外周血miR-155表達對急性心肌梗死患者術后發生左心室重構的預測效果

急性心肌梗死（AMI）是一種常見急危重癥。受人口老齡化、生活飲食習慣改變以及社會、心理等因素的影響，我國AMI的發病率逐年上升，且死亡率較高。經皮冠狀動脈介入術（PCI）是治療AMI的重要手段，能夠快速有效恢復缺血心肌的血供。但研究發現，部分患者PCI 術后發生左心室重構（LVR）導致心力衰竭，影響患者臨床結局

。因此，早期預測LVR有助于AMI患者預后的改善。由于微小RNAs（miRNAs）在心血管疾病的發展過程中發揮著功能性作用，因此對其表達和活性的調節成為控制心血管疾病發展的一個潛在治療靶點

。然而，miRNAs在AMI發生后的預后價值較少受到關注。近年研究發現miR-155與小鼠AMI后LVR及心功能有關

。本研究旨在探討外周血miR-155表達對AMI患者術后發生LVR的預測效果。

今年10月31日，中共中央政治局就人工智能發展現狀和趨勢舉行第九次集體學習。高文院士對相關問題作了講解，并談了意見和建議。習近平總書記在學習中指出，加快發展新一代人工智能是我們贏得全球科技競爭主動權的重要戰略抓手，要以更大的決心、更有力的措施，打造多種形式的高層次人才培養平臺，加強后備人才培養力度，為科技和產業發展提供更加充分的人才支撐。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2019年1月至2020年1月在鄭州人民醫院行PCI的AMI患者142例。本研究經我院倫理委員會批準（2018-016）。

1.2 選取標準 納入標準：符合《急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南》

中相關診斷標準；發病24 h內行PCI；病歷資料完整；患者及家屬對本研究內容知情同意。排除標準：術后生存時間少于1年；合并自身免疫性疾病、心肌及心瓣膜疾病、惡性腫瘤、嚴重肝腎功能障礙、嚴重感染性疾病等；未能完成隨訪者。

1.3 方法

張仲平松了一口氣，再次緊張地看了一眼手機上的時間。他不知道樓上的情況到底怎么樣了。他朝自己的車子走去，偶一回頭，卻發現曾真拿著相機回身又向勝利大廈里面走去。

2.2 兩組患者實驗室指標比較 LVR組miR-155相對表達量、NT-proBNP、cTnI及hs-CRP水平均高于非LVR組，差異有統計學意義（

＜0.05），見表2。

2.4 miR-155對AMI患者術后1年發生LVR的預測效果 以miR-155相對表達的均值1.54為界，142例患者分為低表達組（

＝68）和高表達組（

＝74）。miR-155高表達組LVR發生率為32.43%（24/74），高于低表達組的13.24%（9/68），差異有統計學意義（χ

＝7.321，

＜0.05）。ROC曲線顯示，miR-155預測AMI 患者術后1 年發生LVR 的AUC 為0.864（0.808，0.916）， 最佳閾值為1.71， 靈敏度為82.43%，特異度為86.02%，見圖1。

心室重構是心肌細胞凋亡、心肌肥厚和心肌纖維化的復雜病理過程，常由高血壓、AMI、心力衰竭等多種心血管疾病引起。PCI術后發生LVR是導致AMI患者死亡的重要危險因素之一。雖然超聲檢測能夠準確診斷PCI術后發生LVR，但缺乏對疾病的預測價值，不具有臨床早期指導意義。因此，尋找可以預測LVR的生化指標具有重要的臨床價值。

1.3.1 資料收集 收集患者姓名、年齡、性別、既往病史、罪犯血管類型、病變支數、支架類型、術后用藥情況等臨床資料。

2 結果

2.1 兩組患者臨床資料比較 復查超聲心動圖發現，142例患者中術后1年內發生LVR 33例，發生率為23.24%。LVR 組和非LVR組性別、年齡、既往病史等臨床資料比較，差異均無統計學意義（

＞0.05），見表1。

1.3.2 外周血miR-155的檢測 試劑及儀器：人淋巴細胞分離液購自美國GE公司；miRNA提取試劑盒購自賽默飛世爾科技有限公司；引物由廣州銳博生物科技有限公司合成；TaqMan microRNA反轉錄試劑盒及實時定量PCR儀（7300型）購自美國應用生物系統公司；紫外分光光度計購自日本Shimadzu公司。于術后7 d，采集患者空腹靜脈血6 mL，采用Ficoll-Hypaque密度梯度離心法分離PBMC。根據試劑盒說明書，使用TRIzol LS試劑從PBMCs細胞中提取總RNA，－80 ℃儲存待測。用紫外分光光度計檢查RNA濃度和質量，采用TaqMan microRNA反轉錄試劑盒逆轉錄合成cDNA，用于TaqMan micro RNA 分析的引物為：對照U6 引物，上游為5′-GCTTCGGCAGCATATATATATAAAT-3′，下游為5′-CGCTTCACGAATTGTCAT-3′，擴增長度94 bp。miR-155 引 物， 上 游 5′ -GGAGGTTAATGCTAATCGTGATAG-3′，下游5′-GTGCAGGTCCGAGGT-3′，擴增長度60 bp。使用實時定量PCR儀，以小分子RNAU6為內參，將PCR反應體系（20 μL）用于RT-qPCR測定，反應條件如下：95 ℃10 s，95 ℃15 s，60 ℃60 s，循環40次。根據熒光曲線和循環閾值判斷結果，以2

表示miR-155的相對表達量。1.3.3 超聲心動圖檢查 所有患者于術后7 d行胸超聲心動圖檢查，由經驗豐富的檢驗科醫師操作，超聲心動圖儀為飛利浦iE33型，心臟探頭S5-1，頻率1～5 MHz。行左心室造影，取心尖部四腔及二腔心切面的視圖，通過雙平面Simpson法測量左室舒張末期容積（LVEDV）、左室收縮末期容積（LVESV）、左心室射血分數（LVEF）、左心室舒張末期內徑（LVEDd）。術后1年復查超聲心動圖，若LVEDV值較初次測量時增加≥20%則為LVR

。根據復查結果，將患者分為LVR組和非LVR組。

用電子天平精確稱取葉黃素標品5mg置于50mL棕色容量瓶中，用色譜級甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，配置成濃度為50μg/mL的標準溶液。精密 移 取 0.5mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL 溶 液至50mL棕色容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度并搖勻，制得濃度分別為 0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL 的標準溶液，充氮備用。操作在昏暗條件下進行[20]，每個系列濃度進樣三次，按照上述色譜條件測定標準葉黃素的峰面積，以峰面積為縱坐標（Y），質量濃度（μg/mL）為橫坐標（X）繪制標準曲線。

1.3.4 其他實驗室指標 于術后7 d采用免疫熒光法檢測所有患者的血清氨基末端腦鈉肽前體（NT-proBNP）水平，試劑盒購自Biomerieux公司；采用免疫化學發光法檢測肌鈣蛋白I（cTnI）水平，免疫比濁法檢測超敏C反應蛋白（hs-CRP）水平，試劑盒購自Beckman公司。

3 討論

2.3 AMI患者術后1年發生LVR的多因素Logistics回歸分析 以miR-155、NT-proBNP、cTnI、hs-CRP為自變量，LVR為因變量（是＝1，否＝0），多因素Logistics回歸分析顯示，miR-155為AMI患者術后1年發生LVR的獨立危險因素（

＜0.05），見表3。

價格折扣是生鮮農產品行業中供應商通常采取的加大對生鮮農產品銷售的手段，一般對大批量采購會存在相應的價格折扣，而對小批量訂貨則有可能會收取其他費用，從而產生企業的價格折扣成本。

AMI后發生LVR與心肌細胞的凋亡、細胞因子釋放、神經內分泌系統激活、免疫系統活化、相關信號通路激活和基因的異常表達等有關，但具體機制尚未明確。較多研究發現AMI發生后，心肌缺血會改變心臟結構，使心功能下降和心室壁張力增高，導致NT-proBNP的分泌增加

。cTnI是一種特有的心肌結構蛋白，是心肌損傷高靈敏度和特異度標志物，在心肌細胞缺血性損傷中顯著上升。陶逸菁等

研究發現，心肌梗死急性期cTnI水平與左心室幾何結構改變和重構有關，可能有助于預測隨后的心臟功能。AMI發生后數小時炎癥因子被釋放或表達增加，Garc a等

研究分析認為炎癥反應與LVR相關。hs-CRP是一種反映非特異性炎癥反應的指標之一，可能參與心室重構和心力衰竭。miRNAs 是一類具有調節功能的內源性非編碼RNA，長度為20～25個核苷酸，由RNA聚合酶Ⅱ轉錄的初級聚合酶產生。一個miRNA可以作用于多個靶mRNA，多個miRNA也可以作為一個功能簇來協調特定基因的表達，參與細胞增殖、分化、凋亡和血管生成等。miRNA在心肌梗死、肥大、纖維化、心力衰竭等心血管疾病的病理生理學中起著至關重要的作用。miR-155是miRNAs中的一員，最初發現于兒童Burkitt淋巴瘤中。隨后越來越多的證據表明，miR-155是一種細胞內穩態的重要多效性調節因子和典型的多功能miRNA，在免疫、炎癥、病毒感染和心血管疾病中調節多種病理生理途徑。有研究報道，miR-155可通過轉化生長因子β1（TGF-β1）/Smad2信號通路參與調節心臟纖維化

。本研究結果發現，LVR組miR-155相對表達量、NT-proBNP、cTnI及hs-CRP水平均高于非LVR組，說明miR-155、NT-proBNP、cTnI及hs-CRP均參與了心室重構，與上述研究報道

結果一致。

“國無德不興，人無德不立?！薄皭蹏呛诵睦砟詈陀篮阒黝}，敬業是立身之基，誠信是處世之本，友善是行事之道。”

目前，NT-proBNP廣泛用于判斷左心室功能和患者預后，但NT-proBNP對LVR的預測價值的研究存在不同結果。此外，雖然cTnI和hs-CRP可預測LVR，但受較多客觀因素的影響，預測能力有限。本研究經多因素Logistics回歸分析發現NT-proBNP、cTnI、hs-CRP對LVR沒有獨立預測價值，與殷云杰等人

研究結論一致。而王中良

研究發現，患者發病后24 h的血漿NT-ProBNP水平可較好預測AMI患者發生LVR；白潔等人

研究發現，術后24 h的cTnI、hs-CRP對預測AMI患者術后發生LVR有一定價值。究其原因，可能與指標測量時間及臨床干預措施不同有關。miRNA能在組織、血清和血漿等標本中穩定存在，這個特性使其有望成為一種新型分子標志物，為AMI患者預后預測提高新的研究方向

。本研究以miR-155相對表達的均值1.54為界，將142例患者分為低表達組和高表達組，結果發現miR-155高表達組LVR發生率高于低表達組。經多因素Logistics 回歸分析miR-155 對LVR有預測價值，且ROC曲線分析顯示，miR-155預測AMI患者術后1年發生LVR的靈敏度、特異度較高，進一步表明miR-155與左心室不良重構有關。有報道稱

，miR-155的過度表達導致細胞因子信號抑制分子1（SOCS1）水平降低和促纖維化TGF-β1/Smad3信號過度激活，從而導致過度纖維化和不良心室重構。Ren等

研究證明抑制心肌成纖維細胞中miR-155的表達可以通過靶向調節腫瘤蛋白P53誘導核蛋白1（TP53INP1），改善左心室功能、減少梗死面積并減弱膠原沉積，進而改善心室重構。上述例子提供了將來利用miR-155作為新靶點開發心血管疾病有效治療策略的可能性。

綜上所述，PCI術后7 d外周血miR-155是1年內發生LVR的獨立預測因子，有望成為預測LVR的生物標志物。

[1] 張樊，金希華，汪蛟龍.超聲心動圖參數對新活素治療急性心梗患者PCI 術后左心室重構及改善收縮功能的作用評估[J].影像科學與光化學，2021，39（3）：396-400.

[2] 沐嘉馨，林利.微小RNA：心血管疾病的新興要素[J].醫學研究雜志，2020，49（8）：9-13.

[3] 廉銀珠，陳梁，王銳.miR-155對小鼠急性心肌梗死后左心室重構及心功能的影響[J].心腦血管病防治，2020，20（6）：575-578，583.

[4] 龔艷君，霍勇.急性ST 段抬高型心肌梗死診斷和治療指南（2019）解讀[J].中國心血管病研究，2019，17（12）：1057-1061.

[5] 高紅霞，楊彩霞，任剛.外周血單個核細胞miR-150 表達對STEMI 患者PCI 術后發生左心室重構的預測價值[J].東 南大學 學報（醫 學版），2021，40（2）：170-175.

[7] 陶逸菁，夏智麗，高程潔，等.急性心肌梗死再血管化成功后預測左心室重構相關生物標志物的分析[J].上海交通大學學報（醫學版），2019，39（1）：60-64.

[8] GARC A R A，LUPISELLA J A，ITO B R，et al.Selective FPR2 Agonism Promotes a Proresolution Macrophage Phenotype and Improves Cardiac Structure-Function Post Myocardial Infarction[J].JACC Basic Transl Sci，2021，6（8）：676-689.

[9] SCHUMACHER D，CURAJ A，SIMSEKYILMAZ S，et al .miR155 Deficiency Reduces Myofibroblast Density but Fails to Improve Cardiac Function after Myocardial Infarction in Dyslipidemic Mouse Model[J].Int J Mol Sci，2021，22（11）：5480.

[10] 殷云杰，翁嘉懿，徐亮，等.N 末端腦鈉肽前體、超敏C-反應蛋白和血清CD137 對急性心肌梗死患者左心室重構的預測價值[J].中華老年多器官疾病雜志，2020，19（7）：530-534.

[11] 王中良.急性心肌梗死后不同時點血漿NT-ProBNP 水平與左心室重構相關性的比較研究[J].心理月刊，2019，14（16）：169.

[12] 白 潔，李易，張忠波，等.血清NT-proBNP、cTnI 對AMI 患者PCI 術后左心室重構的預測價值[J].中國急救復蘇與災害醫學雜志，2020，15（12）：1375-1378，1383.

[13] 趙婕，陶蜀杭，王路長，等.急性心肌梗死后心力衰竭患者血清循環微小RNA-150 的改變[J].嶺南心血管病雜志，2021，27（2）：171-174.

[14] OBRADOVIC D，ROMMEL K P，BLAZEK S，et al.The potential role of plasma miR-155 and miR-206 as circulatory biomarkers in inflammatory cardiomyopathy[J ]. ESC Heart Fail，2021，8（3）：1850-1860.

[15] REN X Y，HAN Y D，LIN Q.Long non-coding RNA MIR-155HG knockdown suppresses cell proliferation，migration and invasion in NSCLC by upregulating TP53INP1 directly targeted by miR-155-3p and miR-155-5p[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2020，24（9）：4822-4835.