藥用植物內生真菌的分離及拮抗菌的篩選與鑒定

王占斌，周 暄，馬鑫博，王靖琳

（東北林業大學林學院，哈爾濱 150040）

0 引言

簡便高效的各類農藥越來越多地應用于農林植物的生產防治中，但是由于對環境的破壞與植物病原菌抗藥性的出現，人們不得不尋找其他可替代的、毒副作用小、安全有效的防治手段來防治植物病害，例如生物防治手段，而內生菌的發現為人們提供了嶄新的研究方向[1]。植物內生菌（endophyte、endophytic fungal或fungal endophyte）是植物病害生物防治的一種天然資源真菌[2]，不僅具有廣泛的理論研究價值和應用前景，也影響著植物的生長發育[3]。Gopane認為大多數藥用植物具有抗菌活性，并寄生了大量的內生真菌，用于防御病原體的攻擊，并且這一發現掀起了植物內生菌研究的熱潮[4]。但至今內生真菌的概念仍有爭議，人們普遍認為植物內生真菌是指那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物的各種組織和器官內部的真菌[5-6]，被感染的宿主植物（至少是暫時）不表現出外在病癥，可通過組織學方法或從嚴格表面消毒的植物組織中分離或從植物組織內直接擴增出微生物DNA的方法來證明其內生[7]。近些年來國內外對于內生菌的分離鑒定及拮抗作用的研究也在逐漸增加，VanAnh Ngo等[8]從越南中部高地黑胡椒(Pipernigrum)90個樣本中分離到了352株內生菌株，對其進行抑菌活性測定，發現47株菌株對疫霉菌具有拮抗作用，通過16SRNA基因測序、構建系統發育樹鑒定的6種內生細菌均屬于芽孢桿菌屬。Nguyen等[9]從越南中部高地的黑胡椒的根中篩選出4個內生菌株，發現它們對土壤肥力有明顯的改善作用。……