桑黃的藥理作用研究進展

程玉鵬，李欣虹，劉思佳，肖寒，王語哲，高寧

（黑龍江中醫藥大學藥學院，黑龍江 哈爾濱 150040）

桑黃（Phellinus linteus）作為重要的藥用大型真菌，在我國具有悠久的應用歷史。其最早記載于《神農本草經》中，名為“桑耳”；至唐初《藥性論》中記為“桑黃”，主要用于“治女子崩中帶下，月閉血凝，產后血凝，男子痃癖，兼療伏血，下赤血”[1?2]。桑黃味甘、辛，性寒，歸肝、腎經，具有活血止血、滋陰補腎的功效[2]。現代研究發現，桑黃具有抗炎、抗氧化、降血糖、保護肝臟、抗腫瘤等功能特性[3]。由于桑黃及其近緣物種形態結構相似，不易鑒別，因此長期以來一直存在基源物種不清晰與拉丁學名使用混亂的問題，在實際應用過程中，也是多種來源混用[1?5]。雖然新近的分類學研究認為，“桑黃”應專指生長在桑屬活立木上的桑樹桑黃，并將其學名確定為Sanghuangporus lonicericola L.W.Zhou&Y.C.Dai[3]，但是由于長期的應用習慣，許多研究依然采用諸如Phellinus linteus、Phellinusbaumii、Inon‐otussanghuang等學名，各研究的菌種來源既包括桑樹桑黃，也包括與其近源的其他桑黃。隨著研究的深入，桑黃的諸多藥效受到人們的廣泛關注，本文系統總結了近年來桑黃藥理研究的最新進展，以期為桑黃的深入研究與開發提供參考。

1 抗氧化作用

研究表明，桑黃具有較好的抗氧化作用，桑黃提取物在體外總抗氧化能力檢測實驗中表現出極強的氧自由基清除活性，且與濃度呈劑量依賴性[6?7]。Huang等[8]以ARPE?19細胞為研究對象探討了桑黃有效成分Hispidin的抗氧化作用。結果表明Hispidin可以顯著緩解H2O2引起的細胞死亡，降低細胞內ROS水平，并以劑 量依 賴 的方 式顯著 增強Nrf2、HO?1、NQO?1、GCLM和GCLC的表達。據此推斷，Hispidin能夠通過Nrf2信號通路對H2O2誘導的細胞氧化應激起到保護作用。此外，基于心肌細胞H9c2的研究同樣發現，Hispidin能夠顯著清除細胞內活性氧（ROS）、提高H9c2細胞中HO?1和CAT等抗氧化酶的表達，同時激活Akt/GSK?3β和ERK1/2磷酸化。此外，通過抑制劑抑制Akt/GSK?3β和ERK1/2途徑可顯著逆轉組氨酸誘導的Bax和Bcl?2表達、細胞凋亡誘導和ROS產生。這些結果表明，Hispidin通過減少細胞內ROS的產生，調節凋亡相關蛋白，激活Akt/GSK?3β和ERK1/2信號通路，保護H2O2暴露的H9c2心肌細胞免受凋亡的影響[8]。體內實驗結果也證實，桑黃抗氧化能力對多種疾病的治療具有輔助作用。李森等[9]發現桑黃提取物可顯著降低細顆粒物（PM2.5）暴露引起的SD大鼠血清胱抑素C（Cys?C）、尿液β2?微球蛋白（β2?MG）和丙二醛（MDA）水平升高，同時升高總谷胱甘肽（T?GSH）水平。表明桑黃可通過發揮其抗氧化能力對PM2.5暴露所致的腎損傷產生保護作用。

2 抗炎作用

研究發現桑黃及其有效成分具有較好的抗炎作用。Zhang等[10]與Huang等[11]的研究均表明桑黃提取物可減少脂多糖（LPS）誘導的肺組織中促炎介質NO、TNF?α、ⅠL?6的產生，從而起到治療炎癥的作用。Yang[12]等研究證實，作為桑黃主要成分之一的Hispolon可顯著抑制脂多糖（LPS）、脂磷壁酸（LTA）和肽聚糖（PGN）誘導的iN‐OS/NO的產生和凋亡，并在蛋白和mRNA水平上升高HO?1，同時顯著抑制LPS、LTA和PGN激活的c?Jun蛋白和AP?1轉錄活性，降低巨噬細胞核p65蛋白和NF?κB轉錄活性。據此推測，Hispolon通過抑制c?Jun/AP?1和p65/NF?κB參與了LPS、LTA和PGN誘導的iNOS/NO生成和凋亡的抗炎作用。桑黃的另一主要有效成分桑黃多糖亦有較好的抗炎效果。多項研究均顯示，桑黃多糖能夠降低細胞或組織中ⅠL?6、ⅠL?1β、TNF?α等炎癥介質，從而對多種炎癥性疾病起到預防及治療效果[13?15]。此外，Zuo等[16]利用桑黃的菌絲體進行深層發酵并分離得到一種新型的細胞外多糖肽（SePSP）。體外研究顯示SePSP具有較強的抗氧化活性；體內研究則表明，SePSP可有效緩解右旋糖酐硫酸鈉（DSS）誘導的小鼠潰瘍性結腸炎（UC），顯著降低促炎因子TNF?α和ⅠL?1β的mRNA水平，上調結腸中抗炎因子ⅠL?10的mRNA水平，降低UC小鼠血液中MDA濃度。以上結果表明，SePSP可能是通過調節炎癥細胞因子的表達和抑制氧化應激作用從而可用于治療潰瘍性結腸炎。

3 降血糖作用

隨著人們生活水平的提高及不健康的生活飲食習慣，糖尿病的發病率逐年上升，尋找健康有效的降糖藥物一直受到廣泛關注。Feng等[17]通過高脂肪高果糖飲食誘導小鼠出現典型的高血糖癥和胰島素抵抗，來研究桑黃多糖的降血糖作用。結果發現，桑黃多糖可顯著降低小鼠空腹血糖水平，改善糖耐量；恢復模型組降低的磷脂酰膽堿（PC）與磷脂酰乙醇胺（PE）的比例以及S?腺苷甲硫氨酸與S?腺苷高半胱氨酸的比例；刺激腸道細菌中卟啉單胞菌的增殖，并上調模型組血漿中的VB12水平。綜上可知，桑黃多糖可通過挽救PC/PE比值和激活胰島素信號轉導來改善胰島素抵抗，這可能與改變腸道微生物依賴的VB12合成和肝臟單碳代謝有關。史得君等[18]研究發現桑黃多糖可提高1型糖尿病小鼠體質量，改善糖尿病組小鼠葡萄糖耐量（OGTT）和肝臟、腎臟的臟器指數。Lee等[19]研究了Hispidin對棕櫚酸誘導的C2C12肌管細胞胰島素抵抗的影響。結果發現，Hispidin能夠逆轉棕櫚酸鹽誘導的葡萄糖攝取抑制，抑制細胞內脂質積累以及胰島素受體底物?1 Ser307的磷酸化，同時Hispidin能夠通過抑制蛋白激酶C進而促進磷脂酰肌醇?3激酶和Akt的激活。此外，Hispidin還能夠通過激活AMPK信號途徑從而增加C2C12的葡萄糖攝取。綜上表明，Hispidin可能對糖尿病患者有益。Yang等[20]以鏈尿佐菌素誘導形成2型糖尿病小鼠為模型，研究了桑黃總酚類成分的降血糖作用。結果發現，桑黃總酚可降低糖尿病模型小鼠血漿TG、LDL?C和HDL?C；改善模型小鼠空腹血糖與糖耐量水平；促進糖尿病模型小鼠肝臟ⅠRS?1的磷酸化，增加PⅠ3K mRNA的表達。以上結果說明，桑黃總酚能夠有效改善模型小鼠糖代謝異常，其機制可能是激活ⅠRS?1/PⅠ3K/AKT途徑實現的。Liu等[21]研究表明桑黃菌絲體固態提取物通過抑制參與糖原降解和糖原生成的關鍵肝酶的mRNA表達來降低糖尿病大鼠模型的血糖水平；還通過促進肝臟中關鍵β‐氧化酶和LDLR的表達，抑制HMGCR的表達，改善糖尿病相關的肝、腎損傷，維持脂質和脂蛋白譜的動態平衡。此外，Liu等還通過構建2型糖尿病大鼠模型，研究了桑黃多糖提取物對腸道微生物群的調節作用及其改善胰島素抵抗的分子機制。結果表明，桑黃多糖能夠通過增加產生短鏈脂肪酸的細菌的數量來增加短鏈脂肪酸（SCFA）的水平。且SCFA可通過維持腸道屏障功能，降低血液中脂多糖含量，從而有助于減輕全身炎癥和逆轉胰島素抵抗[22]。

4 保肝護肝作用

Dong等[23]研究了桑黃對乙醇性肝損傷小鼠肝臟保護作用，發現桑黃水煎液能顯著降低血清丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、三酰甘油和總膽汁酸水平，改善肝臟脂肪變性和炎癥反應。基于UPLC?ESⅠ?Q/TOF?MS的血清代謝組學分析顯示，法尼醇X受體（FXR）是桑黃水煎液的主要潛在靶點，桑黃水煎液可通過抑制肝臟FXR mRNA表達和激活小鼠腸道FXR mRNA表達而改善慢性酒精攝入，從而對乙醇性肝損傷起到治療作用。Huang等[24]通過肝組織顯微觀察，探討了桑黃菌絲提取物緩解二甲基亞硝胺（DMN）誘導的大鼠肝纖維化作用。結果表明，桑黃菌絲體提取物可以有效減輕DMN刺激引起的肝細胞損傷，緩解肝組織纖維化和膠原積累，展現出較好的肝保護作用。Chen等[25]利用對乙酰氨基酚（APAP）誘導的小鼠肝損傷模型評估了桑黃多糖的肝保護作用。結果表明，桑黃多糖能夠抑制模型小鼠肝臟細胞色素P450（CYP2E1）的表達，抑制肝細胞因子ⅠL?6、ⅠL?10、ⅠL?1β和TNF?α的釋放，從而提高Ⅱ期酶UGTs和SULTs的水平，顯著改善模型小鼠的急性肝損傷，顯示出較好的肝保護作用。Jiang等[26]的研究表明，桑黃能夠降低血清轉氨酶活性，抑制肝臟組織脂質過氧化，降低肝組織中促炎細胞因子水平，改善肝組織病理變化，保護小鼠免受對乙酰氨基酚毒性。深入分析其保護機制時發現，桑黃通過抑制促炎介質iNOS和COX?2的蛋白表達；抑制MAPK、TLR4、PⅠ3K/Akt和NF?κB表達，激活Keap1/Nrf2/HO?1通路；抑制LKB1、Ca2+/CaMKKβ和AMPK蛋白表達的磷酸化，從而表現出對撲熱息痛誘導肝細胞毒性的治療作用。此外，Yang等[27]的研究發現，桑黃的乙醇提取物對于化學毒物誘導的肝癌具有一定的預防作用。

5 抗腫瘤作用

桑黃的抗腫瘤作用一直是人們關注的焦點，眾多研究均表明桑黃對于肝癌、胰腺癌、結腸癌等多種類型的癌癥均具有顯著療效[28]。研究發現，桑黃已被報道對各種類型的癌細胞均具有顯著療效。武曉林等[29]利用H22荷瘤小鼠對6種“桑黃”類真菌的水提取物進行了抗腫瘤活性研究。結果表明，除鮑姆木孔菌（Phelli‐nus baumiiPilát Bull.）水提取物低劑量組外，粗毛纖孔菌（Inonotus hispidusBull.：Fr.P.Karst.）、橢圓嗜藍孢孔菌（Fomitipori aellipsoideaB.K.Cui&Y.C.Dai）、山野木層孔菌（Phellinus yamanoiTamz.Shaw.）的水提取物高、低劑量組以及火木層孔菌（Phellinus igniariusL.：Fr.Quél.）、鮑 姆 木 孔菌（Phellinus baumiiPilát,Bull.）、瓦尼木層孔菌（Phellinus vaniniiLjub.）的水提取物高劑量組均具有顯著抑瘤作用，且抑瘤率均大于40%；同時，6種“桑黃”類真菌水提取物均能夠提高小鼠腫瘤細胞中Bax的表達并抑制Bcl?2的表達。汪雯翰等[30]研究發現桑黃子實體醇提物可降低結腸癌細胞SW620在G0/G1和G2/M期的細胞數量，引起SW620細胞凋亡，并誘導SW620細胞釋放ROS。結果提示桑黃子實體醇提物的促腫瘤細胞凋亡可能與ROS釋放相關。同時發現，桑黃子實體醇提物對于中國倉鼠卵巢細胞CHO和小鼠骨髓巨噬細胞的增殖無顯著抑制作用。Wang等[31]研究發現桑黃總乙醇提取物（TPⅠ）對胃癌細胞SGC?7901有較強的細胞毒性，并在體內可強烈抑制異種移植裸鼠的腫瘤生長，有顯著的抗腫瘤作用。深入研究發現，TPⅠ可能是通過下調Bcl?2、促進Bax蛋白表達、激活Caspase?9、Caspase?3并切割PARP，降低SGC?7901細胞線粒體膜電位，激活線粒體依賴的固有凋亡通路，從而表現出較強的抗腫瘤作用。此外，Zhong等[32]研究發現桑黃的主要酚類成分原兒茶醛（PCA）顯著降低對黑色素瘤細胞B16?F10活力，誘導細胞周期阻滯在G0/G1期，促進B16?F10凋亡；顯著增加了B16?F10中p21 mRNA的表達水平，并下調細胞周期蛋白D的表達，這表明PCA通過調節p21/cylin D/cdK4/6途徑抑制了B16?F10的增殖并阻止進入S期。綜上所述，PCA可以作為治療黑色素瘤細胞的抗腫瘤藥物，這可能為開發治療黑色素瘤的新療法提供實驗支持。Jeong等[33]發現經桑黃預處理可顯著增強體外人肝癌細胞Hep3B、HepG2的放射敏感性，并且桑黃+放射治療的組合顯著降低了體內異種移植物腫瘤的生長和大小。深入研究其機制發現桑黃通過誘導凋亡、破壞細胞周期調節、減少輻射誘導的DNA損傷修復來抑制腫瘤細胞存活，從而顯著提高放療效率。Al Saqr等[34]研究發現從桑黃中分離得到的小分子量多酚His‐polon可以通過增加ROS、亞硝酸鹽和脂質過氧化物含量顯著誘導氧化應激；抑制Bcl?2的表達，促進Bax和Caspases活性的表達；抑制線粒體ComplexⅠ和Ⅳ活性，從而實現抗黑色素瘤的作用。Masood等[35]對Hispolon在前列腺癌DU145中發揮抗癌作用的機制進行了研究。結果表明，Hispolon通過下調細胞周期蛋白B1、細胞周期蛋白D1和CDK4，上調p21來停止DU145細胞的增殖，并在S期停止細胞周期。深入研究其抗癌機制發現，Hispolon誘導的Bcl?2家族蛋白調節導致基質金屬蛋白酶（MMP）的丟失，使細胞色素C從線粒體孔蛋白通道中釋放出來，從而觸發Caspases的級聯反應，最終導致細胞死亡。Arcella等[36]還發現Hispolon可抑制膠質母細胞瘤U87MG細胞活力，誘導G2/M細胞周期阻滯和凋亡，起到抗腫瘤作用。Hong等[37]探討了Hispolon對上皮?間充質轉化（EMT）的影響。結果表明，Hispolon上調了TGF?β刺激后引起的E?cad‐herin表達水平的降低，同時，下調Snail和Twist，TGF?β的表達水平，從而達到抑制EMT癌細胞遷移和侵襲的作用。而Sun等[38]發現Hispolon通過減少MMP?9的分泌和表達，通過NF?κB信號通路抑制TPA誘導的MDA?MB?231細胞的遷移和侵襲。Chao等[39]發現從桑黃中分離出的3，4?二羥基苯甲醛內酯（DBL）對肺癌細胞A549遷移和侵襲有較強的抑制作用。深入研究其機制發現DBL可抑制基質金屬蛋白酶MMP?2和MMP?9的酶活性、蛋白表達和RNA水平；降低磷酸肌醇3?激 酶（PⅠ3K）/AKT、絲 裂 原 活 化 蛋 白 激 酶（MAPKs）和局部黏著斑激酶（FAK）/paxillin的磷酸化狀態；還影響上皮到間質轉化相關的生物標志物。此外，DBL還提高了HO?1、CAT、GPx和SOD等抗氧化酶的活性，影響A549的NFκB、Nrf2、Snail和Slug的核轉位。據此推測DBL可能通過影響PⅠ3K/AKT、MAPKs、FAK/paxillin、EMT/Snail和Slug、Nrf2/抗氧化酶和NFκB信號通路來抑制MMP?2和MMP?9，從而抑制肺癌轉移。He等[40]研究發現桑黃提取物能夠通過阻斷細胞周期、引起細胞凋亡從而抑制人宮頸癌細胞SiHa的體內外增殖。其作用機制可能是通過誘導內質網應激，使GRP78和CHOP的表達升高，并釋放Ca2+；細胞內Ca2+超載和氧化應激使線粒體膜電位崩潰，隨后激活Caspase?3和Caspase?9，最終導致細胞凋亡。

6 其他作用

除上述藥理作用外，多項研究均表明桑黃具有較好的免疫調節作用。Yoo等[41]的研究表明桑黃能夠緩解環磷酰胺引起的免疫抑制，增強模型動物血清與脾臟中NF?κB、ⅠFN?γ、TNF?α、ⅠL?1β、ⅠL?6和ⅠL?12等細胞因子表達，改善胸腺與脾臟損傷、抑制淋巴細胞增殖，展現免疫增強作用。Gao等[42]也證實桑黃中多糖類成分對環磷酰胺引起的免疫抑制同樣有效。Ma等[43]從桑黃中分離得到2組多糖，并證實其能夠增強正常小鼠免疫應答，有望開發成為健康輔助食品。此外，桑黃在免疫調節、調節心血管系統、抑制肺纖維化、骨保護等方面也均展現出較好效果[44?49]。具體見表1。

表1 桑黃的其他藥理作用Table 1 Other pharmacological effects of Sanghuang porus

7 展望

綜上所述，桑黃作為重要的藥用大型真菌類群之一，對多種疾病展現出良好的治療效果，藥理作用功能豐富。深入研究并揭示桑黃藥理作用機制對于桑黃的開發與應用具有重要意義。目前對于桑黃藥效機制的研究仍處于起步階段，多數研究僅觀察了藥效指標，對于深層的分子機理較少涉及。例如，桑黃在臨床應用中展現了較好的免疫調節作用，然而對于其機制研究則主要集中在桑黃對免疫因子表達的影響，對于桑黃的作用靶點及調節通路則鮮有報道，需要研究者進行深入探討；此外，由于歷史原因，桑黃的來源一直是各物種混用，各來源的桑黃是否藥效一致，安全性是否相同，臨床應用是否需要有所區別等，尚無統一標準，這也是制約桑黃進一步應用的重要問題。以上問題應當作為桑黃研究的重點關注方向，以期為開發桑黃這一重要的藥用真菌資源奠定基礎。