血清IL-15 AAG水平與肺結核化療患者預后的相關性

張天蔚， 彭 婷， 李永武， 王艷波， 鐘業騰

(海南醫學院第二附屬醫院檢驗科， 海南 海口 570311)

肺結核由結核分枝桿菌感染肺部而致，發病與病情進展均與促炎及炎性因子存在密切關系。目前，臨床仍待探討新型指標，以為肺結核患者預后評估提供指導。有研究指出，蛋白質參與機體物質交換、代謝、免疫等多種生理功能，對肺結核發病、治療時藥物靶點均有影響[1]。提示蛋白質可能與肺結核患者預后存在密切關系。此外，肺結核可誘發炎癥級聯反應，患者多項細胞因子水平出現變化。基于此，本研究選取急性時相反應蛋白α1-酸性糖蛋白(α1-Acid Glycoprotein，AAG)結合炎癥因子白細胞介素-15(Inter Leukin-15，IL-15)作為研究指標，進一步探討兩者與肺結核化療患者預后的關系，旨在指導臨床合理評估肺結核化療患者預后。

1 資料與方法

1.1一般資料:選擇醫院2017年2月至2019年2月收治221例肺結核患者，年齡22～46歲，平均(34.61±5.48)歲；男142例，女79例；病程2～6d，平均(4.72±1.14)d；吸煙史137例，飲酒史161例；合并氣管支氣管結核42例。本院倫理委員會批準研究的實施，患者及家屬對研究的內容知情同意。

1.2入選標準:納入標準：①均為活動性肺結核，符合有關診斷標準；②入組時尚未開始抗結核治療；③行痰涂片鏡檢可見結核分枝桿菌或抗酸桿菌陽性，重復測量2～3次；④行胸部X線檢查可見局限性或侵犯多肺段病變，呈增殖、滲出、纖維及干酪樣病變，可伴鈣化、空洞、支氣管播散灶；⑤患者有咳嗽、咯血、低熱等癥狀。排除標準：①近3個月服用過免疫調節劑的患者；②合并肺部腫瘤的患者；③合并肺纖維化、肺結節的患者；④合并免疫系統疾病的患者；⑤合并心、肝、腎功能等其他重要臟器相關疾病的患者。

1.3方法:基線資料及化療治療：采用自制調查表收集患者基線資料，包括年齡、性別、病程、吸煙史、飲酒史、合并氣管支氣管結核。氣管支氣管結核診斷：行支氣管鏡檢查可見氣管支氣管病變，行痰涂片鏡檢可見結核分枝桿菌或抗酸桿菌陽性，行結核菌素試驗呈現為陽性，支氣管灌洗液支氣管刷片陽性或抗酸染色陽性。患者均接受化療治療，前兩個月實施強化期治療，給予利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、注射用鏈霉素進行化療，強化期結束時，行痰涂片鏡檢，若仍為陽性，增加一個月強化期治療。若陰性，進入鞏固期治療，持續六個月，給予利福平、異煙肼進行化療。細胞因子水平檢測：治療2個月，采集患者空腹靜脈血5mL，以3000r/min的速度離心10min，取血清，采用武漢華美CUSABIO公司提供的酶聯免疫吸附試劑盒檢測干擾素-γ(Interferon-γ，IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α)、巨噬細胞移動抑制因子(Mi-Gration Inhibitory Factor，MIF)及IL-15水平。AAG水平：治療2個月，采集患者空腹靜脈血5mL，以3000r/min的速度離心10min，取血清，采用上海費瑪生物科技有限公司提供的α1酸性糖蛋白診斷試劑盒檢測血清AAG水平，檢測方法為免疫比濁法。預后評估：記錄患者治療8個月后痰涂片鏡檢轉陰狀況，結合胸部X線檢查評估患者預后，若痰涂片鏡檢轉陰，再行胸部X線檢查，若患者病灶吸收≥原病灶1/2，則可判定為預后良好，不滿足則判定為預后不良。

1.4統計學方法:采用SPSS24.0處理數據。全部計量資料均經Shapiro-Wilk正態性檢驗，符合正態分布以表示，組間用獨立樣本t檢驗；百分比表示計數資料，用χ2檢驗；采用回歸分析檢驗肺結核化療患者細胞因子水平、AAG水平與預后的關系；繪制受試者工作曲線(Receiver Operating Curve，ROC)，得到曲線下面積(Area Under Curve，AUC)，檢驗肺結核化療患者細胞因子水平、AAG水平對預后的預測價值，AUC值>0.9表示預測性能高，0.71～0.90表示有一定的預測性能，0.5～0.7表示預測性能較差；P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1肺結核化療預后良好組與預后不良組基線資料、細胞因子水平、AAG水平比較:221例肺結核患者治療8個月時，有152例(68.78%)病灶吸收≥原病灶1/2，為預后良好，有69例(31.22%)預后不良。肺結核化療預后不良組治療2個月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15均高于預后良好組，治療2個月AAG均低于預后良好組，見表1。

表1 肺結核化療預后良好組與預后不良組基線資料細胞因子水平AAG水平比較

2.2回歸分析檢驗各主要因子與肺結核化療患者預后的關系：將肺結核化療患者治療2個月的各細胞因子水平、AAG水平作為自變量，將患者預后作為因變量(1=預后較差，0=預后良好)，建立多元Logistic回歸模型，結果顯示，肺結核化療患者治療2個月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15過表達，AAG表達下調均是患者預后不良的風險因子(OR>1，P<0.05)，見表2。

表2 回歸分析檢驗各主要因子與肺結核化療患者預后的關系

2.3肺結核化療患者治療2個月細胞因子水平、AAG水平預測預后風險的ROC結果:將肺結核化療患者治療2個月細胞因子水平、AAG水平作為檢驗變量，將患者預后作為狀態變量(1=預后不良，0=預后良好)，繪制ROC曲線(見圖1～2)發現，肺結核患者治療2個月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15、AAG水平預測預后不良風險的AUC分別為：0.760、0.719、0.726、0.788、0.838，均>0.71，均有一定預測價值，且以AAG預測AUC最高，檢驗相關參數詳見表3。

表3 治療2個月細胞因子水平AAG水平預測肺結核化療預后不良風險的ROC檢驗結果

圖1 治療2個月細胞因子水平預測肺結核化療預后不良風險的ROC曲線圖

圖2 治療2個月AAG水平預測肺結核化療預后不良風險的ROC曲線圖

3 討 論

劉杰等[2]研究顯示，肺結核患者行常規化療后，痰轉陰率僅有75.0%，病灶吸收率僅有67.5%。本研究結果顯示，肺結核患者病灶吸收率達68.78%。提示肺結核患者行化療治療的獲益仍不理想，對預后相關指標進行研究尤為必要。

本研究結果顯示，治療2個月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15過表達，AAG表達下調可增加肺結核化療患者預后風險。分析原因：TNF-α可激活細胞免疫應答反應，發揮抗感染，抑制病原菌增殖的功能[3]。IFN-γ具有細胞毒性，可殺滅細胞內結核分枝桿菌；并通過激活巨噬細胞，產生活性氮、活性氧等物質，殺滅細胞內結核分枝桿菌[4]。MIF可活化外周血單核細胞，增加炎癥介質產生，加速炎癥反應，影響肺通氣功能，促進肺結核病情進展[5]。在肺結核患者中，TNF-α、IFN-γ、MIF表達說明患者結核分枝桿菌增殖能力較強，患者病灶吸收慢，預后風險高。

IL-15可活化T淋巴細胞，與TNF-α共同作用，促進局部T淋巴細胞聚集，并增加IFN-γ分泌，進而溶解靶細胞，攻擊細胞內結核分枝桿菌[6]。IL-15可活化B淋巴細胞，B淋巴細胞為抗原提呈細胞，可提呈細胞、產生抗體，并可刺激T淋巴細胞增殖、生長，發揮抗結核效果。IL-15表達水平越高，說明患者機體結核分枝桿菌越活躍，肺結核病情越嚴重，經治療后，患者預后風險仍較高。AAG是急性時相蛋白，正常情況下在外周血中含量低，在感染、炎癥等病理狀態下，肝臟合成急性時相蛋白增多，血清中AAG表達上調[7]。而在肺結核患者中，AAG含量表現為顯著降低，與合并肝損傷有關。因肺結核患者需接受化療，選用藥物較多，治療時間較長，隨療程進展，可導致藥物性肝功能損傷，肝臟分泌AAG能力降低。此外，化療藥物可產生免疫抑制，可造成肝臟合成AAG減少[8]。因此AAG表達下調時，患者對化療的耐受性較差，結核分枝桿菌耐藥性強，病灶吸收速度慢，患者預后風險較高。

繪制ROC發現，AAG及IL-15水平對肺結核患者化療預后有更高預測價值。臨床應在肺結核治療期間定期檢測AAG及IL-15水平，實施保肝、抗炎治療。但因本研究觀察時間尚短、納入資料不夠全面，結論尚有局限，還應在未來增加其他相關指標，延長觀察時間，進一步分析肺結核患者預后的相關指標。