青海湖裸鯉人工繁殖技術(shù)

葛京 張耀紅 徐建華 陳力 郭敏莉

摘 要：總結(jié)了淡水培育的青海湖裸鯉（Gymnocypris przewalskii）的人工繁殖技術(shù)，包括親魚培育、人工繁育等。2015—2018年繁育試驗中，親魚平均相對懷卵量為 46.20粒/g 體重，催產(chǎn)率可達80.00%，受精率8952%，孵化率95.46%。

關(guān)鍵詞：青海湖裸鯉（Gymnocypris przewalskii）;人工催產(chǎn);人工授精;人工孵化

青海湖裸鯉（Gymnocypris przewalskii）屬鯉科，裸鯉屬，原產(chǎn)于高海拔地區(qū)的鹽堿水域，是中國名貴的冷水魚類之一，因其味道鮮美而倍受人們喜愛，市場潛力大，其人工養(yǎng)殖極具發(fā)展前途[1]。青海湖裸鯉能在內(nèi)陸淡水中培育且能繁育成功[1-7]。為豐富當?shù)乩渌~品種，河北省保定市綜合養(yǎng)殖試驗推廣站（以下簡稱“試驗站”）自2013年引進內(nèi)陸淡水培育的青海湖裸鯉苗種，放養(yǎng)于淶源縣昌源漁場，在內(nèi)陸淡水環(huán)境中養(yǎng)殖并進行后備親魚培育，2015—2021年，連續(xù)7年進行人工繁殖，取得一些經(jīng)驗，現(xiàn)將人工繁殖技術(shù)總結(jié)如下。

1 親魚培育

1.1 親魚來源

后備親魚從河北省青海裸鯉良種場引進。2013年購買1 000尾（規(guī)格100～200 g/尾，以下稱“首批親魚”），2015年開始人工繁育;2017年引進2 000尾（規(guī)格200～350 g/尾）。2018年6月，因陸續(xù)作為商品魚出售，兩次引進的后備親魚共剩余300尾，開始并池混養(yǎng)（以下稱“混養(yǎng)親魚”），混養(yǎng)親魚中首批親魚占30%，2019年開始人工繁育。人工繁育時親魚均為4齡以上。

1.2 水源

水源為拒馬河源頭的泉水，水流暢通，水質(zhì)清新、無污染、符合養(yǎng)殖用水標準。

1.3 池塘培育條件

水泥池面積150～250 m2，水深0.8～1.2 m。微流水養(yǎng)殖，進水口處流速40～50 dm3/s。溶解氧≥13 mg/L。冬季水溫3～6 ℃，夏季水溫最高17 ℃。親魚放養(yǎng)密度≤10 kg/m2。

1.4 飼料及投喂

投喂虹鱒親魚飼料（粗蛋白≥42.0%，粗脂肪≥8.0%，粗纖維≤5.0%，粗灰分≤14.0%，水分≤12.0%，賴氨酸≥2.6%，總磷≥0.9%），日投喂兩次，日投喂量為親魚體重的1%，并視水溫、天氣、魚體情況適當調(diào)整。人工繁育期間投喂量為親魚體重0.5%～0.7%。

1.5 日常管理

堅持每日3～4次巡池，觀察魚的活動情況，及時撈取池面上樹葉等雜物，檢查進排水口防止堵塞。做好養(yǎng)殖、用藥、銷售三項記錄。

2 人工繁育

2.1 雌雄鑒別

主要借助臀鰭形狀鑒別。雄性個體的臀鰭呈圓形，邊緣有較深的缺刻，最后2枚分支鰭條具有明顯的角質(zhì)倒鉤;雌性個體的臀鰭呈斜三角形或橢圓形，末端尖形，邊緣光滑無缺刻。

2.2 成熟度鑒別

繁殖季節(jié)青海湖裸鯉體表出現(xiàn)第二性征—“追星”，即白色顆粒狀凸起，手摸有刺突感。多分布于臀鰭和尾柄等部位，雌魚的“追星”在數(shù)量和大小上遠不如雄魚。繁殖末期，“追星”消失，此時，產(chǎn)卵活動結(jié)束[2]。

成熟好的雄魚生殖孔周圍柔軟，輕壓腹部，即見精液流出。成熟雌魚腹部膨大柔軟，生殖孔紅腫外突，當尾柄上提時，兩側(cè)卵巢下垂輪廓明顯，輕壓腹部有卵粒流出體外。

2.3 人工催產(chǎn)

2.3.1 挑選親魚 親魚3齡以上，體質(zhì)健壯、無病無傷、無畸形。為保證授精效果，親魚雌雄比為1∶（1.5～2）。

2.3.2 催產(chǎn)時機 一般在四月下旬水溫穩(wěn)定在13 ℃左右時進行催產(chǎn)。雄魚能擠出精液，鏡檢精子活力較好，且有少量追星時，對腹部變軟的雌魚進行催熟。

2.3.3 催產(chǎn)藥物及使用方法 采用促黃體素釋放激素A2催熟催產(chǎn)。用生理鹽水稀釋后按魚體重注射，劑量2～4 μg/kg，第一次注射4 d后檢查，視情況進行第二次、第三次注射。第二次、第三次注射后間隔3 d檢查。注射部位為腹鰭基部，針頭與魚體呈45°角，入針深度0.5 cm左右。催產(chǎn)后沒有特意加大流量刺激親魚。

2.4 人工授精

采用濕法授精。繁殖條件成熟后，用手輕擠雌親魚腹部，使卵自然流出，置于浸泡在等滲液中的密眼塑料筐中，魚卵要全部沒入等滲液。隨后提起密眼塑料筐，稍微控水后將魚卵緩緩倒入另一干燥、光滑的新塑料盆，隨即擠入雄親魚精液，輕攪均勻，接著加入少量的等滲液繼續(xù)攪拌，使精卵充分接觸。靜置1～2 min再換清水洗卵2～3次，隨后置于微流水中，吸水55～65 min，待卵膜硬化并富有彈性，計數(shù)裝入孵化器中進行孵化。

需要注意的是：整個采卵、授精及清洗的過程，必須在遮光條件下進行，防止魚卵被陽光直接照射。

2.5 親魚產(chǎn)后消毒

產(chǎn)后親魚用聚維酮碘（有效碘1%）30 mL/L流水消毒1 h或甲醛100 mL/L停水消毒30 min或食鹽60 g/kg浸泡1 min。

2.6 人工孵化

2.6.1 用水 孵化用水采用泉水或者淺表地下水，無雜質(zhì)和懸浮物，溶氧高于7.0 mg/L，水溫9～14 ℃。

2.6.2 孵化器 采用桶式孵化器孵化受精卵。水流自桶底流經(jīng)全部魚卵后從上部溢出。同批卵占用一個或以上孵化桶，非同批次卵不能合用孵化桶。孵化桶有效容積約為10 L，裝卵4萬～6萬粒/桶。調(diào)節(jié)水流使表層受精卵浮起不超過3 cm。

2.6.3 破膜 待發(fā)眼卵破膜時把卵轉(zhuǎn)入玻璃缸中繼續(xù)孵化。玻璃缸直徑2 m，缸深50 cm。因魚苗纖細如發(fā)絲，出水口處需要包裹一層密網(wǎng)（100目）防逃逸。玻璃缸注水量10～15 L/min。玻璃缸內(nèi)放置塑料孵化筐（規(guī)格：長55 cm，寬45 cm，高18 cm）4個。調(diào)節(jié)孵化缸進水方向，使孵化筐順時針或逆時針勻速轉(zhuǎn)動。用泡沫塊調(diào)整孵化筐入水深度，使筐內(nèi)受精卵在水面10 cm以下。發(fā)眼卵0.8萬～1萬粒/筐，均勻鋪放。孵化筐上覆一層窗紗（18目），既可阻止受精卵漏出，又方便魚苗破膜后鉆出，進入玻璃缸。玻璃缸底可鋪設(shè)納米管或氣石增氧，保證溶氧在7.0 mg/L。氣石位于相鄰塑料孵化筐縫隙的下方，以免頻繁振動受精卵。剛孵化出來的魚苗伏臥于缸底，體質(zhì)嫩弱，顏色很淡，具有卵黃囊，體長0.7～1.1 cm。魚苗極易集群，要及時用軟刷、尼龍抄網(wǎng)等推散，避免缺氧窒息。

在水溫12～14 ℃下，經(jīng)6～8 d后，卵黃囊逐漸吸收，體表黑色素增多，游動能力增強，仔魚開始上浮。

2.6.4 孵化期管理 整個孵化期間注意遮光和避免機械震動。隨時挑揀孵化筐內(nèi)的水霉卵及死卵團。及時清除玻璃缸內(nèi)的卵皮和死苗，刷洗出水孔，保持水流清新、暢通。

2.6.5 水霉防治 受精卵孵化第三天開始使用甲醛溶液80～100 mg/L流水消毒20～30 min，到發(fā)眼前兩天結(jié)束，1次/d。

3 結(jié)果與分析

2015—2018年和2019—2021年兩個階段人工繁殖過程中，死亡雌魚數(shù)量、相對懷卵量、受精率、孵化率無明顯變化，但年催產(chǎn)率下降明顯，由80.00%降至47.86%。見表1。

4 討論與結(jié)論

4.1 催產(chǎn)情況

4.1.1 催產(chǎn)藥物 各文獻中采用的催產(chǎn)藥物主要為LRH-A2、DOM，而本試驗中沒有采用DOM，催產(chǎn)注射后檢查親魚的間隔時間也有所延長，但催產(chǎn)結(jié)果比較理想。見表2。

4.1.2 催產(chǎn)率 關(guān)于催產(chǎn)率，康鵬天[6]的數(shù)據(jù)最高，為84.6%，閆保國等[3]的最低，為36%。閆保國等[1]認為與四大家魚相比，青海湖裸鯉的催產(chǎn)率非常低，只有30%～40%，原因有多種猜測，但具體沒有定性。本試驗中2015—2018年催產(chǎn)率平均80.00%，到2019—2021年催產(chǎn)率明顯下降，為47.86%。下降原因可能是種質(zhì)退化，也可能是親魚環(huán)境變化所致，培育條件中缺乏某些刺激，延緩了生殖發(fā)育。裸鯉原產(chǎn)于高海拔地區(qū)的鹽堿水湖泊中，每到繁殖季節(jié)來臨時，就成群結(jié)隊洄游，溯河而上尋找產(chǎn)卵場[9]。而本試驗環(huán)境為內(nèi)陸淡水，鹽堿度不同，其生存的水域面積也差異巨大。

4.1.3 催產(chǎn)次數(shù) 雌親魚一般注射1～3次就能成熟可采卵。2020年在試驗中發(fā)現(xiàn)，雌魚注射催產(chǎn)針劑超過三次，如果還按照原檢查魚的間隔時間（即3～4 d），80%以上會錯過采卵期，雖然親魚腹部膨大，很柔軟，肛門紅腫外翻明顯，但擠壓腹部不能出卵，此類親魚死亡率在70%以上。死魚腹部極漲大，解剖發(fā)現(xiàn)卵子過熟。根據(jù)以往經(jīng)驗，如果注射次數(shù)增多，檢查魚的間隔時間要比前期縮短，以免親魚過熟。關(guān)于雄魚注射問題，因為雄魚數(shù)量大大多于雌魚，且發(fā)育早于雌魚至少一個月以上，每次檢查中有精液的雄魚數(shù)量很多，所以雄魚第一次不用注射。第二、三次視雌魚數(shù)量來定，這與閆保國等[1]觀點基本一致。

4.1.4 水流刺激 親魚注射催產(chǎn)針劑后增大水流刺激方面，2018年試驗站做對比試驗，每天加大水流刺激2 h與保持原養(yǎng)殖環(huán)境的微流水兩種處理之間，結(jié)果沒有區(qū)別。但2021年發(fā)現(xiàn)，減弱水流刺激和提前密集暫養(yǎng)對親魚性腺成熟有影響。為方便操作打針催產(chǎn)，以往親魚注射第二次催產(chǎn)針劑后單獨放在網(wǎng)箱內(nèi)（聚乙烯網(wǎng)包裹的空心鐵架，長5 m、寬3 m）密集暫養(yǎng)，雌雄不分開。網(wǎng)箱放在養(yǎng)殖親魚的水泥池（長40 m，寬4～5 m）內(nèi)，位于進水口處，進水量40～50 dm3/s。2021年，第一次注射催產(chǎn)劑后將親魚放入網(wǎng)箱密集暫養(yǎng)，位于水泥池尾部排水口處，發(fā)現(xiàn)親魚性成熟時間晚于往年7 d以上，且沒有形成集中成熟。

4.2 產(chǎn)卵情況

本試驗中2015—2018年親魚相對懷卵量平均為 46.20 粒/g 體重，遠高于康鵬天等[6]的試驗結(jié)果（相對懷卵量平均為17.45粒/g體重）及青海湖7齡野生親魚的相對懷卵量（32.3 粒/g 體重）[1]，與閆保國等[1]試驗中的4 齡親魚的相對懷卵量（45.4 粒/g 體重）相差不大。

本試驗中親魚產(chǎn)出的卵多為淡黃色，極少量為乳白色，占總卵數(shù)的3%～8%。卵受精吸水后有一層透明膜包裹，膜和內(nèi)部圓形胚胎之間有2～3 mm間隔。卵粒圓而飽滿、大小均勻、色澤晶瑩，手指微擠壓有彈力。康鵬天等[6]試驗中親魚所產(chǎn)卵粒有四種顏色，分別是深黃色、淡黃色、乳白色、淡灰色，且親魚中產(chǎn)出淡黃色和暗灰色卵粒的個體數(shù)量基本均等，在整個群體所占比例較高。

分析相對懷卵量及卵質(zhì)量有所差異的原因，可能與飼料及營養(yǎng)有關(guān)?？爹i天等[6]給親魚投喂蛋白含量32%的鯉魚全價配合飼料，另加部分水草;本試驗親魚培育中投喂粗蛋白≥42.0%的虹鱒親魚飼料，親魚因飼料充足、蛋白水平高，營養(yǎng)狀況比較好。

4.3 授精方法的選擇

授精方法一般有干法、半干法、濕法等。經(jīng)查閱文獻，多采用干法授精[2-6.8]。筆者在前期干法授精與濕法授精的對比試驗中未發(fā)現(xiàn)明顯區(qū)別。濕法授精不需擦干魚體，生產(chǎn)上更方便快捷，且對親魚的損傷較低，所以選擇采用濕法授精。此問題可待樣本數(shù)量擴大后進一步探討。

4.4 受精卵脫黏問題

裸鯉卵屬沉性卵，微黏。一些學者認為需要專門添加滑石粉等進行脫黏處理[5-6]，也有一些學者認為不需要，只需用清水浸洗2～3遍[2，4，8]。經(jīng)過實踐，筆者認同后者觀點，即受精卵不需專門脫黏，只需清水浸洗2～3遍即可。

參考文獻：

[1] 閆保國，馬海軍，蔣燕，等.青海湖裸鯉人工馴養(yǎng)和繁育中幾個問題的初析[J].水產(chǎn)科技情報，2011（2）：81-83.

[2] 史建全，祁洪芳，楊建新，等.青海湖裸鯉人工繁殖及魚苗培育技術(shù)的研究[J].淡水漁業(yè)，2000 （2）：3-6.

[3] 閆保國，閆立君，盧建一.青海湖裸鯉人工繁育試驗報告[J].河北漁業(yè)，2006（7）：39-41.

[4] 祁洪芳，史建全.青海湖裸鯉的人工繁殖及苗種的淡水培育技術(shù)[J].水產(chǎn)科技情報，2009（3）：149-151.

[5] 趙秀梅.青海湖裸鯉人工繁殖技術(shù)[J].河北漁業(yè)，2012（9）：26-28.

[6] 康鵬天，李勤慎，王全意.人工高原淡冷水繁育青海湖裸鯉試驗[J].漁業(yè)致富指南，2016（19）：54-57.

[7] 李天.青海湖裸鯉生物學特性及異地人工馴養(yǎng)繁殖技術(shù)[J].科學養(yǎng)魚，2009（6）：6-7+28.

[8] 俞錄賢.青海湖裸鯉受精率的影響因素[J].科學養(yǎng)魚，2012（8）：81.

[9] 王基琳.青海湖裸鯉Gymnocypris przewalskii（Kessler）產(chǎn)卵場破壞原因與保護對策[J]現(xiàn)代漁業(yè)信息，2005（6）：11-12.

（收稿日期：2021-10-09;修回日期：2021-11-04）