江西省撫州地區2016年至2020年活禽市場禽流感監測分析

唐榮，黃凡卿，武星紅，朱智龍

（江西省撫州市疾病預防控制中心，江西 撫州 344000）

禽流感是由A型流感病毒引起的傳染性疾病綜合癥。按病原體類型，禽流感可分為高致病性、低致病性和非致病性三大類。高致病性禽流感具有病情危重、病死率高的特點[1-2]。1997年香港發現H5N1具有感染人的能力后，禽流感在世界各地相繼爆發。2013年3月上海出現首例人感染H7N9禽流感病例，隨后數月從華東地區擴散到全國多個省份。近十年中國持續發生人感染禽流感病例及家庭聚集性疫情[3-6]，且病毒型別多樣。目前引起人禽流感的主要病原有H5N1、H7N9、H9N2及H10N8等亞型[7-9]，流行病學調查表明多數病例有家禽接觸或活禽市場交易史[9-10]。活禽市場是人禽流感發生的重要場所[11]，禽流感監測對疫情早期預警和防控起重要作用[12]。本文分析撫州地區2016年至2020年活禽市場禽流感病毒的動態分布，為預防和控制人禽流感提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源 根據《江西省活禽經營市場人感染禽流感監測方案（2015版）》要求選取中心城區共8處，其余11個縣區每縣區各1～2處活禽市場作為監測點。標本采集情況為：崇仁縣2016年至2020年作為省級監測點連續5年每個季度采集30份標本。2017年第一季度采集中心城區標本65份，各縣區標本165份，崇仁縣第四季度加采30份，2018年至2020年中心城區第一季度共采集200份。標本類型分為籠具表面擦拭、糞便、禽類飲水、宰殺或擺放禽肉案板表面擦拭和其他（清洗禽類的污水和脫毛機等）5類。2018年開始增加禽種類的分類，標本為雞、鴨和鴿子。所有標本采集運送參照監測方案要求執行。

1.2 儀器與試劑 江蘇碩世生物科技有限公司全自動核酸提取儀SSNP-2000A(32通量)及FluA、H5、H7、H9和H10核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）、Bio-Rad公司CFX-96熒光PCR儀。

1.3 實驗方法 撫州市疾病預防控制中心對標本進行FluA檢測，FluA陽性標本進一步檢測H5、H7、H9和H10亞型。病毒核酸提取在生物安全Ⅱ級（BSL-2級）實驗室進行，RT-PCR進行核酸檢測。PCR結束后檢測Ct≤35且曲線呈S型判為陽性，Ct＞38或者未檢出判為陰性。H5、H7、H9和H10均為陰性而FluA陽性標本判斷為A未分型。H5+H9、H7+H9和H5+H7+H9為核酸陽性的混合型。

1.4 統計分析 Excel 2013和SPSS 23.0軟件進行整理數據和統計分析，組間率的比較采用卡方檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 活禽市場禽流感監測總體情況 不同年份陽性率差異有統計學意義（χ2=9.67，P＜0.05）。見表1。

表1 2016年至2020年撫州地區不同年份活禽市場禽流感監測情況

2.2 不同季度活禽市場禽流感監測 不同季度陽性率差異有統計學意義(χ2=81.20，P＜0.05)。見表2。

表2 2016年至2020年撫州地區不同季度活禽市場禽流感監測情況

2.3 不同標本類型活禽市場禽流感監測 不同類型標本陽性率差異無統計學意義(χ2=3.70，P＞0.05)。見表3。

表3 2016年至2020年撫州地區不同標本類型活禽市場禽流感監測情況

2.4 不同禽種類活禽市場禽流感監測 雞、鴨和鴿子的陽性率依次為77.82%、70.18%和50.00%，不同禽種類標本陽性率差異有統計學意義(χ2=25.21，P＜0.05)。見表4。

表4 2018年至2020年撫州地區不同禽種類活禽市場禽流感監測情況

2.5 不同監測點活禽市場禽流感監測 中心城區和其他縣區標本陽性率差異有統計學意義(χ2=8.05，P＜0.05)。中心城區大公路陽性率為95.00%，剪子口為69.70%，不同監測點陽性率差異無統計學意義(χ2=11.93，P＞0.05)。東鄉區和廣昌縣FluA陽性率均為80.00%，南城縣為33.33%，其他縣區不同監測點陽性率差異有統計學意義(χ2=19.90，P＜0.05)，見表5。

表5 2016年至2020年撫州地區不同監測點活禽市場禽流感監測情況

3 討論

本監測結果顯示2016年至2020年撫州地區活禽市場FluA總陽性率為70.47%，連續5年陽性率高于本省及其他省市[13-16]。這表明活禽市場持續存在廣泛的禽流感病毒污染，主要亞型為H9（34.81%）和A未分型（47.25%）。禽流感病毒基因分析表明2013年中國確診的H7N9部分片段來源于H9N2。H9N2雖為低致病性禽流感病毒，但可在H7N9禽流感病毒基因重配和突破種間屏障引起人類感染中發揮重要作用[17]。有研究報道低致病性H7N4、H9N2引起人類感染甚至死亡[18-19]，H5N2、H7N7、H9N2可在禽間傳播過程中變異為高致病性H5N1，不可忽視低致病性禽流感病毒的存在。H5和H5+H9占比和達到15.53%，提示要警惕H5的污染。2017年檢出活禽市場H7共7例，當時江西省共報告人感染H7N9病例7例，全國多省市進入H7N9禽流感高發期。2013年至2016年家禽H7N9為弱病毒，2017年之后轉為強致病性造成禽類大量感染并死亡。高致病性H7N9可以直接感染人類，環境標本中檢出H7預警加強活禽市場禽類和環境治理及高危人群管理。

不同季度活禽市場禽流感監測顯示冬季是禽流感高發季節，FluA陽性率第四季度（86.11%）最高，第二季度（42.00）最低，和李靈之2117份外環境標本禽流感病毒監測結果分析一致[20]。高致病性H5和H7在第一和四季度維持較高水平，應加強冬春季活禽市場監測及不明原因肺炎的實驗室檢測。不同類型標本陽性率差異無統計學意義,結果與鄧立權[21]等研究相同。FluA陽性率糞便（74.55%）高于宰殺或擺放禽肉案板（71.43%）和籠具表面檫拭（69.06%）及其他二類標本。禽流感病毒可在禽類的消化道中增殖，并依靠空氣、糞便和飲水等傳播造成廣泛的環境污染。被病毒污染的清洗水、脫毛機、籠具、飲水以及宰殺禽類案板等都含有病毒。5種類型標本存在較廣泛污染，陽性率在67.59%～74.55%之間。H5在禽類飲水標本中污染較廣泛，占比為22.83%，其他標本的H5和H5+H9占比和為30.61%。應加強各地活禽城市場水源管理，禽類飲水、污水和脫毛機等要及時更換和清洗，減少病毒對禽舍、飼料、飲水和案板的污染。家庭中應做到熟食和生食案板分開使用。不同禽種類活禽市場禽流感監測顯示雞類FluA陽性率最高，這和魏明敏[22-23]等相關報道一致。不同種類家禽對禽流感病毒易感性不同，家禽中以雞和火雞最強，成為重要的傳染源。鄧斐[24]等對人感染H7N4禽流感病毒分子溯源的研究從患者家養的雞鴨中分離到7株高度同源的病毒并揭示了中國南方庭院式養殖模式為禽流感病毒的跨種族傳播提供了便利。中國是家禽飼養大國，崇仁縣有大型雞、鴨養殖場，且多為農村散養方式，雞、鴨和鴿子甚至家畜間的頻繁接觸可增加交叉感染和基因重配的機會。

國家衛計委網站公布數據顯示2017年1月全國人感染H7N9禽流感發病數為192例，死亡79例，波及福建、云南、湖南、湖北和浙江等多個省份。受全國疫情影響，2017年1月撫州市疾控中心加大活禽市場監測力度，中心城區及各縣區共采集標本230份，崇仁縣在第四季度加采30份。不同監測點活禽市場禽流感監測顯示中心城區FluA陽性率高于其他縣區，陽性率差異有統計學意義，推測原因可能有：標本采集范圍廣、禽類飼養、宰殺方式不同、標本采集方式及各個市場進貨來源不一等。中心城區8個活禽交易市場陽性率差異無統計學意義，相關調查資料顯示活禽大多由同一家經銷商供貨。東鄉區和廣昌縣FluA陽性率最高，其次為宜黃，樂安，黎川和資溪，南城縣最低，不同縣區之間陽性率差別較大。H5在其他縣區占比高于中心城區，且宜黃縣和崇仁縣活禽市場污染較廣泛。由于H5在禽類飲水標本中污染廣泛，應當加強這部分地區禽類飲水和其他水源管理。

綜上所述，撫州地區活禽市場存在廣泛的禽流感病毒污染，應加大對活禽市場的消毒清洗工作，規范化無害化處理禽類污物。疫情期間采取“一日一清潔、一周一大掃除、一月一休市”模式，必要時可關閉活禽交易市場。同時應增強禽類飼養、銷售等相關從業人員防范意識，盡量減少活禽接觸及暴露的機會。建議有條件的農村改善飼養方式，不同禽類分開養殖以減少與其他禽類接觸的機會。應進一步加強人和動物的禽流感監測，對疑似病例早發現、早診斷，降低人感染禽流感的風險。