中性粒細胞彈性蛋白酶對2型糖尿病合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷價值

楊燕麗 張秋玲 王婧

2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus,T2DM）可引發各類急慢性并發癥，如心血管疾病等，早期癥狀不典型，不易引起重視，患者致殘率和病死率較高，預后較差[1-2]。因此對T2DM并發心血管疾病的危險因素開展前期預防和干預至關重要[3]。研究表明，糖尿病患者血漿中中性粒細胞彈性蛋白酶（neutrophil elastase,NE）水平明顯高于健康人群[4]。而NE是目前研究動脈粥樣硬化發病機制的重要指標，而動脈粥樣硬化是缺血性心腦血管疾病的主要病理基礎[5]。因此，本研究就NE對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷價值作一探討，現將結果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2018年4月—2020年4月杭州師范大學附屬醫院收治的201例T2DM患者為研究對象，T2DM的診斷符合中華醫學會糖尿病學分會發布的《中國2型糖尿病防治指南（2013年版）》相關診斷標準[6]。根據血管B超檢查結果診斷有無動脈粥樣硬化斑塊[7]，其中無動脈粥樣硬化斑塊102例，為T2DM組；有動脈粥樣硬化斑塊99例，為T2DM+斑塊組。另選取同期在本院健康體檢的99名志愿者為對照組。對照組男52人，女47人；年齡46～71（58.53±10.13）歲；BMI（24.11±1.64）kg/m2。T2DM 組男 51例，女 51例；年齡49～73（58.36±7.91）歲；BMI（24.20±1.57）kg/m2；糖尿病病程（4.82±0.53）年；使用降血脂藥物15例，他汀類藥物22例，貝特類藥物16例。T2DM+斑塊組男52例，女 47例；年齡 47～70（58.24±10.95）歲；BMI（24.80±1.99）kg/m2；糖尿病病程（4.95±0.70）年；使用降血脂藥物14例，他汀類藥物18例，貝特類藥物14例。3組對象性別、年齡、BMI比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05）；T2DM組與T2DM+斑塊組患者糖尿病病程、藥物使用情況比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05）。納入標準：（1）對照組受試者身體各項指標無異常，且與T2DM組、T2DM+斑塊組患者無親屬血緣關系；（2）年齡為 18～85周歲；（3）T2DM患者病程≥2年；（4）T2DM組患者未合并其他心血管疾病。排除標準：（1）合并其他類型糖尿病；（2）患有感染性疾病或嚴重創傷；（3）合并其他影響糖代謝的疾病；（4）合并嚴重肝腎功能異常、惡性腫瘤或全身性嚴重疾?。唬?）最近服用過肝素、利尿劑、抗生素等藥物；（6）同期參與其他研究項目。本研究經本院醫學倫理委員會審查通過（批準文號：2016-18號），所有入組對象知情同意。

1.2 資料收集 收集各組對象性別、年齡、BMI、糖尿病病程、藥物使用情況、血清NE水平及心血管相關指標等臨床資料，其中心血管相關指標包括α1-抗胰蛋白酶（A1AT）、糖化血紅蛋白（HbA1C）、FPG、TC、TG、超敏（hs）-CRP、LDL-C、HDL-C等。

1.3 統計學處理 采用SPSS 17.0統計軟件。計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗；血清NE水平與心血管相關指標的相關性分析采用Pearson相關；血清NE水平及心血管相關指標對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷效能采用ROC曲線分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組對象血清NE水平及心血管相關指標比較 3組對象血清NE水平及心血管相關指標比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），其中對照組 NE、HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C水平均明顯低于T2DM組、T2DM+斑塊組（均P＜0.05），T2DM組 NE、HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C水平均明顯低于T2DM+斑塊組（均P＜0.05），對照組A1AT、HDL-C水平均明顯高于T2DM組、T2DM+斑塊組（均P＜0.05），T2DM組A1AT、HDL-C水平均明顯高于T2DM+斑塊組（均P＜0.05），見表1。

表1 3組對象血清NE水平及心血管相關指標比較

2.2 血清NE水平與心血管相關指標的相關性分析血清NE水平與A1AT、HDL-C均呈負相關（r=-0.205、-0.140，均P＜0.05），與HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C均呈正相關（r=0.791、0.825、0.687、0.772、0.670、0.590，均P＜0.05）。

2.3 血清NE水平及心血管相關指標對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷效能 NE、A1AT、FPG、TC、hs-CRP、LDL-C、HDL-C診斷T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的AUC分別為0.928、0.841、0.986、0.754、0.778、0.664、0.657，其中NE、A1AT、FPG的診斷效能相對較高；進一步分析這些指標聯合診斷效能顯示，NE+A1AT、NE+FPG、A1AT+FPG診斷T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的AUC分別為0.997、0.986、0.979，見表2和圖1。

圖1 血清NE水平及心血管相關指標診斷T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的ROC曲線（a：單項指標診斷；b：兩項指標聯合診斷）

表2 血清NE水平及心血管相關指標對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷效能

3 討論

研究表明，心血管疾病會影響T2DM患者的長期預后，且T2DM合并心血管疾病的致死率很高，因此及早診斷T2DM合并心血管疾病具有重要臨床意義[8]。糖尿病是一種慢性炎癥，由于胰島素、瘦素、糖基化終末產物等均可誘發多形核中性粒細胞增加、NE過量釋放以及氧化應激產物釋放。有文獻報道多形核中性粒細胞出現在人及小鼠動脈粥樣硬化斑塊的相應區域[9]。本研究就NE對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷價值作進一步探討。

本研究結果顯示，T2DM組、T2DM+斑塊組患者血清NE、HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C水平均明顯高于對照組，T2DM組NE、HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C水平均明顯低于T2DM+斑塊組，T2DM組、T2DM+斑塊組A1AT、HDL-C水平均明顯低于對照組，T2DM組A1AT、HDL-C水平均明顯高于T2DM+斑塊組，這提示T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊患者血清NE、HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C水平均明顯升高，而A1AT、HDL-C水平則明顯下降。筆者分析原因如下：（1）多形核中性粒細胞受到T2DM多種疾病因子刺激后，各種蛋白酶被釋放而產生其生物學效應，其中NE是眾多蛋白酶中最重要的一種[10]。NE高表達會對機體組織基質產生危害，表現為影響血管壁成分，更加趨化多形核中性粒細胞及TNF-α、IL-8等炎癥因子的釋放，進而造成機體內源抑制劑A1AT相應降低[11]。同時研究表明，機體血清NE水平較高與冠心病的形成存在一定的關聯[12]；（2）高血糖會引起脂質過量氧化，導致LDL-C水平升高、血壓增高，增強凝血酶活性及纖維蛋白的合成，而這些因素與心血管疾病的發生息息相關[13]；（3）相關研究提出假設，認為T2DM與動脈粥樣硬化均為慢性炎癥狀態，由細胞因子介導炎癥反應[14]。T2DM+斑塊組患者體內具有T2DM和動脈粥樣硬化這兩種慢性炎癥狀態，而長期慢性炎癥刺激會導致血管平滑肌細胞增生并向內膜下遷移，損害內皮細胞，又進一步推動動脈粥樣硬化的進程[15]。

本研究對血清NE水平與心血管相關指標的相關性進行分析，結果顯示NE與A1AT、HDL-C均呈負相關，與HbA1C、FPG、TC、TG、hs-CRP、LDL-C均呈正相關，提示血清NE水平與T2DM患者合并動脈粥樣硬化斑塊的疾病進展密切相關。NE具備降解細胞外基質蛋白及損壞血管內皮屏障功效的作用，誘發斑塊穩定性減弱，易引起破裂或表面潰瘍，導致血栓形成。A1AT是絲氨酸蛋白酶抑制劑，能調節NE、組織蛋白酶G、凝血酶等蛋白酶的活性，進而抑制組織降解[16]。若由于炎癥反應增強，體內NE水平升高，A1AT水平也相應升高，以提高NE滅活功能，但A1AT抑制蛋白酶的過程是一個自毀式反應，在NE失活過程中，A1AT被其捕獲的蛋白酶緩慢裂解，同時A1AT復合物還會被吞噬細胞辨識、吞噬并從血漿中消除[17]。當機體失代償時，A1AT降低，并與NE呈負相關[18]。相關研究發現，T2DM患者多形核中性粒細胞水平明顯高于健康對照組，且多形核中性粒細胞與淋巴細胞比例和HbA1C呈正相關[19]。本研究結果顯示，NE與HbA1C、FPG均呈正相關，與上述研究結果相似。本研究結果顯示，NE與hs-CRP呈正相關，表明NE亦可反映體內炎癥狀態。TC、HDL-C分別是促進和抑制動脈粥樣硬化斑塊形成的標志性血脂指標，修飾后的LDL-C利用毀壞舒張血管物質和收縮血管物質的平衡來推動血栓形成，而HDL-C能抑制LDL的氧化修飾，延緩動脈粥樣硬化的發展；TG存在于血中乳糜微粒、極低密度脂蛋白及殘粒的核心，這些物質均可促進動脈粥樣硬化斑塊形成。近年來研究表明，NE分泌可能是介導系統性慢性炎癥和胰島素抵抗的關鍵機制[20]。本研究進一步采用ROC曲線分析，發現NE分別聯合A1AT、FPG相較于單項指標，能顯著提高對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷價值。

綜上所述，NE聯合A1AT、FPG等心血管相關指標能有效提高對T2DM合并動脈粥樣硬化斑塊的診斷效能，值得臨床推廣應用。