王運盛,姜瑞婕,王昕,國欣欣,李祥翔,趙素芬,盧巖,張成林,*
(1.北京動物園北京 100044;2.圈養野生動物技術北京市重點實驗室北京 100044)
在野生動物飼養管理工作中,疾病防治工作是其重要的組成部分,而眾多的致病因素中,腫瘤較為少見,但同樣不能忽視[1]。近年來,隨著國內圈養野生動物數量的增加以及野生動物診療工作的深入,腫瘤發病率呈現逐年上升的跡象。而野生動物腫瘤疾病發生后如何快速確診,成為了現階段需要關注的問題。北京動物園獸醫院于2019 年收到一例獅子皮下腫物,通過組織病理學方法進行病理學診斷,以期為今后野生動物腫瘤病理學診斷提供對應思路和診療方案。
獅子,雄性,自2019 年5 月份以來出現食欲不振,步態不穩、眼觀左側最后肋弓處有一腫物,腫物凸起直徑約8cm,為判斷腫物性質及制定后續治療方案,決定對腫物進行手術切除,并進行病理學診斷。
1.2.1 血樣化驗室診斷獅子術前血樣采集,采血前1d 進行隔離觀察,禁食16h,采血后進行外周血生理常規檢測。
1.2.2 病理樣本采集腹側皮下腫物取樣后迅速投入10%的福爾馬林溶液,進行病理組織切片前處理。
1.2.3 H.E.染色石蠟切片分別經二甲苯I、II 脫蠟5min,之后浸入無水乙醇/二甲苯(1:1)混合液中5min,依次經無水乙醇I、無水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復水,下行至雙蒸水中,蘇木精染色10min,1%鹽酸酒精分色數秒,水洗返藍15min,再依次通過50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后,伊紅染色1min,95%乙醇洗滌3 次,再經無水乙醇I、II 各5min,二甲苯I、II 各透明5min,最后用中性樹膠封片。切片放置于37℃溫箱內過夜烘干后鏡檢。光學顯微鏡下觀察組織病理學變化情況。
經化驗室診斷發現獅子中性分葉核粒細胞(82)、單核細胞(7)指標顯著高于參考范圍,其余指標基本在參考范圍內。結合動物臨床癥狀,獅子疑似出現感染或腫瘤(詳見表1)。

腫物取材后發現:手觸質地較軟(16× 13cm),內部纖維化不多,切面濕潤,油膩感明顯,類似脂肪,腫物深部有囊腫表現(圖1A,圖1B)。

圖1 獅子腹側皮下腫物臨床觀察
腫物邊緣區:低倍鏡下觀察可見結締組織增生不多,增生的結締組織將腫物區分為大葉區域,大葉區域內細胞大面積藍染,腫物與周圍軟組織無明顯界限,無特殊結構,呈彌散性浸潤性生長(圖2A)。高倍鏡下觀察,細胞核呈橢圓形、三角形,形態各異,嗜堿性較強,大小不一,異型性。胞漿嗜酸性,較豐富,細胞之間有較明顯的間隙。細胞間有少量嗜酸性基質成分。有絲分裂象可見。腫物內部及周圍有淋巴細胞浸潤(圖2B)。
腫物實質區:低倍鏡下觀察,腫物深層區域內結締組織、血管增生明顯,腫物細胞呈束狀生長排列(圖2C)。高倍鏡下觀察,梭形細胞形態飽滿,生長密集,胞漿細長,膨大,卵圓形,有囊泡,部分核仁扭曲。部分區域可見核仁濃縮,染色質深染??赡苡^察到典型的紅細胞大小不均和細胞核大小不等(圖2D)。
此腫物除上述兩種表現區域以外,腫物內大面積壞死,血管大量增生(圖2E),炎性細胞大量浸潤(圖2F)。

圖2 獅子腹側腫物病理學觀察
經臨床特征觀察、化驗室分析以及組織病理學診斷,獅子腹側皮下腫物為:組織細胞肉瘤(tissue s 又arcoma),同時發生感染,預后不良。
組織細胞肉瘤起源于樹突細胞,主要分為局部型和分散型。在犬科動物,組織細胞肉瘤兩種類型均可見到,而在貓科動物此類病例較為少見。局部型組織細胞肉瘤多為局部生長,腫瘤發展后期趨向于淋巴結轉移,并隨淋巴系統進行全身轉移,往往預后不良。
組織細胞肉瘤診斷特點在于其具有多形性,其兩種主要的形式為:圓形細胞類型與紡錘形細胞類型。圓形細胞類型:腫瘤主要由大的獨立的細胞組成,胞漿雙嗜性,偶見胞漿形成空泡,呈現多形態和扭曲的細胞核,每個細胞核有一到兩個核仁,如本文中圖2B。紡錘形細胞類型:特點是梭形細胞的密集生長,胞漿細長,部分核仁扭曲,如本文中圖2D。
組織細胞肉瘤診斷難點在于:①局部型與分散型組織細胞肉瘤的組織病理學特征完全一致;②圓形組織細胞肉瘤可能與其它圓形細胞肉瘤相似,如多形性脂肪肉瘤;③紡錘形組織細胞肉瘤可能與其它梭形細胞肉瘤相似,如分化不良的纖維肉瘤。因此,在對組織細胞肉瘤進行診斷時,需要仔細辨別,必要時加入免疫組化技術來進行判斷[2]。
本病例除組織細胞肉瘤外,腫瘤內部大面積壞死(壞死體積占腫瘤體積約50%),同時炎癥反應較為強烈,此癥狀應考慮是由于腫瘤的極速生長,導致腫瘤內營養供應不足引起的壞死,而炎癥反應為壞死后出現。
組織細胞肉瘤雖屬于低惡性腫瘤,但其具有轉移性,故此獅子術后需做好定期檢查的準備。
作為常發病,腫瘤在人醫領域研究已較為廣泛、深入。而由于缺乏相應的病理診斷平臺,關于野生動物腫瘤疾病的研究與報道還極為少見,同時野生動物病理從業人員的缺少,也限制了野生動物病理診斷的發展。本次獅子組織細胞肉瘤病例的完成,將病理診斷與臨床診斷、化驗室診斷進行了整合,為今后相關疾病的提前預判提供了參考依據,也為今后野生動物腫瘤病理學診斷提供對應思路。
本研究采用病理學技術,對獅子腹側皮下腫物進行病理學診斷,分析得出此腫物為組織細胞瘤,此病例的完成,為今后野生動物腫瘤的診斷以及治療工作提供了較為可靠的經驗和方案。