妊娠期糖尿病患者血清Klotho 蛋白水平變化及臨床意義

吳昌志，湯旭，羅永慧

（江西省婦幼保健院檢驗科，江西 南昌 330006）

妊娠期糖尿病是一種妊娠期特發的疾病，特點是妊娠后才發生或妊娠后首次發現的糖尿病[1,2]。近年來，不管是全球數據統計，還是我國的流行病學調查，妊娠期糖尿病的發病率逐漸上升[3]。 由于妊娠期糖尿病可引起嚴重的母嬰并發癥，導致巨大兒出現、新生兒黃疸、新生兒低血糖發生，增加孕婦剖宮產的發生率，還可增加母兒繼發T2DM的風險，因此對妊娠期糖尿病研究一直是臨床科研工作者關注的熱點[4,5]。目前有關妊娠期糖尿病的病因學研究尚無明確的定論，考慮可能與多方面因素有關，其中包括有遺傳因素、環境因素和免疫性因素[6]。 Klotho 蛋白是一種新近發現的抗衰老蛋白，參與機體多種生理病理過程，與衰老、骨質疏松、動脈硬化、硬皮病、肺氣腫等疾病密切相關[7,8]。最近的研究發現Klotho 蛋白可參與機體能量代謝過程，妊娠期糖尿病是一組以血糖升高、血糖利用障礙為特征的代謝性疾病，Klotho 蛋白是否在妊娠期糖尿病發揮作用尚無相關研究。 本研究以妊娠期糖尿病為研究對象，觀察klotho 蛋白在妊娠期糖尿病患者中的表達情況及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 妊娠期糖尿病診斷標準：采用美國糖尿病協會推薦的OGTT 試驗，孕婦在24～28 周75g 葡萄糖口服后，分別采集空腹、口服葡萄糖1h、2h 三次標本進行血糖檢測，三次血糖值分別達到或 超 過5.1mmol/L、10.0mmol/L、8.5mmol/L 則 判 定為妊娠期糖尿病。 本研究共納入研究對象共247例，均于2018年10月至2019年11月在江西省婦幼保健院定期門診孕期檢查的婦女，年齡20～45（26±5.2）歲，孕婦于24～28 周行OGTT 試驗，測量孕婦空腹Glu、果糖胺、糖化血紅蛋白等指標，并詳細詢問孕婦情況，包含孕婦年齡、孕次、有無吸煙史、有無糖尿病家族史、有無其他疾病史。 所有入組的孕婦均為低危人群、單胎妊娠、無高血壓、心血管疾病、肝腎疾病史，近期無外傷手術史，此次懷孕排除急慢性感染史、 無呼吸系統和泌尿生殖系統炎癥疾病史，無其他產科并發癥和合并癥。 正常妊娠對照組與健康對照組為同時期我院門診就診人群（其中正常妊娠對照入組261 例,年齡21～46(26±5.3)歲,健康對照入組247 例,年齡20～45(26.4±4.7)歲.經統計學處理,個組患者的年齡 性別等一般資料比較,差異無統計學差異意義(P＞0.05)。

1.2 血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白含量檢測 采用的人α-Klotho 和β-klotho 蛋白酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒分別購自欽城生物有限公司和百奧萊博有限公司，操作步驟按照商品試劑盒說明書進行。

1.3 統計學處理 采用SPPS17.0 軟件進行統計分析。計量資料以 表示,非正態分布變量以四分位間距表示而后進行分析。 多組間比較采用單因素方差分析,血漿Klotho 蛋白水平與指標參數的關系采用Pearson 相關分析, 其各組分的相對危險度采用多元逐步回歸分析。 P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 妊娠期糖尿病組、 正常妊娠組和正常對照組α-Klotho 和β-klotho 蛋白水平 血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白表達水平在妊娠期糖尿病組明顯低于正常妊娠組及健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），α-Klotho 和β-klotho 蛋白在各組表達水平是健康對照組＞正常妊娠組＞妊娠期糖尿病組，而α-Klotho 和β-klotho 蛋白在正常妊娠組及健康對照組差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 妊娠期糖尿病組、正常妊娠組和正常對照組α- Klotho 和β- klotho 蛋白水平

2.2 妊娠期糖尿病組α-Klotho 和β-klotho 蛋白與空腹Glu、果糖胺、糖化血紅蛋白相關性分析 在妊娠期糖尿病人群中血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白水平與空腹Glu、 果糖胺及糖化血紅蛋白呈負相關，且相關程度空腹Glu＜果糖胺＜及糖化血紅蛋白。

表2 妊娠期糖尿病組α- Klotho 和β- klotho蛋白與空腹Glu、果糖胺及糖化血紅蛋白相關

3 討論

妊娠期糖尿病這一概念最早由Miller 教授于1946年首次提出，1970年WHO 將其作為一個獨立病種單獨列出，足見世界各國對該病種的重視程度。 對妊娠期糖尿病進一步研究有助于提高對糖尿病的認識和重視，采取相應的干預措施，減少其對婦女和兒童的損害和減輕遠期并發癥，減少出生缺陷發生率，提高人口素質[9,10]。

研究證實，妊娠期糖尿病對妊娠婦女的糖代謝、脂代謝和蛋白質代謝都有著系列的影響，主要表現在葡萄糖攝取和利用減少，蛋白質分解減少而脂肪分解和氧化增加[11]。 在妊娠期肌肉和肝臟的糖利用障礙對維持母體一定的血糖水平以滿足胎兒和母體中樞神經系統對血糖水平的依賴起一定的作用，對蛋白質分解減少滿足胎兒生長的需求，而對脂肪分解和氧化的增加則為機體提供足夠的能量來源，然而這一系列的生理改變也成為妊娠期糖尿病發病的高危因素。 klotho 蛋白是一種新近發現抗衰老蛋白，參與機體多種生理病理過程，與衰老、骨質疏松、動脈硬化、硬皮病、不孕不育、肺氣腫等疾病密切相關[7,8]。 最近的研究表明klotho 蛋白參與機體能量代謝過程，尤其是在白色脂肪組織和骨骼肌中對機體保護起著重要作用[12]。 此外有研究顯示klotho 蛋白具有抗炎、抗氧化、抗凋亡作用，其表達水平下降與多種病理模型的病理發展相關，而給予外源性klotho 蛋白干預則具有明顯的改善作用，提示可溶性klotho 蛋白有可能成為一個重要的臨床治療靶點[13]。 因此研究klotho 蛋白與妊娠期糖尿病關系意義重大。 我們的研究以妊娠期糖尿病人群為研究對象，結果提示血清α-Klotho和β-klotho 蛋白表達水平在妊娠期糖尿病組明顯低于正常妊娠組及健康對照組，差異具有統計學意義，α-Klotho 和β-klotho 蛋白在各組表達水平是健康對照組＞正常妊娠組＞妊娠期糖尿病組，而α-Klotho 和β-klotho 蛋白在正常妊娠組及健康對照組并無統計學差異，表明α-Klotho 和β-klotho蛋白可能在妊娠期糖尿病發揮著作用。

妊娠期糖尿病一般無特殊臨床癥狀，大多只有在進行糖尿病篩查時才發現血糖異常升高。 而妊娠期糖尿病的管理旨在嚴格控制血糖，以減少這種不利的新生兒和妊娠并發癥的風險[14-17]。 本研究表明α-Klotho 和β-klotho 蛋白在妊娠期糖尿病表達下降，通過對其與體內的血糖控制指標相關性研究，提示α-Klotho 和β-klotho 蛋白與空腹Glu、果糖胺、糖化血紅蛋白呈負相關，且相關程度空腹Glu＜果糖胺＜及糖化血紅蛋白。 所以我們推測α-Klotho 和β-klotho 蛋白可能影響著妊娠期糖尿病的糖代謝過程，與糖利用障礙或胰島素抵抗機制密切相關，從而使得α-Klotho 和β-klotho 蛋白成為妊娠期糖尿病的生物學標志物及治療靶點的潛在可能。

本研究結果顯示α-Klotho 和β-klotho 蛋白在妊娠期糖尿病人群中低水平表達，并與血糖控制指標呈負相關，提示α-Klotho 和β-klotho 蛋白參與該病的進程。 然而由于妊娠期糖尿病是一個多因素復雜的病理過程，對這些因素的識別與分子機制的確定，尚需更多更詳細的研究。