QuEChERS-氣相色譜-負(fù)化學(xué)電離質(zhì)譜法測定水果中的氟蟲腈

徐佳音，馬鳳珍

（龍口市檢驗(yàn)檢測中心，山東龍口 265700）

0 引言

氟蟲腈又名銳勁特，是一種苯基吡唑類殺蟲劑。大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和生產(chǎn)實(shí)踐表明氟蟲腈具有殺蟲效果好、范圍廣等特點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于蔬菜、水果等農(nóng)產(chǎn)品上[1-2]。但是氟蟲腈在食品和環(huán)境中降解緩慢，毒性較大，因此加強(qiáng)對水果中氟蟲腈的農(nóng)藥殘留監(jiān)測具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

目前，氟蟲腈的測定方法主要是氣相色譜法（GCECD）[3]、氣相色譜-電子轟擊源質(zhì)譜法（GC-MS）[1，4-6]、液相色譜法[2]、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[7-8]。目前對氣相色譜-負(fù)化學(xué)電離質(zhì)譜法（GC-NCI/MS）檢測氟蟲腈的報(bào)道較少。NCI是軟電離方式，對氟蟲腈這種具有較強(qiáng)電負(fù)性的化合物具有更高選擇性，檢測靈敏度更高。因此，本研究采用QuEChERS法結(jié)合GC-NCI/MS檢測水果中氟蟲腈，與國家標(biāo)準(zhǔn)方法[9]相比優(yōu)化了前處理過程，以期為水果中氟蟲腈的監(jiān)控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

島津GCMS-QP2010Plus氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（配備負(fù)化學(xué)電離源）；高速分散均質(zhì)機(jī)（上海標(biāo)本模型廠）；氮吹濃縮裝置（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）；離心機(jī)（北京京立離心機(jī)有限公司）；氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)品[濃度為1 000.0 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心（天津）]；乙腈、丙酮（色譜純，市售）；氯化鈉、無水硫酸鎂（分析純，市售）；15 mL QuEChERS凈化管（內(nèi)含900 mg無水硫酸鎂，150 mg PSA，青云實(shí)驗(yàn)耗材有限公司）；蘋果、草莓、櫻桃、香蕉：當(dāng)?shù)厥袌霾少彙?/p>

1.2 樣品的提取及凈化

提取：將樣品去除泥巴，取可食用部分。用破壁機(jī)粉碎均勻，放入聚乙烯盒中。準(zhǔn)確稱取10.00 g待測樣品于50 mL離心管中，加入10 mL乙腈，4 g無水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1 min后，4 200 r/min離心3 min。

凈化：吸取6 mL上清液加到15 mL QuEChERS凈化管中，渦旋混勻1 min。4 200 r/min離心3 min，準(zhǔn)確吸取2 mL上清液于10 mL離心管中，40℃水浴中氮吹至近干。加入1 mL丙酮復(fù)溶，過0.22 μm微孔濾膜，待測。

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制。用丙酮將1 000 μg/mL的氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)品逐級稀釋至10 μg/mL，于-20℃低溫保存。

1.3.2 空白基質(zhì)提取液。樣品在1.2條件下進(jìn)行前處理后進(jìn)行儀器分析，當(dāng)氟蟲腈的信噪比小于3時(shí)，可確定樣品為空白樣品。按照1.2條件前處理得到空白基質(zhì)提取液。

1.3.3 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制。準(zhǔn)確吸取適量1.3.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用空白基質(zhì)提取液稀釋成濃度分別為0.2、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0 μg/L的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.4 氣相色譜-負(fù)化學(xué)源質(zhì)譜條件

1.4.1 氣相色譜條件。Rxi-5MS石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm，島津公司）；程序升溫：100℃保持1 min，以30℃/min升溫至280℃，保持1 min；載氣：高純氦，流速1.2 mL/min；進(jìn)樣口溫度250℃；進(jìn)樣體積1.0 μL；無分流進(jìn)樣。

1.4.2 質(zhì)譜條件。電離方式：NCI；接口溫度280℃；離子源溫度180℃；反應(yīng)氣：甲烷（純度≥99.99%）；溶劑延遲：2.5 min；監(jiān)測方式：SIM模式；監(jiān)測離子：366、368、333、400。

2 結(jié)果與分析

2.1 質(zhì)譜參數(shù)的確定

以NCI源為質(zhì)譜源，采用全掃描模式對0.1 mg/L氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行SCAN，掃描范圍設(shè)置為m/z 50～500。7.17～7.22 min區(qū)間為氟蟲腈的色譜峰，選擇信號較強(qiáng)且穩(wěn)定的離子為定量離子和定性離子：m/z 366為定量離子，m/z 368、m/z 333、m/z 400為定性離子，建立SIM方法并進(jìn)行后續(xù)分析。

2.2 前處理?xiàng)l件優(yōu)化

2.2.1 提取溶劑的選擇。在農(nóng)藥殘留檢測的前處理實(shí)驗(yàn)中，常用的提取溶劑有乙腈、丙酮、乙酸乙酯等。本試驗(yàn)以添加水平為10.0 μg/kg的蘋果為研究對象，對比了乙腈、丙酮、正己烷和乙酸乙酯四種溶劑對氟蟲腈的提取效果，結(jié)果表明，乙腈對于氟蟲腈的提取回收率為94.7%，要高于丙酮、正己烷和乙酸乙酯作為提取溶劑時(shí)的回收率（分別為78.2%、80.1%、58.7%）。因此，本方法選擇乙腈作為提取劑。

2.2.2 凈化方法的優(yōu)化。樣品經(jīng)乙腈提取后，還會(huì)有糖類、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、色素等共存雜質(zhì)，若不加凈化，這些雜質(zhì)對儀器污染嚴(yán)重，譜圖雜亂導(dǎo)致無法分析。因此選用合適的凈化方法是技術(shù)難點(diǎn)。目前常用的凈化方法有：Fl0risil-SPE柱、NH2-SPE柱、PSA-SPE柱以及QuEChERS凈化法。本試驗(yàn)以6 mL添加水平為10.0 μg/kg蘋果基質(zhì)的提取離心后的上清液為研究對象，對比了上述4種方法的凈化效果。經(jīng)過Fl0risil-SPE柱的凈化，氟蟲腈回收率只有26.8%，顯然不合適。NH2-SPE柱、PSA-SPE柱以及QuEChERS凈化管的凈化效果接近，氟蟲腈回收率分別為98.4%、93.8%和94.7%。考慮到SPE柱成本更高，消耗有機(jī)溶劑更多，操作更繁瑣，最終選擇QuEChERS法作為前處理方法。

2.3 方法學(xué)評價(jià)

2.3.1 線性范圍、檢出限和定量限。配制0.2、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0 μg/L的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，經(jīng)儀器分析后，以進(jìn)樣濃度X（μg/L）為橫坐標(biāo)，定量離子峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算線性回歸方程。以添加回收樣品峰響應(yīng)值為3倍噪音的添加濃度為方法檢出限（L0D），以10倍噪音的添加濃度為方法定量限（L0Q）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在蘋果、草莓、櫻桃和香蕉4種樣品基質(zhì)中，線性回歸方程分別為：y=3110.4x+1311.8，y=3280.7x+1589.1，y=4350.5x+4640.7，y=5546.8x-5750.1，對應(yīng)的線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9992、0.9994、0.9995、0.9991。L0D為0.2～0.3 μg/kg，L0Q均為1.0 μg/kg，低于標(biāo)準(zhǔn)GB 2763-2019[10]規(guī)定的氟蟲腈在水果中的最大殘留限量（除香蕉為5 μg/kg外，其余水果均為20 μg/kg）。

2.3.2 加標(biāo)回收率和精密度。在蘋果、草莓、櫻桃和香蕉4種空白樣品中做添加回收實(shí)驗(yàn)，添加水平分別為1.0 μg/kg、5.0 μg/kg和10.0 μg/kg。每個(gè)添加水平進(jìn)行6次平行實(shí)驗(yàn)。采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析，結(jié)果表明，氟蟲腈的平均加標(biāo)回收率在88.7%～98.4%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.9～7.6%之間，方法具有較好的回收率和重現(xiàn)性。由此可知本方法靈敏、準(zhǔn)確、高效，適用于各種水果中的氟蟲腈殘留測定。

3 結(jié)語

本研究建立了QuEChERS-GC-NCI/MS測定水果中氟蟲腈殘留的檢測方法。通過乙腈提取，QuEChERS凈化管凈化，可做到有效提取與高效凈化。該方法操作簡單快捷，具有良好的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好，重復(fù)性好，可用于水果中氟蟲腈殘留量的測定。