沉默信息調節因子1在結腸腺癌組織中的表達及意義

張美蘭，金仁順，肖 斌，張 璇，張學武

(1.延邊大學附屬醫院病理科，吉林 延吉 133000;2.延邊大學醫學院，吉林 延吉 133000)

結腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，隨著生活水平的提高、飲食結構的改變，我國結腸癌的發病率呈逐年上升趨勢[1]。沉默信息調節因子1(SIRT1)是Sirtuins 家族成員之一，依賴于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的組蛋白去乙酰化酶，在體內使組蛋白及非組蛋白去乙酰化參與細胞凋亡和細胞衰老等正常生理過程，近年的研究表明，SIRT1與多種腫瘤的發生發展有關，在不同腫瘤的發生發展過程中起不同作用[2-5]。本文選擇結腸腺癌組織標本，采用免疫組化染色觀察SIRT1在結腸腺癌中的表達，探討其在結腸癌中的表達以及與臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2008年1月～2010年12月年確診為結腸腺癌的石蠟組織標本58例(包括癌旁組織)為研究對象。所有組織經10%中性甲醛溶液固定24～48 h后常規脫水、石蠟包埋，進行厚3 μm連續切片，做常規HE染色和免疫組化染色。58例患者中男35例，女23例，年齡37～82歲，平均66歲。所有病例根據性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤分化程度、浸潤深度、有無淋巴結轉移和遠處轉移以及TNM分期分兩組，TNM分期參照世界衛生組織(WHO)腫瘤分類及診斷標準[6]。本次研究經本院醫學倫理委員會同意。

1.2免疫組化染色結果判定標準：SIRT1定位于細胞核和細胞質，具體判斷標準如下：按陽性細胞在切片中所占比率，<10%計0分，11%～50% 計1分，>50%計2分；根據染色強度，未著色為0分，黃色為1分，棕褐色為2分。兩者相乘得出綜合評分，0分為陰性(-)，1分為弱陽性(+)，2～4分為強陽性(++)。

1.3統計學分析：所有數據采用統計學軟件SPSS22.0進行分析，計數資料以率(%)表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1SIRT1在結腸腺癌及癌旁組織中的表達：SIRT1在結腸腺癌和癌旁組織中陽性率分別為43.1%和6.9%，兩者比較差異有統計學意義(P<0.05)。在高分化腺癌中，SIRT1在胞質和胞核均有表達，但在低分化腺癌中SIRT1主要表達于細胞核，僅有1例胞質也有表達，另外發現細胞異型性越大，染色越強。在部分腺腔內分泌物中也觀察到SIRT1的表達。見圖1、圖2、表1。

圖1 SIRT1在高分化腺癌細胞質中表達(Envision，×400)

表1 SIRT1在結腸腺癌組織及癌旁組織中的表達[n(%),n=58]

2.2SIRT1在結腸癌組織中的表達與臨床病理特征的關系：SIRT1在結腸癌中的表達與患者年齡與腫瘤細胞的分化程度有關，與其他因素無關。見表2。

圖2 SIRT1在低分化腺癌細胞核中表達(Envision，×200)

表2 SIRT1在結腸癌組織中的表達與臨床病理特征的關系(n,n=58)

3 討論

結腸腺癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，其發生除了與遺傳因素有關外，還與眾多基因的改變和相互作用有關。SIRT1是依賴煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的組蛋白去乙酰化酶在腫瘤發生發展過程中發揮重要作用[7-8]。研究表明SIRT1在胰腺癌、宮頸癌、卵巢漿液性癌和肝癌等組織中的表達均高于癌旁正常組織，并與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移和TNM分期有關，其陽性率隨著病變加重而增高，患者預后較差[9-12]。本研究結果顯示SIRT1在結腸腺癌組織中表達明顯高于癌旁組織，同時在低分化癌中的表達高于高-中分化癌，并在有淋巴結轉移組和TNM分期越高其陽性率越高，與上述研究結果相似，提示SIRT1可能參與結腸癌的發展過程，與患者的預后不良有關。另外，在本研究還發現SIRT1在不同分化的結腸腺癌中其表達部位不同，即在低分化腺癌中在細胞核中表達，且細胞核異型性越大，染色強度越深，而在高分化腺癌中胞漿、胞核都均有表達，目前，SIRT1在細胞核和細胞質中表達意義尚不很明確。最初研究認為SIRT1是一種核蛋白，只在細胞核中存在，但之后研究發現SIRT1含有至少兩個核定位信號和兩個核輸出信號，認為SIRT1是一種核質穿梭蛋白[13-14]，可以定位于細胞核和(或)細胞質，有研究報道在肝癌組織中SIRT1在胞質中表達的患者比在細胞核中表達的患者預后良好，可以作為判斷預后的指標，結果提示SIRT1在結腸腺癌中表達部位與腫瘤的分化程度有關，認為SIRT1在核中表達可作為預測預后指標。SIRT1不僅參與腫瘤的發生，還是衰老相關的因子，隨著年齡的增長人體內的SIRT1表達水平會逐漸降低[15-17]。有研究表明，椎間盤退變程度越高，其髓核細胞內SIRT1的表達量越低[18]。本研究發現SIRT1在結腸腺癌中的表達與年齡有關，<60歲的年齡組中的表達高于>60歲，因此認為隨著年齡的增長SIRT1的表達可能會減少。

總之，SIRT1的陽性表達率和表達部位與結腸腺癌分化程度有關，即SIRT1陽性表達率越高，同時在結腸癌細胞核中的表達越高，其惡性程度越高，提示SIRT1在腫瘤中的高陽性率及細胞核中的高表達，可作為結腸腺癌患者的不良預后的預測指標。