劉曉東 龔小嬌 廖禹東 郭忠 李明
摘要:桃金娘Rhodomyrtus tomentosa(Ait.)Hassk.為桃金娘科植物,屬灌木,入藥部位主要有根、葉以及果實,民間還以果實作為副食品以及釀制保健酒。本實驗主要對江西省贛州市桃金娘果實富含的多酚類物質進行含量測定,并對相應的抗氧化活性進行檢測,為合理開發利用贛南地區桃金娘果實提供理論依據。
關鍵詞:桃金娘;多酚;抗氧化
【中圖分類號】G644.5 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306(2021)14-01
桃金娘為桃金娘科桃金娘屬灌木,國內主要分布在江西、福建、廣東、廣西、云南、貴州、湖南最南部及臺灣等,入藥部位有根、葉以及果實,功效為活血通絡,收斂止瀉。臨床上將桃金娘開發成標準桃金娘油用于治療急性支氣管炎效果較顯著[1],劉立立[2]等對標準桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病進行了系統評價,發現標準桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病有效,安全性好。張奕[3]等對利用標準桃金娘油治療分泌性中耳炎進行系統分析,發現有一定療效。經筆者實地走訪贛州地區發現,贛南地區人民每年七八九月間廣泛食用桃金娘果實,同時也會將桃金娘果實泡酒食用,當成滋補型藥酒進行食用,但通過走訪也發現村民食用過量桃金娘果實后可以會引起便秘、結石等癥狀。鑒于桃金娘果實豐富的營養成分,同時具有開發成保健品的市場前景[4]。羅爽妍等[5]對桃金娘果實進行成分以及活性分析,測定結果每克桃金娘相當于67.2μmol抗壞血酸和28.5μmol沒食子酸當量,而且他們認為桃金娘現出的高抗氧化性,與含大量多酚類物質有關。谷榮輝[6]等利用HPLC-TOF-MS法對桃金娘根、枝、葉與果實的化學成分進行分析,在果實中分離得到沒食子酸、白藜蘆醇、白皮杉醇、沒食子酸乙酯、maslinic acid 5個成分。肖婷等[7]利用HPLC方法測定沒食子酸、原兒茶酸、兒茶素、鞣花酸、白藜蘆醇5種酚類成分的含量發現,6個產地桃金娘中沒食子酸和鞣花酸含量都較高,其中云南產地桃金娘中沒食子酸、鞣花酸、白藜蘆醇含量為6個產地中最高;DPPH法抗氧化能力的測定結果顯示5種酚類成分抗氧化具有良好表現,抗氧化作用均強于VC的活性,且沒食子酸的抗氧化活性最強。
根據以上信息,本課題主要利用高效液相色譜法研究贛南地區桃金娘果實富含的多酚類物質進行含量測定,并對贛南地區桃金娘果實相應的抗氧化活性進行檢測,為合理開發利用贛南地區桃金娘果實提供理論依據。
1材料與方法
1.1材料與試劑
桃金娘,產地為江西省贛州市大余縣,采收時間為2019年9月份,采收后立即進行烘干,烘干后于零下15℃環境中冷凍保藏,干燥后的樣品再次用中藥粉碎機磨碎,后過120目篩混合后備用。沒食子酸對照品(中國食品藥品檢定所)、白藜蘆醇對照品(中國食品藥品檢定所),甲醇為色譜純,水為哇哈哈純凈水。
1.2儀器與設備
高效液相色譜儀(waters 2695;PDA-3000二極管陣列紫外檢測器),十萬分之一電子天平(精度0.1mg,METTLER TOLEDO,LE204E),jzx-9070MBE數顯鼓風干燥箱,YF-11B型中藥粉碎機;超聲波清洗機(KQ-300DE型超聲波清洗機、300w、頻率40)。
1.3實驗方法
1.3.1多酚含量的測定
取150 mg的干燥粉末,溶于15 mL 90%甲醇中,超聲提取15分鐘,以6 000轉每分鐘的方式離心10分鐘,離心沉淀后取上清液。重復提取沉淀物3次,直至上清液變為無色。混合前面四次提取離心得到的上清液,在40攝氏度條件下旋轉蒸發去除甲醇。通過5 mL 100%甲醇回收旋轉蒸發后的剩余物,剩余物用0.45 nm的PTFE注射器式過濾器過濾,及得到提取物。提取物于零下15℃保存備用。整個操作過程在避光櫥中進行。[5]精密稱定桃金娘果提取物樣品15.00 mg,精密加入甲醇2mL溶解,搖勻,濾過,即得。
供試品處理:流動相采用色譜70%或80%甲醇梯度洗脫,0~20 min,5%A;22~25 min,8%A;42~70 min,11%A;72 min,14%A;74 min,17%A;76~90 min,22.5%A;92 min,100%A;體積流量1 mL/min;柱溫25℃;檢測波長為280 nm;進樣量10μL。
對照品處理:取沒食子酸2.00 mg、白藜蘆醇2.00mg置于10 mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,搖勻,即得對照品溶液。對照品色譜條件:流動相采用色譜純70%或80%甲醇梯度洗脫,0~20 min,5%A;22~25 min,8%A;42~70 min,11%A;72 min,14%A;74 min,17%A;76~90 min,22.5%A;92 min,100%A;體積流量1 mL/min;柱溫25℃;檢測波長為280 nm;進樣量10μL。
結果:精密吸取供試品溶液10μL,連續進樣6次,測定色譜峰面積。結果顯示沒食子酸、白藜蘆醇的平均含量分別為15.5911(mg·g-1)和6.2123(mg·g-1)。
討論:目前,桃金娘果實、根、葉所含化學成分的研究,主要集中具有抗氧化活性的多酚成分、黃酮類成分,具有保肝降酶作用的桃金娘多糖成分,具有治療急、慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病的揮發油成分,另外還有具有抗炎、平喘作用的石竹烯成分、對皮膚霉菌病有一定作用的石竹烯氧化物,最后肖婷等[6]還發現桃金娘具有α-葡萄糖苷酶抑制活性,具有一定的降血糖作用,但降血糖單體還有待進一步分析研究。目前臨床上將桃金娘開發成標準桃金娘油用于治療急、慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病,但是作為其他藥物開發未見,基于桃金娘良好的抗氧化活性、降血糖作用,以及豐富的營養價格,有一定的藥物以及保健品開發空間。同時,目前關于桃金娘的研究主要集中在桃金娘果實的抗氧化性能上,且產地集中在廣東、廣西等地,產地覆蓋不夠廣闊,對于不同產地的桃金娘的果實縱向比較少見,針對桃金娘的根、葉所含各類化學成分的對比研究少見,可待進一步研究。2015年CFDA(2015年第53號)已經明令禁止銷售標準桃金娘油,主要是經國家藥監總局檢查發現,德國保時佳大藥廠的標準桃金娘油腸溶膠囊(兒童型)的實際處方與注冊申報處方不一致,工廠留存的生產記錄未能說明原料“標準桃金娘油”的原料來源,不符合《藥品生產質量管理規范》第一百五十二條、第一百六十一條的要求,違反《藥品注冊管理辦法》第八十四條第二款的規定。臨床上研究發現將桃金娘開發成標準桃金娘油用于治療急性支氣管炎效果較顯著[1],劉立立[2]等對標準桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病進行了系統評價,發現標準桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病有效,安全性好,張奕[3]等對利用標準桃金娘油治療分泌性中耳炎進行系統分析,發現有一定療效。在臨床療效和2015年CFDA(2015年第53號)已經明令禁止銷售標準桃金娘油的決定間,存在進一步研究桃金娘油的必要性,說明桃金娘油具有國內潛在開發空間。贛南地區人民廣泛食用桃金娘果實,同時也會將桃金娘果實泡酒食用,當成滋補型藥酒進行食用,但臨床發現村民食用過量桃金娘果實后可以會引起便秘、結石等癥狀。此種情形下,我們不僅要關注不同產地的桃金娘果實多酚類成分的抗氧化性能力對比上,同時要密切關注桃金娘果實潛在的不利于身體健康的化學成分,只有通過一系列實驗篩查出可能導致便秘、結石的化學成分,在后期的提取等工藝中予以充分關注,設計分離去除的流程,才能使桃金娘果實開發成為可能。
參考文獻:
[1]何燕玲.阿奇霉素聯合標準桃金娘油治療急性氣管-支氣管炎的效果分析[J].系統醫學,2018,30(9):P.71-73.
[2]張奕,周松.標準桃金娘油治療分泌性中耳炎的系統評價[J].華西醫學,2013,28(1):56-58.
[3]劉立立,陳路佳,占美.等.標準桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病的系統價[J].中國藥房,2012,23(16):1496-1500.
[4]王文林,覃杰鳳,韋持章,等.野生桃金娘果實營養成分分析與評價[J].中國南方果樹,2011,40(2):48-49.
[5]羅爽妍,王超,段翰英,等.野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力[J].食品科學,2015,36(17):77-82.
[6]谷榮輝,黎平,王藝舟,等.HPLC-TOF-MS分析桃金娘不同部位的化學成分[J].中草藥,2018,49(3):554-560.
基金項目:江西省教育廳科學技術研究項目(181578)
通訊作者:龔小嬌,贛南衛生健康職業學院藥學系。