以臨床價值為導向的獸用中藥藥學研究思路

顧進華，劉自揚，蘇富琴，龔旭昊，王學偉，李慧杰

(1.中國獸醫藥品監察所(農業農村部獸藥評審中心)，北京 100081；2.農業農村部中獸醫生物學重點實驗室，北京 100081)

為避免獸用中藥藥學研究過程中出現一味追求制劑現代化而忽略臨床價值的傾向，本文擬結合獸用中藥特點和新藥研究實踐，強調“以臨床價值為導向”在獸用中藥研究中的重要性，嘗試對獸用中藥的處方研究、生產工藝研究和質量控制方法研究中的“以臨床價值為導向”藥學研究思路進行闡述，為建立完善相關獸用中藥研究指導原則提供理論依據。

1 獸用中藥的內涵與特點

中獸醫藥具有獨特的、傳統的科學理論體系，獸用中藥是在傳統中獸醫藥理論指導下應用的藥用物質及其制劑。中藥作用復雜，根據中醫藥理論和中藥藥性特點辨證施治，具有多靶點、多維度、整體調節的臨床作用特點，在防治病毒性疾病、免疫性疾病、治未病等方面[1-2]具有明顯的特色和優勢。

獸用中藥臨床實際涉及不同靶動物、中醫證候在不同靶動物上辨證的復雜性，以及中藥復方的復雜性。由于缺少適合于分析不同動物疾病辨證和中藥兩方面復雜性的傳統研究方法，采用現代醫藥理論評價傳統中獸醫藥理論下的中藥存在維度交叉與不適用；目前中獸醫藥研究面臨一些難點，包括中獸醫辨證論治、中藥藥性和方劑配伍等傳統理論的現代闡釋不清晰，中藥藥效物質基礎和作用機制不明確，缺乏符合中藥特點的藥效和安全性評價體系等。

1.1 植物藥思維與中醫藥理論 一些化學藥品來源于動植物。西方的古醫學過去也用少量的動植物藥，他們稱為“生藥”。最終，他們在金雞納樹皮里面提取了奎寧，在麻黃中發現了麻黃堿，在柳樹皮里發現了水楊酸，然后制成單一成分的制劑[3]，把植物藥變成化學藥。新獸藥注冊中，獸用中藥和天然藥物是兩個維度，采用傳統中醫藥理論的為獸用中藥，采用現代醫藥理論的為獸用天然藥物。

長期以來，受各種因素的影響，在社會大眾層面不少人只從有效成分、營養學角度看待中醫藥；而在專業人群中，也有相當一部分人用化學藥品、植物藥思維替代中醫思維，用現代醫藥理論評價獸用中藥，導致中藥研究出現偏差。

古有神農嘗百草，中藥歷來重視中醫藥理論中的“藥性”總結：寒熱溫涼、升降浮沉、性味歸經等，強調道地藥材，而不是按照現代醫藥理論強調有效成分、物質含量等。中藥是按照其性味歸經，根據中醫藥理論辨證施治，達到天人合一，機體陰陽平衡。

1.2 中藥藥效與物質基礎研究 獸用中藥產品大多采用源于自然界的植物、動物和礦物為原料，化學成分復雜，單味中藥往往含生物堿、氨基酸、有機酸、萜類、甾體、糖類、多酚、香豆素、皂苷等多種化合物。目前，我國在單味藥的物質基礎研究上取得了一些成果，如青蒿素、石杉堿甲、川芎嗪、五味子素、聯苯雙酯、銀杏內酯等。

王飛：中國學生面臨這樣一個問題，那就是高考時要考兩門語言，一是語文，一是英文。其實，在全世界范圍內，只有中國學生要考兩種語言。怎樣減負，當時我提的一個建議就是取消英語課。說實在的，增加一門語言課對學生的智慧發展有何作用，答案未必就是肯定的。IB課程發展主要集中在資金較為充足的學校，是為學生今后出國準備的課程。其實，IB課程也就是一門語言課，學生完全可以自己學，什么時候學都能學好。我認為，辦IB課程是中國基礎教育的一件非常糟糕的事情。

關于中藥藥效物質基礎的觀點很多：全成分論、多成分論、有限成分論等[4]；其活性成分按提取情況可以分為有效成分、有效組分、有效部位等。但辨識清楚中藥藥效活性成分不是一件容易的事，目前的研究并不能全面闡述中藥組方效應的物質基礎，難以體現中醫治療疾病的整體性、系統性[5]。

中藥藥性的物質基礎認識尚不夠深入，有專家認為，中藥藥效物質基礎更應該是中藥進入人體后作用于多個靶點并產生整體功效的化學組分群，其可能來源包括單味藥材固有成分、制備過程形成的產物以及藥物進入體內后與機體相互作用產生的代謝產物[6]。

化學藥品的藥物化學成分是明確的，多數是單一的。化學藥品的質量控制，以化學成分為主導是符合科學規律的。傳統中藥絕大多數為復方，其活性物質為混合物，并且各君臣佐使藥味之間存在相互作用，通過1-2個化學成分的定性和定量測定，難以對中藥總體質量進行有效評價，且有的成分不是有效成分而僅為指示成分，并不能與其生物效應形成關聯。

中藥質量控制存在片面關注單一成分的問題，甚至造成了一種化合物在許多不同類別的藥品標準中使用的情況。例如槲皮素的含量測定，在現有不同用途中藥制劑中出現的頻率之高，成為了中藥質量控制尷尬現狀的一個典型例證。味連，含小檗堿(C20H17NO4)不得少于5.5%；雅連，含小檗堿(C20H17NO4)不得少于4.5%；云連，含小檗堿(C20H17NO4)不得少于7.0%，三者的用量都是2～5 g[7]。再如，獸醫常用中藥“黃連、黃柏、黃芩”的功效與含量測定內容并無明顯關聯，見表1。

表1 “黃連、黃柏、黃芩”功效及含量測定有關內容[8]Tab1 The authorized Veterinary Chinese Medicine from 2004 to 2021

2. 獸用中藥審批情況

獸用中藥領域長期致力于建立能反映中醫藥整體特色的研究策略和方法，盡量避免中藥研究出現偏差。目前農業農村部以公告形式發布的獸用中藥藥學研究指導原則主要包括《獸用中藥、天然藥物原料前處理技術指導原則》《獸用中藥、天然藥物提取純化工藝研究技術指導原則》《獸用中藥、天然藥物制劑研究技術指導原則》《獸用中藥、天然藥物中試研究技術指導原則》《獸用中藥、天然藥物穩定性試驗技術指導原則》《獸用中藥、天然藥物質量標準分析方法驗證指導原則》(2006年農業部公告第630號)、《獸用中藥、天然藥物安全藥理學研究技術指導原則》《獸用中藥、天然藥物通用名稱命名指導原則》《獸用中藥、天然藥物質量控制研究技術指導原則》(2011年農業部公告第1596號)[9]。

2.1 2004-2021年批準獸用中藥統計 2004年《獸藥管理條例》[10]頒布以后，獸用中藥的注冊審批進入快車道。按照2004年442號公告的“中獸藥、天然藥物分類及注冊資料要求”，我國共批準159個新的獸用中藥[11]，其中，一類新藥3個，二類新藥12個，三類新藥127個，四類新藥17個。三類新藥占79.8%，見圖1、表2。天然藥物僅有1個品種[12]。

圖1 2004-2021年批準獸用中藥情況Fig 1 The TCM efficacy and assay of Huanglian HUangbai and Huangqin

表2 2004-2021年批準獸用中藥統計表(個/年)Tab 2 The authorized Veterinary Chinese Medicine from 2004 to 2021(number/year)

2.2 2004-2021年批準獸用中藥主治情形 2004-2021年批準獸用中藥的主治內容較為豐富，可以分為以下幾種：第一種，主治采用證候表述的中藥復方制劑，所涉及的“證”是單純的中醫證候，不包括中醫的病，其功能主治均以中醫專業術語表述；第二種，主治采用病證結合表述的中藥復方制劑，所涉及的“病”是指現代醫學的疾病，“證”是指中醫的證候，其功能用中醫專業術語表述、主治以現代醫學疾病與中醫證候相結合的方式表述；第三種，主治采用病表述的中藥復方制劑，屬于專病專藥，在中醫藥理論指導下組方，所涉及的“病”是現代醫學疾病的，其功能用中醫專業術語表述，主治以現代醫學疾病表述；所涉及的“病”是中醫學的病的，其功能主治均以中醫專業術語表述。

其中，第二、第三種“主治涉及‘病’”的情形的批準品種最多，有關主治情況統計見下表3：

表3 2004-2021年批準獸用中藥有關主治情況統計Tab 3 The application of Veterinary Chinese Medicine authorized from 2004 to 2021

3 處方篩選研究與臨床

研發獸用中藥制劑，要重視經典名方、經驗方的臨床價值，嚴控藥味堆砌的大復方。其中主要的一條就是遵循中醫藥理論，以既往古籍、現代文獻記載及實際臨床應用過程中的經驗數據為基礎，按照辨證論治原則，按照君臣佐使組方，篩選臨床使用安全有效的中藥方劑制成制劑；同時應注意隨著社會經濟模式的變化，獸醫的主要診療對象不再是使役動物，面對畜牧水產養殖動物疾病防控和促生長需求，以及犬、貓、賽馬、賽鴿甚至異寵等不同臨床需求，獸用中藥仍需要積累大量的臨床經驗和數據。

2021年，醫藥領域獲批的12個中藥新藥[13]，均是由“方”變“藥”，其轉化是“源于臨床、回歸臨床”。其中，中醫藥抗疫“三方”來源于古代經典名方，成為中藥注冊分類改革后首次按“其他來源于古代經典名方的中藥復方制劑”審評審批的品種：清肺排毒顆粒、化濕敗毒顆粒、宣肺敗毒顆粒。8個是在臨床經驗方基礎上研制而成：益腎養心安神片、益氣通竅丸、銀翹清熱片、玄七健骨片、芪蛭益腎膠囊、坤心寧顆粒、虎貞清風膠、解郁除煩膠囊，還有1個是在醫療機構制劑基礎上研制而成的七蕊胃舒膠囊[14]；對獸用中藥經方的開發提供了有益參考。

3.2 處方中藥材質量要求 為保證制劑質量穩定一致，作為中藥制劑源頭的藥材應采取必要的措施如固定基原、藥用部位、產地等以保證質量可控。

應結合藥材特點及制劑生產需求確定飲片的炮制方法、工藝參數及質量要求。尊重傳統用藥經驗是中藥新藥研究的必然要求。藥材、飲片的生產、質量控制應繼承和利用好傳統經驗和技術，藥材的采收時間、產地加工方法和飲片的炮制方法、炮制程度等的研究都應尊重傳統經驗。

4 生產工藝研究與臨床

在中藥的生產過程、特別是提取生產以及質量控制過程中，應始終把臨床藥效和安全性需求放在第一位，對待中藥有效成分，應該秉持“有成分”但“不唯成分”的態度[15]。

4.1 現代工藝制劑的藥效評價 現代工藝制劑主要指經深度提取制得的中藥制劑，包括注射液和部分口服液、顆粒劑，也必須以臨床研究或實際臨床應用過程中的經驗數據為基礎，工藝先進性的追求應該服從于保證藥效和安全性要求。相關天然藥物的研究也應該遵循以上原則。遵照基本湯劑指引，按臨床藥效確定提取生產工藝；在充分的臨床研究基礎上創新劑型，嚴格把握深度提取制劑的臨床研究數據。一般來說，活性成分較為清楚的，可以提取制成溶液劑、注射劑；活性成分難以把握的，一般制成散劑、微粉劑、丸劑，或按照臨床使用經驗制成顆粒劑、片劑、溶液劑等。

表4 中藥成分認識與提取處理深度表Tab 4 The content identification and different extractive of TCM

一般經過正交試驗或隊列研究等，研究用水量、煎煮溫度、煎煮時長等對提取質量的影響，鎖定出膏率、有效成分等與療效相關的因素，通過對試驗結果進行方差分析，選擇理論上最佳的工藝條件。

4.2 獸醫臨床需求是工藝研究的終極目標 獸用中藥藥效物質基礎研究關系到藥效評價結果和藥物的安全性。表面上，物質基礎研究是藥學問題，實則與藥理學和獸醫臨床密不可分。獸用復方制劑中多味藥物配伍發揮功效，不是簡單的化學成分疊加，同一味藥對不同疾病發揮功效的成分也不盡相同。

現階段獸用中藥新藥研發和技術評價，亟需加強以獸醫臨床價值為導向的獸用中藥處方、工藝和質控方法等藥學研究，圍繞療效這個出發點和落腳點開展藥學研究。

古代獸用中藥多以水煎湯劑應用，現代最接近古代湯劑的劑型為水煎后制成顆粒劑，即盡量還原古代的“一碗湯”。中藥配方顆粒研究中形成的“標準湯劑”概念，徹底改變了工藝參數優化的理念，不以某些成分高低論英雄，強調傳統的才是“最佳”的選擇。“標準湯劑”遵循傳統的中醫藥理論，按照古法(水提)工藝制備而成，在融合現代煎藥設備及工藝特點基礎上極大限度地保存傳統工藝的完整性。“標準湯劑”中的“標準”主要涵蓋投料藥材的道地性、提取工藝的統一性及質量控制的嚴謹性，確保配方顆粒的化學成分及藥效作用與標準湯劑具有一致性[16]。不足之處是缺少復方水煎過程中發生的化學或物理變化，與古代的“一碗湯”還存在差異。

醫藥領域新的中藥審評審批體系根本性的變化是：淡化了原注冊分類管理中“有效成分”和“有效部位”含量要求，不再僅以物質基礎作為劃分注冊類別的依據，而是支持基于中醫藥理論和中醫臨床實踐經驗評價中藥的有效性[17]。這體現了醫藥管理層開始重視和尊重中醫藥自身獨特的科學規律，落實“傳承精華、守正創新”，著手建立、完善遵循中醫藥獨特規律、能更好發揮中醫藥特色、比較優勢和文化自信的政策體系。

5 質量控制研究與安全性和有效性

5.1 中藥質量與安全性和有效性的關聯 中藥質量標準應符合中藥特點，質量標準中檢測項目和評價指標應體現與藥品安全性及有效性的關聯。檢查項目中應涵蓋與安全性相關的內容，包括重金屬及有害元素、有機溶劑殘留、毒性成分的限量檢查，并應從安全性及生產實際充分論證檢驗方法及其限度的合理性。處方中既為有效成分又為有毒成分的藥味，應對其進行含量測定并規定含量范圍。含量測定根據其功能主治應首選與藥品安全性、有效性相關聯的化學成分，一般優先選擇有效(活性)成分、毒性成分、君藥所含指標成分等為含量測定指標[18]。

完善的質量標準體系是保證藥品質量可追溯的基礎，反映了中藥制劑生產過程中定量或質量可控的藥用物質從藥材、飲片或提取物、中間體到制劑的傳遞過程，也體現了中藥制劑質量標準與工藝設計、質量研究、穩定性研究等的關系。

5.2 中藥整體質量控制及檢測方法 獸用中藥有別于化學藥、生物藥等現代藥物，中藥及其制劑具有多成分、多途徑和多靶點協同作用等特點，不能滿足于抓住某有效成分或單純以化學藥研發的“盲人摸象”思維邏輯評價中藥，應突出“中藥整體質量控制”模式的意義，多維度開展質量標準研究。制劑質量標準主要包括名稱、處方、制法、性狀、鑒別、檢查、浸出物、指紋/特征圖譜、含量測定、生物活性測定、規格、貯藏等。質量標準應結合制劑的處方組成、有效成分或指標成分、輔料以及劑型的特點開展針對性研究。通過制定反映整體質量特征的評價指標和方法，構建符合中藥特點，涵蓋藥材、飲片、提取物、中間產物到制劑生產等全過程的中藥質量控制體系。

一般散劑、原粉片與顆粒，應參考藥材顯微鑒別特征，開展顯微特征的專屬性研究，對處方中所有原粉藥味建立顯微鑒別方法。

根據整體質量控制需要，綜合考慮并選擇有關對照藥材、對照提取物或中藥對照品建立薄層鑒別方法。薄層色譜法可對特征斑點的個數、比移值、斑點顏色等與標準物質的一致性予以詳細描述，增加鑒別的專屬性和可控性。

浸出物測定是加強整體性質量控制的重要方法。中藥復方是一個藥效物質整體，目前一些研究中只對其中一至兩個成分進行檢測與鑒定，并不能完全代表中藥復方藥效物質的整體。含量測定應側重于多成分或多組分測定，一測多評[19]、一法多測。某些有效成分含量甚微，使得其體內外檢測難以進行。含有揮發油和熱敏性成分時，應開展研究并視情況列入標準。

特征圖譜方法是釆用液相或氣相色譜法，比較主要成份色譜峰的個數，規定其相對保留時間、相對峰面積等。對于提取物及深度提取制劑如注射液，特別是針對不同類型成分建立多個特征圖譜，可以更完整地反映藥物的質量特征。

生物活性測定可以彌補常規物理化學方法在控制藥品質量方面的局限性。獸藥“黃芪多糖注射液”用測定小鼠的脾增重方法[20]，為判斷是否具有增強免疫力功效提供依據，是十分寶貴的嘗試。

分子生物學方法將會成為繼光譜、色譜技術之后的中藥質量標準研究領域又一重要方法[21]。分子生物學DNA、基因組學方法能夠提供判斷是否是來源于某種動植物的重要依據，能從藥味整體性上說明問題，對于保障藥效具有重要意義。中藥(不含礦物類)所依賴的生物資源多樣性是基因多樣性的表現形式，而檢測這種多態性的技術就是DNA分子標記方法。DNA分子信息量大，由于進化過程中分化不同的基因區域，通過選擇一定的基因組DNA分子片斷進行檢測，具有傳統中藥檢測方法無法比擬的優點。

6 結 語

所謂“質量源于設計”[22-23]，獸用中藥新藥的藥學研究就是對中獸醫藥理論指導組方的獸用中藥新藥質量設計、質量賦予、質量完善的過程。為實現獸用中藥新藥安全、有效和質量可控的目標，從處方篩選、劑型設計到藥材、飲片炮制、工藝研究、放大生產、質量檢驗，均要對賦予與影響制劑質量的因素進行控制。

以獸醫臨床價值為導向，探索并建立獸用中藥新藥研究各階段藥學研究、制劑生產工藝研究、質量及標準研究技術指導原則，不僅是建立完善符合中藥特點的注冊管理制度和技術評價體系的迫切需求，也是促進中藥傳承創新發展、中藥產業高質量發展的重要內容。