羧甲淀粉鈉中氯乙酸殘留對馬來酸氯苯那敏穩(wěn)定性的影響*

伍偉聰，王 淼，陳 英，王彩媚

（廣東省藥品檢驗(yàn)所·國家藥品監(jiān)督管理局藥用輔料質(zhì)量控制與評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510663）

羧甲淀粉鈉具有良好的吸水性和膨脹性，在口服固體制劑中主要作為崩解劑［1-2］。羧甲淀粉鈉的生產(chǎn)工藝國內(nèi)多采用有機(jī)溶劑法，常以乙醇為溶劑，馬鈴薯淀粉或玉米淀粉作為原料，經(jīng)氫氧化鈉堿化后加入氯乙酸醚化生成羧甲淀粉鈉，然后經(jīng)離心、中和、干燥、粉碎與過篩等步驟制得成品［3］。其中，氯乙酸屬受管制的危險(xiǎn)化學(xué)品。歐盟《物質(zhì)和混合物分類、標(biāo)簽和包裝法規(guī)》（CLP）將其列為急性毒性類，吸入、皮膚接觸及口服均會引起中毒，出現(xiàn)呼吸功能、循環(huán)系統(tǒng)或肝腎功能受損等情況［4-5］。世界衛(wèi)生組織（WHO）和美國飲用水法規(guī)中均對飲用水中氯乙酸的最高允許濃度作了限定［6］。氯乙酸作為羧甲淀粉鈉生產(chǎn)的起始物料，在成品中存在殘留風(fēng)險(xiǎn)。本研究中采用離子色譜法［7］測定羧甲淀粉鈉中氯乙酸的殘留量，并以馬來酸氯苯那敏為模型藥物，考察羧甲淀粉鈉中氯乙酸殘留對其穩(wěn)定性的影響。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

ICS-5000 型離子色譜儀（美國Dionex 公司）；KF115型恒溫恒濕培養(yǎng)箱（德國Binder公司）；1100型高效液相色譜儀（美國Agilent 公司）；CP225D 型電子分析天平（德國Sartorius 公司，精度為十萬分之一）；M8800H-C型超聲波清洗儀（美國Bransonic公司）。

1.2 試藥

羧甲淀粉鈉65批（生產(chǎn)企業(yè)18家），其中國產(chǎn)48批（生產(chǎn)企業(yè)13家），進(jìn)口17批（生產(chǎn)企業(yè)5家）；氯乙酸對照品（上海麥克林生化科技有限公司，批號為C10105800，含量為98.0%）；馬來酸氯苯那敏對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為100047-201507，含量為99.7%）；磷酸二氫銨、磷酸均為分析純，乙腈為色譜純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 氯乙酸含量測定

2.1.1 色譜條件

色譜柱：AS11-HC 陰離子交換樹脂柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：10 mmol/ L 氫氧化鉀溶液；流速：1.0 mL/ min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：25 μL；電導(dǎo)檢測器［7］。

2.1.2 溶液制備

取氯乙酸對照品適量，精密稱定，用水溶解并稀釋制成每1 mL 含氯乙酸40 μg 的對照品溶液。取樣品約0.5 g，精密稱定，置50 mL 燒杯中，加水適量使其分散，濾過，殘?jiān)盟礈欤喜V液與洗滌液，置25 mL容量瓶中，用水定容，搖勻，濾過，即得供試品溶液。

2.1.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：取2.1.2 項(xiàng)下2 種溶液各適量，按2.1.1 項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置有吸收峰。理論板數(shù)按氯乙酸峰計(jì)應(yīng)不低于3 000，分離度大于1.5，基線分離良好。詳見圖1。

精密度、重復(fù)性試驗(yàn)：按要求進(jìn)行，結(jié)果的RSD均小于2.0%，表明儀器精密度、方法重復(fù)性均良好。

2.1.4 含量測定

取61 批樣品，按2.1.2 項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按2.1.1 項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，計(jì)算樣品中氯乙酸含量。結(jié)果均有氯乙酸殘留，近20%的樣品氯乙酸殘留超過0.2%，最高達(dá)1.68%。根據(jù)測定結(jié)果，選取8 批（批號A-H）含不同氯乙酸殘留量的羧甲淀粉鈉樣品，與馬來酸氯苯那敏進(jìn)行試驗(yàn)。

2.2 有關(guān)物質(zhì)測定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Fernigen C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫銨11.5 g，加水適量使溶解，加磷酸1 mL，用水稀釋至1 000 mL）-乙腈（80∶20，V/V）；流速：1.0 mL/ min；檢測波長：225 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL［8］。

2.2.2 供試品制備

取羧甲淀粉鈉樣品（批號A），定量加入氯乙酸，混合后使供試品含氯乙酸14.0%。分別取馬來酸氯苯那敏對照品約8 mg、上述羧甲淀粉鈉供試品約0.6 g［9］，精密稱定，研磨均勻，置稱量瓶中，作為試驗(yàn)用供試品，自編號為1#～9#；另取2.1.4項(xiàng)下A-H供試品各約0.6 g，作為空白對照品，自編號為10#～17#。取上述1#～17#供試品，分別按不同條件（見表1）存放。

2.2.3 溶液制備

稱取表1 中對照品適量，精密稱定，置100 mL 容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定容，搖勻，濾過，即得對照品溶液。取2.2.2 項(xiàng)下各放置條件下的供試品，加流動(dòng)相溶解，移至100 mL容量瓶中，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）20 min，用流動(dòng)相定容，搖勻，濾過，即得供試品溶液；取2.2.2項(xiàng)下各放置條件下的空白對照品，加流動(dòng)相溶解，移至100 mL 容量瓶中，超聲20 min，用流動(dòng)相定容，搖勻，濾過，即得空白對照品溶液。

表1 存放條件Tab.1 Storage conditions

2.2.4 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：取2.2.3項(xiàng)下3種溶液，按2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。結(jié)果供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置有吸收峰。理論板數(shù)按馬來酸氯苯那敏峰計(jì)應(yīng)不低于3 000，分離度大于1.5，基線分離良好。詳見圖2。

精密度、重復(fù)性試驗(yàn)：按要求進(jìn)行，結(jié)果上述試驗(yàn)的RSD均小于2.0%，表明儀器精密度、方法重復(fù)性均良好。

2.2.5 有關(guān)物質(zhì)含量測定

取2.2.3 項(xiàng)下3 種溶液，按2.2.1 項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，分別測定對照品及1#～17#供試品中有關(guān)物質(zhì)含量。結(jié)果見表2。可見，馬來酸氯苯那敏對照品在20 ℃與40 ℃條件下存放均較穩(wěn)定；相同存放條件下，馬來酸氯苯那敏的降解速率隨羧甲淀粉鈉中氯乙酸含量的增大而提高；氯乙酸含量相同的羧甲淀粉鈉供試品，其放置溫度越高，馬來酸氯苯那敏的降解速率越快。

表2 有關(guān)物質(zhì)含量測定結(jié)果（%）Tab.2 Results of content determination of related substances（%）

3 討論

3.1 羧甲淀粉鈉中氯乙酸的殘留原因

氯乙酸多在強(qiáng)堿條件和一定溫度下與淀粉反應(yīng)，生成羧甲淀粉鈉與氯化鈉，同時(shí)有少量氯乙酸與氫氧化鈉發(fā)生副反應(yīng)，生成乙醇酸鈉與氯化鈉。當(dāng)反應(yīng)不完全時(shí)可能殘留起始物料氯乙酸，反應(yīng)是否完全，一方面與堿液的體積分?jǐn)?shù)相關(guān)，另一方面也與反應(yīng)時(shí)間相關(guān)，通過工藝參數(shù)優(yōu)化控制，可減少氯乙酸的殘留。

3.2 氯乙酸對馬來酸氯苯那敏穩(wěn)定性的影響

由結(jié)果可見，馬來酸氯苯那敏本身對熱穩(wěn)定，但與羧甲淀粉鈉混合并按一定條件放置后，在相同放置條件下，隨著羧甲淀粉鈉中氯乙酸含量的增大，馬來酸氯苯那敏的降解速率加快；當(dāng)羧甲淀粉鈉中氯乙酸含量相當(dāng)時(shí)，放置溫度越高，馬來酸氯苯那敏的降解速率越快，即在氯乙酸存在的情況下，羧甲淀粉鈉中氯乙酸的量及兩者相容時(shí)的放置溫度均與馬來酸氯苯那敏的降解速率呈正相關(guān)。提示羧甲淀粉鈉中氯乙酸的殘留量影響馬來酸氯苯那敏的穩(wěn)定性。

3.3 氯乙酸影響馬來酸氯苯那敏穩(wěn)定性的原因

氯乙酸結(jié)構(gòu)中，由于氯原子的電負(fù)性較碳原子大，導(dǎo)致C-Cl鍵中碳原子帶部分正電荷，易被帶負(fù)電荷或未共享電子對等試劑進(jìn)攻發(fā)生親核反應(yīng)［10-11］，而馬來酸氯苯那敏為常用抗組胺類藥，其分子結(jié)構(gòu)中胺基基團(tuán)的2個(gè)N 正好可提供未共享電子對，作為親核試劑對氯乙酸中帶正電荷的碳原子進(jìn)攻，發(fā)生親核取代反應(yīng)，氯原子作為離去基團(tuán)。

3.4 小結(jié)

羧甲淀粉鈉中氯乙酸影響馬來酸氯苯那敏的穩(wěn)定性，根據(jù)其反應(yīng)機(jī)制推導(dǎo)，具有胺基基團(tuán)的原料藥由于存在未共用電子對，均存在與氯乙酸發(fā)生親核反應(yīng)的可能，且氯乙酸也可能影響其他帶負(fù)電荷或未共享電子對的原料藥，因此，該類原料藥物在選擇輔料時(shí)需關(guān)注輔料中殘留的氯乙酸對其穩(wěn)定性的影響。