血常規(guī)標本臨檢前混勻靜置時間對結(jié)果的影響

易春梅

仙桃市疾病預防控制中心檢驗科，湖北仙桃 433000

血常規(guī)檢測作為醫(yī)學檢驗中最常用到的檢測項目，可以通過對各類血細胞（包括紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白等）的數(shù)量、形態(tài)測定，來對血液狀態(tài)進行判斷，并結(jié)合其水平變化對組織結(jié)構(gòu)的病理改變情況進行初步分析和評價[1]。血常規(guī)檢測結(jié)果不僅可以為疾病的診斷、治療效果的評估提供依據(jù)，而且可以為疾病復發(fā)風險進行預測。但是血常規(guī)檢驗所過程中受的影響因素較多，采血前受檢者的身體和情緒狀態(tài)、采血位置、采血時間、采血的方式、抗凝劑類型的選擇、混勻靜置時間、送檢時間、檢測儀器及試劑、檢測人員技術水平、標本的核對等都可能對檢測結(jié)果造成影響。混勻靜置時間是這些因素中相對隱匿的一種[2]。由于血液被抽離機體后，隨著時間的延長，其中的一些成分也會發(fā)生相應的改變，進而導致檢測結(jié)果的變化， 影響血常規(guī)的參考價值。 該文隨機抽取2020 年1—12 月間在該中心接受體檢的500 名志愿者作為研究對象，旨在分析血常規(guī)標本臨檢前，標本與抗凝劑混勻后，不同靜置時間獲得的相關血細胞檢測結(jié)果的不同，判斷其對檢測結(jié)果的影響，并確定最佳靜置時間。 現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機抽取在該中心接受體檢的500 名志愿者作為研究對象，男247 名，女253 名，年齡18～60 歲，平均年齡（38.8±6.7）歲。受檢者不合并血液系統(tǒng)疾病、重要臟器結(jié)構(gòu)器質(zhì)性病變、傳染性疾病、遺傳性疾病，近期無外傷史。 該研究經(jīng)該院倫理委員會討論通過，且受檢者自愿參與，簽署知情同意書。

1.2 方法

采集受檢者的靜脈血標本，要求在采血前要告知受檢者禁食10～12 h，保持空腹狀態(tài)；檢查前1 d 停用可能影響檢查結(jié)果的各種藥物；檢查前半小時禁止劇烈運動；女性不得在經(jīng)期采血；保持情緒平靜。在清晨空腹狀態(tài)下采集受檢者的外周血液標本（剔除脂血、溶血、黃疸血樣本），采血位置為肘靜脈，采血量2～3 mL，將采集到的血液置于含抗凝劑的真空采血管中，進行抗凝處理，并將與抗凝劑混勻后的血液冷藏在2～9℃的環(huán)境下， 將血液樣本靜置， 分別在靜置10 min、0.5 h、1 h、2 h、3 h、5 h、7 h、9 h、11 h 的不同時間對其實施行血常規(guī)檢查，每個時間點檢查3 次，并將3次測定值的平均值作為應用值。 檢測采用BC-5380全自動血液分析儀。

1.3 觀察指標

比較不同靜置時間下測得的紅細胞計數(shù)（RBC）、血小板計數(shù)（PLT）、血紅蛋白水平（Hb）、紅細胞壓積（HCT）、白細胞計數(shù)（WBC）及其分類指標中的中性粒細胞（Neu）、淋巴細胞（Lym）比值之間的差異。

其中，RBC 的正常參考范圍是 （3.5～5.5）×1012/L；PLT 的正常參考范圍是（100～300）×109/L；Hb 的正常參考范圍是110～160 g/L；HCT 的正常參考范圍是40%～50%；WBC 的正常參考范圍是 （4～10）×109/L；Neu%的正常參考范圍是50%～70%；Lym 的正常參考范圍是20%～40%[3]。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學軟進行數(shù)據(jù)分析，計量資料采用（±s）表示，進行t 檢驗，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

對血常規(guī)標本臨檢前不同混勻靜置時間下檢測得到的各項血細胞檢測結(jié)果進行比較，可見混勻時間為10 min、0.5 h、1 h、2 h、3 h、5 h、7 h、9 h、11 h 時，受檢者的RBC、Hb、HCT、Lym 比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但隨著靜置時間的延長，PLT 和Neu%出現(xiàn)不斷降低的情況，而WBC 則出現(xiàn)不斷升高的情況，不同時間獲得的3 項指標檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 見表1。

表1 不同模式下檢測得到的血常規(guī)指標檢測結(jié)果比較（±s）

表1 不同模式下檢測得到的血常規(guī)指標檢測結(jié)果比較（±s）

混勻靜置時間10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h 5 h 7 h 9 h 11 h RBC（×1012/L）4.54±0.25 4.53±0.24 4.51±0.23 4.49±0.25 4.52±0.27 4.52±0.29 4.55±0.28 4.54±0.27 4.55±0.29 PLT（×109/L）Hb（g/L）HCT（%）WBC（×109/L）206.97±22.56 205.56±22.11 205.11±22.00 204.87±21.98 203.90±20.63 202.87±20.56 199.09±19.97 193.97±19.38 190.28±18.38 145.58±7.55 145.22±7.61 144.99±7.43 143.96±7.82 144.19±7.37 144.67±7.50 145.11±7.52 145.23±7.55 145.10±7.43 0.43±0.02 0.42±0.02 0.42±0.02 0.42±0.01 0.43±0.01 0.43±0.02 0.43±0.03 0.42±0.02 0.42±0.01 7.90±0.89 7.92±0.91 7.93±0.93 7.95±0.93 8.00±0.05 8.10±0.05 8.28±0.06 8.31±0.07 8.45±0.07 Neu（%）Lym（%）71.27±3.67 71.09±3.58 70.15±3.41 69.88±3.33 69.02±3.25 68.43±3.21 68.31±3.11 67.24±3.02 65.11±2.86 28.94±3.47 28.99±3.50 28.98±3.45 28.97±3.43 28.77±3.32 28.82±3.40 28.89±3.45 29.01±3.42 29.05±3.47

3 討論

在現(xiàn)代檢驗技術不斷提高，檢驗儀器更加先進的情況下，臨床血常規(guī)檢驗過程中，通過全自動血液分析儀的應用以及大大降低了人為因素對檢測準確性的影響，檢測效率也得到顯著提升。除此之外，標本在采集、處理、保存、運送、檢驗各過程中的相關影響因素也漸漸得到更多的重視程度，一些比較明顯的影響因素可以通過一些措施的實施來最大程度降低其對血常規(guī)檢驗結(jié)果的影響。但有一些相對隱匿的影響因素則容易被忽略[4-5]。 比如血液采集過程中，靜脈血檢測是使用歷史最為悠久的一種，具有痛感低、采血量大的優(yōu)勢，對其的檢測已經(jīng)有一套的成熟的流程與標準，抗凝劑的應用可以避免血液凝固對檢測結(jié)果造成的影響，而全自動檢測儀器的使用也保證了檢測的可靠性。但是，血液標本與抗凝劑混合之后，靜置時間的不同也會對血常規(guī)檢驗結(jié)果的準確性造成不同程度的影響[6-8]。 作為血液標本采集后，血常規(guī)檢驗實施前的第一個步驟， 在將血液與抗凝劑充分混合均勻后，常常選擇即刻送檢。但是這個混勻的過程很容易導致血液標本中出現(xiàn)較多的氣泡，影響受檢血量[9-10]。 將其進行20 s 左右的靜置處理后， 會逐漸出現(xiàn)上浮的氣泡，需要再進行一段時間的靜置，促進血液標本的穩(wěn)定[11-12]。但靜置時間過長的情況下，會出現(xiàn)血細胞沉降的情況，導致檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差[13-15]。

該文選擇在將血液標本混勻后靜置10 min、0.5 h、2 h、3 h、5 h、7 h、9 h、11 h 后的不同時間， 分別對其進行血常規(guī)檢測，檢測的樣本量大、時間跨度大，可以更清晰地判斷靜置時間對不同血細胞檢測結(jié)果的影響。 從該文的檢測結(jié)果看，不同靜置時間下受檢者的紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、紅細胞壓積、淋巴細胞比值比較均差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），提示該變量對上述指標的影響相對較小，可以忽略不計。 但是隨著靜置時間的延長，受檢者的血小板計數(shù)、白細胞計數(shù)、中性粒細胞比值都出現(xiàn)了比較明顯的變化， 靜置時間為10 min 時，PLT 為 （206.97±22.56）×109/L，Neu%為（71.27±3.67）%，WBC 為（7.90±0.89）×109/L，而當靜置時間為11 h 時，3 項指標分別為（190.28±18.38）×109/L、（65.11±2.86）%、（8.45±0.07）×109/L， 表現(xiàn)為血小板計數(shù)、中性粒細胞比值隨時間延長，檢測值逐漸降低，而白細胞計數(shù)則隨時間延長而出現(xiàn)逐漸升高的情況。這與喬萬超[2]的研究結(jié)果一致，其比較的是靜置后1～11 h 各項血常規(guī)指標的檢驗結(jié)果，結(jié)果可見靜置時間為1 h 時，PLT 為 （205.7±25.4）×109/L，Neu%為 （61.3 ±9.8）%，WBC 為（7.48 ±2.33）×109/L，而當靜置時間為11 h 時，3 項指標分別變?yōu)椋?92.6±19.4）×109/L、（57.1±9.3）%、（8.49 ±2.02）×109/L，數(shù)據(jù)變化的整體規(guī)律一致。這可能是由于靜脈血液與抗凝試管中的抗凝劑結(jié)合的過程中，血小板的形態(tài)會環(huán)境溫度的變化而出現(xiàn)相應的改變，外膜會轉(zhuǎn)變?yōu)槲⑿」苡坞x端的形式向外延伸，在其周圍形成絲狀偽足，彼此互相纏繞聚集，一定程度上使得血小板計數(shù)的降低， 隨靜置時間延長，這種表現(xiàn)更加明顯。中性粒細胞比值的降低則與其本身壽命短有關，血液標本的靜置的時間越長，中性粒細胞的死亡量越多。白細胞計數(shù)水平的改變與抗凝劑的應用有關，抗凝劑可以跟血液中的鈣離子相結(jié)合并形成一種穩(wěn)定形態(tài)的螯合物，避免血液發(fā)生凝固，當抗凝劑的抗凝效果在維持一段時間之后，血液中白細胞會因適應性增加而導致本身成分的恢復，加上血小板絲狀偽足的聚合體產(chǎn)物被劃入WBC 的計數(shù)范疇，使白細胞計數(shù)會隨時間延遲表現(xiàn)出上升的趨勢[16-17]。

綜上所述，臨床實施血常規(guī)檢驗的過程中，在臨檢前標本的混勻靜置時間直接影響相關指標的檢測結(jié)果，長時間靜置會導致檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差，在白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)以及中性粒細胞比值等指標的變化上最為顯著。 因而要對檢驗時間進行有效控制，以提高檢測的準確度。