏性紫癜患兒[n(×10-2)]

2.5 血清中MK、S100A9、PTX3水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累的相關性 血清中MK、S100A9、PTX3水平均與過敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(P<0.05)，見表5。

表5 血清中MK、S100A9、PTX3水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累的相關性

3 討論

過敏性紫癜是影響兒童最常見的系統性小血管炎之一[11]。近年來過敏性紫癜的發病率有所增加，每10萬名17歲以下兒童中有10～30例。臨床表現為可觸及的紫癜，關節炎或關節痛，胃腸道癥狀和腎臟疾病。因此，盡早對過敏性紫癜進行診斷迫在眉睫。

PTX3可以通過促炎細胞因子在外周組織中由幾種細胞產生[12]。據報道，血管性血管炎，肺動脈高壓和免疫相關疾病患者血漿PTX3濃度較高[13]。過敏性紫癜是一種典型的免疫相關疾病，伴有多系統性小血管炎。在本研究中，觀察組兒童血清PTX3濃度高于對照組。PTX3的過量產生可能與血管壁周圍的炎性細胞浸潤和促炎因子激活有關[14]。Bussolati等[15]發現PTX3在IgA腎病患者腎活檢系膜區域的腎小球系膜和內皮細胞上有致密染色；相反，來自其他腎小球腎病患者的正常腎組織和活組織檢查顯示PTX3表達低。在本研究中，PTX3水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關。PTX3可能通過產生二次介質如血小板活化因子和組織因子而導致腎損傷[16]。因此，腎小球系膜細胞可用作PTX3的產生者和靶標，且PTX3可能參與腎損傷。

S100A9是一種鈣結合細胞溶質蛋白，主要存在于中性粒細胞和巨噬細胞中。S100A9在患有多種炎癥的患者中升高[17]。S100A9在胃腸系統炎癥期間釋放并在非炎癥條件下幫助分化[18]。腎臟受累是過敏性紫癜患者的重要預后因素，大約30%的病例有腎臟受累。在本研究中，S100A9與過敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關。體內研究結果表明，高S100A9水平可能是過敏性紫癜患兒腎臟受累的間接指標。由于腎臟受累可能發生在從發病開始的前幾天[19]，因此可以更密切地監測具有升高S100A9水平的病例以分析其在腎臟受累中的作用。然而，這需要在更大的樣本量中進一步研究。

MK是一種13 kDa肝素結合生長因子，最初被鑒定為參與胚胎發育協調的分子。在健康成人中，MK蛋白的檢測水平非常低[20]。MK是Treg細胞擴增的關鍵抑制因子，并且增加了自身反應性Th1和Th17細胞的數量[21]。過敏性紫癜患者的Th17細胞高于健康對照組，但過敏性紫癜患者Treg細胞的頻率低于健康對照組[22]。過敏性紫癜患者中存在Th17/Treg細胞失衡，并且似乎與疾病活動密切相關。因此，MK可能通過促進炎癥細胞的聚集而參與過敏性紫癜的發病機制，也可能參與細胞因子的調節。MK參與腎臟的發育，在腎臟器官發生過程中，被認為可調節后腎間充質的上皮和間質祖細胞群之間的平衡[23]。本研究發現血清中MK水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關。研究[24]表明，MK在腎臟缺血性損傷后直接增強炎癥細胞的遷移，并通過誘導趨化因子促進缺血性組織損傷的增加。本研究檢測兩組血清中MK、S100A9、PTX3的表達量并評價其聯合診斷過敏性紫癜的價值，發現血清中MK、S100A9、PTX3水平均與過敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(P<0.05)，而血清中MK、S100A9、PTX3聯合對過敏性紫癜的診斷的的靈敏度為97.46%，特異度為87.28%，準確度為92.32%。

4 結論

血清MK、S100A9、PTX3的表達水平與過敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關，其表達量檢測可作為診斷過敏性紫癜患兒的潛在標志。