人參超微粉片制劑工藝研究

滕亞然，黃仁嵩，李珺銘，李 慧，焦麗麗，吳 巍

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)/吉林省人參科學(xué)研究院，吉林 長(zhǎng)春 130117)

人參PanaxginsengC.A.Mey.為五加科植物的干燥根和根莖，為多年生草本植物，對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)具有興奮和抑制的雙重影響，并有緩解疲勞、抵抗老年性癡呆、增強(qiáng)記憶力以及控制血壓、保護(hù)心臟等功能[1-3]。中藥粉末飲片因其服用便捷、藥材活性成分有效利用度高等特點(diǎn)已在臨床中被廣泛應(yīng)用。中藥粉末飲片按顆粒大小可分為中藥普通級(jí)粉體、中藥微米級(jí)粉體和中藥納米級(jí)粉體[4]。中藥超微粉碎技術(shù)是一項(xiàng)新技術(shù)，運(yùn)用機(jī)械力、流體動(dòng)力學(xué)等現(xiàn)代粉體工藝技術(shù)加工處理固體物料[5]。與普通中藥材粉末相比，超微粉中藥在細(xì)度上使中藥飲片的中心粒徑提高到300目(<48 μm)以上[6]。超微粉碎是在細(xì)胞層面進(jìn)行粉碎，故又稱細(xì)胞破壁技術(shù)，該技術(shù)使得中藥超微粉粒徑減小[7]，中藥有效成分體外溶出度增加，藥效增強(qiáng)[8]，還可以改變中藥毒性[9]。有研究表明，人參經(jīng)過(guò)超微粉碎后，與普通細(xì)粉相比提取得到多糖的含量明顯增加[10]，有效成分體外溶出量和速度都更高[11]，體內(nèi)生物利用度增加，藥效活性更強(qiáng)[12]。因此人參超微粉具有較高的藥用價(jià)值，將其制成便于服用和攜帶的片劑有助于更好地開發(fā)與利用人參超微粉，人參超微粉片是以人參超微粉為主藥，調(diào)配適宜的填充劑、崩解劑、潤(rùn)濕劑，制備品質(zhì)更優(yōu)良的人參處方制劑。

1 儀器與試劑

DP30A單沖壓片機(jī)(北京新龍立科技有限公司)，YD-1片劑硬度測(cè)試儀(天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司)，LB-2D崩解時(shí)限測(cè)定儀(上海黃海藥檢儀器有限公司)，KQ500DA數(shù)控超生清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，MTN-2800D氮吹濃縮裝置(天津奧特塞斯儀器有限公司)，Infinite M200 PRO酶標(biāo)儀(瑞士TECAN公司)。

檸檬酸(分析純，天津新通精細(xì)化工有限公司，批號(hào)：20170512)；乙醇(分析純，天津新通精細(xì)化工有限公司，批號(hào)：20180410)；蒸餾水(分析純，長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)室制備)；微晶纖維素(藥用級(jí)，杭州普修生物科技有限公司，批號(hào)：20170621)；玉米淀粉(食品級(jí)，吉林中糧生化能源銷售有限公司，批號(hào)：20190201)；可溶性淀粉(分析純，汕頭市西隴化工廠有限公司，批號(hào)：20170425)；人參(吉林省撫松縣人參市場(chǎng))；麥芽糊精(生物試劑，北京太陽(yáng)生物科技有限公司，批號(hào)：20170511)；乳糖(分析純，西隴化工股份有限公司批號(hào)：20181114)；硬脂酸鎂(分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，批號(hào)：20171025)；人參皂苷Re對(duì)照品(上海寶曼生物科技有限公司，批號(hào)：52286-59-6)；甲醇(分析純，北京化工廠，批號(hào)：20190111)；冰醋酸(分析純，北京北化精細(xì)化學(xué)有限責(zé)任公司，批號(hào)：20170502)；香草醛(分析純，天津市運(yùn)盛化學(xué)試劑科技有限公司，批號(hào)：CD180016)；高氯酸(分析純，北京化工廠，批號(hào)：20161012)。

2 方法與結(jié)果

2.1 超微粉制備

選擇成熟度一致，無(wú)變質(zhì)，且含水量在10%～11%的生曬人參(人參選自吉林省撫松縣人參市場(chǎng))，普通粉碎原料，過(guò)80～100目篩，并烘干至含水量低于10%。超微粉碎4～8 h，用篩網(wǎng)將物料與磨球分離，過(guò)100～200目篩，得人參超微粉裝袋保存。

2.2 制劑規(guī)格確定

市售普通片劑重量在0.35 g/片左右，而市售超微粉制劑均為散劑。根據(jù)2020版《中國(guó)藥典》規(guī)定每日服用人參含量為3～9 g，另煎兌服；也可研粉吞服，每次2 g，每日2次。故擬定所制得片劑服用劑量為每日3次，每次人參含量1.5 g。根據(jù)片劑的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)確定處方，查閱文獻(xiàn)可知制劑中人參含藥量較少，若按市售普通片劑制備，且要滿足服用含量服用片數(shù)會(huì)增加。從服用者角度以及生產(chǎn)角度來(lái)看應(yīng)適當(dāng)提高片重，增加片重不僅可降低服用片數(shù)，生產(chǎn)過(guò)程中片重越大，可操控性越好，含量分布均勻，片重過(guò)小時(shí)，含量分布不易均勻，故綜合考慮生產(chǎn)可行性以及成本問(wèn)題將本品確定為0.75 g/片。

2.3 粉末直接壓片制備工藝

將主藥與輔料混合均勻直接壓片。對(duì)于人參超微粉這種不具有直接壓片物料性質(zhì)的藥物，可通過(guò)加入輔料改善其流動(dòng)性和可壓性而采用粉末直接壓片法制片。根據(jù)微晶纖維素與麥芽糊精不同比例壓片并以壓片的硬度及崩解時(shí)限作為片劑的質(zhì)量評(píng)測(cè)指標(biāo)，研究粉末直接壓片的最優(yōu)處方。

2.4 濕法制粒壓片處方及制備工藝

2.4.1 處方 處方組成為人參超微粉247 g，微晶纖維素71 g，玉米淀粉36 g，麥芽糊精71 g，檸檬酸6 g，硬脂酸鎂1%，65%乙醇適量，共制成人參超微粉片400片。

2.4.2 制備方法 將人參超微粉置于一定量的容器中，加入填充劑、崩解劑、甜味劑等輔料，使其充分混合均勻。少量多次的添加潤(rùn)濕劑在混合物料中，保證潤(rùn)濕劑與物料充分混合均勻。軟材要求以“手握成團(tuán)，輕壓即散”為適宜，然后再通過(guò)20目篩整粒。將所得顆粒放入40～60 ℃的恒溫干燥箱中，干燥時(shí)應(yīng)定期翻動(dòng)，不可堆積太厚。取出干燥好的顆粒，選取能通過(guò)20目篩但不能通過(guò)60目篩的顆粒備用，稱量準(zhǔn)備壓片。加入適量的潤(rùn)滑劑與可用顆?；旌?，混合均勻后壓片，即得人參超微粉片，規(guī)格為0.44 g，片重為0.75 g。

2.5 人參超微粉片理化性質(zhì)及評(píng)價(jià)指標(biāo)

2.5.1 外觀 黃白色片劑，色澤均勻，表面光滑完好，組織狀態(tài)均勻。

2.5.2 硬度 將片劑置于片劑硬度測(cè)試儀的兩個(gè)壓板之間，并在壓力方向上緩慢壓制。當(dāng)片劑剛剛破裂時(shí)，記錄機(jī)器上顯示的壓力值，即片劑的硬度。根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)硬度應(yīng)不小于39.2 N。

2.5.3 崩解時(shí)限 采用崩解儀進(jìn)行檢查，檢查片劑全部崩解溶散或成散粒并通過(guò)篩網(wǎng)所需的時(shí)間限度。各片均應(yīng)在15 min內(nèi)全部崩解。如有1片不能完全崩解，應(yīng)另取6片復(fù)試，均應(yīng)符合2020版《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定。

2.6 填充劑的考察

以片劑的外觀、硬度及崩解時(shí)間作為片劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別探究微晶纖維素、麥芽糊精、乳糖、可溶性淀粉、麥芽糊精不同填充劑對(duì)片劑質(zhì)量的影響。

粉末直接壓片制備工藝結(jié)果見表1、表2，以微晶纖維素為填充劑的片劑表面光滑且均勻，但由于微晶纖維素有崩解劑的性質(zhì)，所以其崩解時(shí)限與其它處方制得片劑相比要更快。以麥芽糊精為填充劑的片劑表面光滑且均勻但若含量稍多時(shí)片劑表面會(huì)有黏稠感，崩解時(shí)限時(shí)間較長(zhǎng)。以微晶纖維素與麥芽糊精混合作為填充劑的片劑表面光滑且均勻，硬度及崩解時(shí)限適中。故選擇人參超微粉、微晶纖維素與麥芽糊精按1∶0.6∶2.4的比例壓片所得片劑硬度及崩解時(shí)限均符合藥典規(guī)定且相比其他處方更適宜。

表1 不同填充劑對(duì)片劑硬度及表面情況的影響

表2 不同填充劑對(duì)片劑崩解時(shí)限的影響

濕法制粒壓片處方制備工藝結(jié)果見表3，加入可溶性淀粉制粒的片劑表面光滑且均勻，片劑成型但硬度不夠較易碎片，崩解時(shí)限適中；加入麥芽糊精制粒的片劑表面光滑且均勻，片劑成型硬度較好，崩解時(shí)限相比處方一及處方三較長(zhǎng)；加入乳糖制粒的片劑表面較光滑且均勻，片劑成型但硬度不夠易碎片。綜合考慮，故選擇麥芽糊精為填充劑，更符合藥典的相關(guān)規(guī)定。

表3 不同填充劑對(duì)片劑的影響

2.7 崩解劑考察

針對(duì)濕法制粒壓片處方制備工藝，確定填充劑后，改變微晶纖維素含量，將制得片劑的硬度及崩解時(shí)間視為片劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別探究不同含量的微晶纖維素對(duì)片劑質(zhì)量的影響，結(jié)果見表4，微晶纖維素具有較強(qiáng)的結(jié)合力與良好的可壓性，查閱文獻(xiàn)知片劑中含20%以上的微晶纖維素時(shí)崩解時(shí)限較好，但由表4可知，20%含量的微晶纖維素會(huì)使片劑的硬度下降，因此選擇16.3%含量的微晶纖維素作為崩解劑。

表4 不同含量崩解劑對(duì)片劑的影響

2.8 潤(rùn)濕劑考察

針對(duì)濕法制粒壓片處方制備工藝，改變潤(rùn)濕劑乙醇的濃度，以“手握成團(tuán)，輕壓即散”為軟材評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，分別考察不同濃度的乙醇對(duì)制得軟材的影響，結(jié)果見表5。低濃度的乙醇制得軟材不易散，高濃度的乙醇制得軟材不易成顆粒，因此選擇適中的濃度為65%乙醇作為潤(rùn)濕劑。

表5 不同濃度乙醇對(duì)軟材情況的影響

由于人參超微粉具有較強(qiáng)的黏性和吸濕性，因此需要一定量的乙醇來(lái)潤(rùn)濕，乙醇濃度越大，潤(rùn)濕后所產(chǎn)生的黏性越低。由此可以確定濕法制粒壓片處方：人參超微粉58.14%，微晶纖維素16.28%，麥芽糊精25.58%，硬脂酸鎂1%，65%乙醇適量。

2.9 人參超微粉片中人參總皂苷含量測(cè)定

2.9.1 紫外分光光度法 量取適量溶液于15 mL具塞刻度試管中，氮?dú)獯蹈?。加入新鮮配制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL，搖勻后加入高氯酸0.8 mL，60 ℃水浴加熱10 min，立即轉(zhuǎn)入冰水浴冷卻10 min，取出加入冰醋酸5 mL終止反應(yīng)。隨行試劑空白對(duì)照，于560 nm處測(cè)得吸光度值。

2.9.2 溶液配制 對(duì)照品溶液配制：精密稱取Re對(duì)照品10 mg，置5 mL容量瓶中，超聲溶解，甲醇定容至刻度，搖勻，制成2.0 mg·mL-1的對(duì)照品儲(chǔ)備液。供試品溶液配制：精密稱取供試品人參超微粉片粉末500 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻超聲30 min，使皂苷全部溶解，搖勻后過(guò)0.45 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液，精密吸取1 mL續(xù)濾液至10 mL容量瓶中，制成2.0 mg·mL-1的供試品儲(chǔ)備液。

2.9.3 方法學(xué)考察 線性關(guān)系考察：分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液40μL、60μL、70μL、80μL、90μL、100 μL，按照“2.9.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：Y=0.021 5X-0.002 2，R2=0.999 0，結(jié)果表明，人參皂苷Re在12.27～30.67 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液40 μL、80 μL、100 μL，按照“2.9.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算各濃度溶液的RSD分別為1.04%、1.07%、1.04%，結(jié)果表明，本方法精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一份供試品儲(chǔ)備液160 μL，分別在0 min、5 min、10 min、30 min、60 min時(shí)間下，按照“2.9.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得RSD為1.09%，結(jié)果表明本方法在60 min內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液160 μL，按照“2.9.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，以上操作重復(fù)5次，測(cè)得RSD為1.04%，結(jié)果表明本方法重復(fù)性良好。

加樣回收率試驗(yàn)：精密量取供試品0.2 mg，置10 mL容量瓶中，加入對(duì)照品0.2 mg，按照供試品溶液制備方法制備溶液后，按照“2.9.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算得平均回收率為99.53%，RSD值為1.7%，結(jié)果表明，本方法回收率良好。

樣品含量測(cè)定：稱取3批次樣品，按照“2.9.2”項(xiàng)下下制備供試品溶液，按照“2.9.1”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算粉末直壓法制得片劑總皂苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.695 mg·g-1。計(jì)算濕法制粒制得片劑總皂苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9.416 mg·g-1。

3 結(jié)果

粉末直接壓片最佳制備工藝為：微晶纖維素與麥芽糊精按1∶0.6∶2.4的比例壓片，所得片劑硬度為65.7 N，崩解時(shí)限為12.25 min，總皂苷含量為4.695 mg·g-1。濕法制粒壓片最佳制備工藝為：人參超微粉58.14%，微晶纖維素16.28%，麥芽糊精25.58%，硬脂酸鎂1%，65%乙醇適量。硬度為60.7 N，崩解時(shí)限為12.23 min，總皂苷含量為9.416 mg·g-1。所得片劑呈黃白色，色澤均勻，表面光滑完好，制劑狀態(tài)均勻。

4 結(jié)論

本研究將人參原料進(jìn)行超微粉化處理，根據(jù)片劑的制備方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，從處方優(yōu)化到制備成型進(jìn)行嚴(yán)格考察，充分利用實(shí)驗(yàn)室的有利條件，考察不同比例的填充劑、崩解劑、潤(rùn)濕劑以確定最終優(yōu)化方案。研究與開發(fā)人參超微粉體，增強(qiáng)了人參的藥用價(jià)值，人參超微粉片適用人群范圍廣，且與其他劑型對(duì)比，片劑具有良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性，機(jī)械化生產(chǎn)效率高、成本低，制劑穩(wěn)定且貯存有效期長(zhǎng)，服用攜帶方便，還可通過(guò)選擇不同類型的固體劑型調(diào)節(jié)藥物的釋放速度，為今后進(jìn)一步研制人參超微粉制劑提供參考。