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飼料差異對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的潛在影響*

2022-02-26 13:18:01李志萍趙德明周向梅楊利峰
關(guān)鍵詞:實(shí)驗(yàn)研究

李志萍 趙德明 周向梅 楊利峰 喬 健

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家動(dòng)物海綿狀腦病實(shí)驗(yàn)室,北京 100193)(2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京 100193)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是生命科學(xué)研究的重要組成部分,被稱為“活的精密儀器”,是現(xiàn)代任何精密復(fù)雜的儀器都無(wú)法替代的科學(xué)工具,維持實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康生產(chǎn)是保障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行和獲得可靠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的首要前提。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常的生長(zhǎng)繁育和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可重復(fù)性與動(dòng)物的健康狀態(tài)密切相關(guān),飼料中不同營(yíng)養(yǎng)攝入的水平會(huì)直接影響動(dòng)物的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖、抗病能力和最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,動(dòng)物的某些器官,如消化系統(tǒng)的功能與形態(tài)也會(huì)因飼料品種的不同而發(fā)生改變。因此,要根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的需求,對(duì)飼料品質(zhì)進(jìn)行嚴(yán)格把控,以最大限度減少飼料差異或飼料污染物對(duì)結(jié)果造成的干擾,從而保證研究數(shù)據(jù)的客觀性和真實(shí)性。本文梳理了造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料差異的幾個(gè)因素,討論了因飼料質(zhì)量和成分不同在動(dòng)物研究中對(duì)結(jié)果造成的潛在影響,以期在以動(dòng)物為模型的研究中保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性提供參考。

1 對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在潛在影響的飼料差異

1.1 飼料配方

動(dòng)物研究的目的是在單一變量的條件下,探索和評(píng)價(jià)該變量的作用,而飼料配方的差異可能作為無(wú)關(guān)研究變量影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。現(xiàn)行的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料標(biāo)準(zhǔn)是《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 14924.2—2001),研究者結(jié)合不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需要和生理特點(diǎn)進(jìn)行配方設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料一般有3種,天然原料日糧、純合日糧和化學(xué)純合日糧。天然原料日糧由于成本較低通常被用作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物種的維持和繁殖,但天然原料日糧的缺點(diǎn)在于難以保持每一批次間營(yíng)養(yǎng)成分的一致,農(nóng)藥殘留、重金屬等物質(zhì)的污染也可能成為改變實(shí)驗(yàn)處理結(jié)果的潛在可能。比如,人們所關(guān)注的脂肪與肥胖、糖尿病和其他代謝性疾病的作用,在多篇研究中報(bào)道實(shí)驗(yàn)組使用純化實(shí)驗(yàn)飼料控制脂肪濃度,但低脂對(duì)照用的是天然原料日糧,忽略天然原料日糧的內(nèi)在變異性,可能會(huì)降低結(jié)果的可靠性[1-3]。另外,天然原料日糧中的某些天然化學(xué)物質(zhì)會(huì)引起許多物種的生理反應(yīng),例如,具有雌激素樣作用的植物雌激素,在動(dòng)物飼料中主要來(lái)源于豆粕和苜蓿,即使是不含大豆和苜蓿的天然原料日糧中也可能會(huì)有微量甚至無(wú)法檢測(cè)到的植物雌激素水平,研究表明,該成分會(huì)干擾生殖生物學(xué)、腫瘤學(xué)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、肥胖癥、骨密度和毒理學(xué)的研究[4-5]。綜上,涉及藥理學(xué)或內(nèi)分泌干擾物毒理學(xué)評(píng)價(jià)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均應(yīng)考慮這種類型飼料帶來(lái)的潛在影響。與天然原料日糧相比,純合日糧雖能減少飼料里成分的變化,但也會(huì)存在相應(yīng)的問(wèn)題。例如,用作高脂純合日糧對(duì)照的低脂純合日糧,通常蔗糖含量偏高,而蔗糖含量到達(dá)50%會(huì)影響脂質(zhì)代謝和胰島素信號(hào)傳導(dǎo)[3]。再者,膳食纖維的種類和濃度對(duì)脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)和腸道微生物組成起重要作用,但大多數(shù)純化飼料使用的不溶性纖維素作為纖維來(lái)源并不會(huì)促進(jìn)腸道細(xì)菌的生長(zhǎng)[1]。

因此,在選擇飼料類型的時(shí)候,研究者必須了解對(duì)照組和處理組飼料配方的匹配性,盡可能避免處理組與對(duì)照組之間因無(wú)關(guān)變量帶來(lái)的差異,如果只關(guān)注實(shí)驗(yàn)干預(yù)帶來(lái)的差異,那么可能會(huì)造成研究結(jié)論的錯(cuò)誤,失去研究意義,并且結(jié)果不可重復(fù)。

1.2 飼料污染

臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究是產(chǎn)品商業(yè)化前的最后一步,利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)評(píng)估化學(xué)藥物或轉(zhuǎn)基因食品對(duì)哺乳動(dòng)物的安全性,來(lái)預(yù)測(cè)對(duì)人類健康的風(fēng)險(xiǎn)。然而,用農(nóng)作物和動(dòng)物產(chǎn)品配制的動(dòng)物飼料不僅攜帶有很多天然的毒物,如微生物或某些化學(xué)物質(zhì),并且在飼料加工、儲(chǔ)存過(guò)程中也有可能造成二次污染,如果在動(dòng)物研究開(kāi)始之前不嚴(yán)格把控飼料的質(zhì)量,會(huì)從一開(kāi)始就引入多種復(fù)雜的變量,進(jìn)而影響動(dòng)物的機(jī)能代謝,甚至引起動(dòng)物長(zhǎng)期的、慢性的、難以分辨的微小變化,給研究者帶來(lái)困擾,降低實(shí)驗(yàn)的可靠性和重復(fù)性,增加實(shí)驗(yàn)研究成本。

1.2.1農(nóng)藥:飼料中有農(nóng)藥殘留,動(dòng)物采食后會(huì)在體內(nèi)蓄積,對(duì)動(dòng)物的消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等生理機(jī)能產(chǎn)生急性或慢性影響。最新的研究表明,高劑量或累積的農(nóng)藥會(huì)對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生毒性,低劑量則會(huì)產(chǎn)生興奮效應(yīng)。六六六和滴滴涕是植物飼料中最有可能存在的農(nóng)藥殘留物[6]。《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 14924.2—2001)規(guī)定:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料應(yīng)該無(wú)毒、無(wú)害,不得摻入抗生素、驅(qū)蟲(chóng)劑、防腐劑、色素、促生長(zhǎng)劑以及激素等添加劑,并對(duì)化學(xué)污染物六六六、滴滴涕制定了殘留量標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于預(yù)知少量化學(xué)物質(zhì)殘留會(huì)影響結(jié)果的實(shí)驗(yàn),應(yīng)該要求供應(yīng)商提供關(guān)于殺蟲(chóng)劑、除草劑等污染物的檢驗(yàn)報(bào)告。

1.2.2微生物:飼料中微生物的污染不僅來(lái)自于原料的污染,如動(dòng)物產(chǎn)品魚(yú)、肉和骨粉,或是被動(dòng)物糞便污染的作物,而且在加工、儲(chǔ)存的過(guò)程中也會(huì)受環(huán)境中微生物(如細(xì)菌和霉菌)的污染。其中常見(jiàn)的細(xì)菌污染是大腸桿菌、沙門氏菌,最常見(jiàn)的霉菌污染是黃曲霉素[7]。微生物會(huì)分解飼料中的蛋白質(zhì)、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)素,使?fàn)I養(yǎng)成分發(fā)生改變,并且在分解過(guò)程中產(chǎn)生的異味損害了飼料的適口性,導(dǎo)致動(dòng)物采食量降低;另一個(gè)重要的影響是,微生物會(huì)紊亂動(dòng)物腸道菌群的生態(tài)平衡,影響腸道免疫,微生物的代謝產(chǎn)物還會(huì)刺激動(dòng)物的免疫細(xì)胞,改變免疫機(jī)能。雖然在飼料制作的過(guò)程中可以物理去除或殺死大多數(shù)的微生物,但在使用前未經(jīng)消毒的天然原料日糧和純化的飼料中偶爾也會(huì)分離出潛在的腸道病原體,例如沙門氏菌、大腸桿菌或產(chǎn)氣莢膜梭菌,還有一些微生物可以在制造過(guò)程中存活并感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,如老鼠諾如病毒和鼠細(xì)小病毒[8-9]。《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》第十三條規(guī)定:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須飼喂質(zhì)量合格的全價(jià)飼料。霉?fàn)€、變質(zhì)、蟲(chóng)蛀、污染的飼料,不得用于飼喂實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。采食微生物污染飼料的動(dòng)物很可能只表現(xiàn)細(xì)微臨床癥狀甚至無(wú)癥狀,導(dǎo)致結(jié)果差異或無(wú)法重復(fù),因此,對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料中預(yù)期存在并且會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)的污染物應(yīng)定期分析,并作為原始資料保存。

1.2.3重金屬:無(wú)機(jī)重金屬是土壤的天然成分,在自然界中普遍存在,與純化日糧相比,天然原料日糧中砷、鎘、鉛和汞的濃度往往更高。砷經(jīng)呼吸道、消化道、皮膚進(jìn)入機(jī)體,先在肝臟蓄積然后進(jìn)入全身;鎘是一種毒性極強(qiáng)的重金屬污染物,對(duì)動(dòng)物的肝、腎、肺、骨骼都可能產(chǎn)生毒性,因其在體內(nèi)代謝緩慢,可能在動(dòng)物的整個(gè)生命周期中都存在;鉛也是一種蓄積性的有毒物質(zhì),對(duì)動(dòng)物的所有器官都有不同程度的傷害,如肝臟、腎臟組織細(xì)胞變性,腦血管擴(kuò)張,神經(jīng)節(jié)發(fā)生變性壞死等;汞主要侵害動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng),造成腦和末梢神經(jīng)變性[11]。重金屬污染的飼料會(huì)影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育,降低動(dòng)物的抗病能力,影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品質(zhì),甚至引起急性或慢性中毒,嚴(yán)重時(shí)還可致死[10-12]。《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 14924.2—2001)對(duì)化學(xué)污染物砷、鉛、鎘、汞制定了標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定方法,建議飼料使用前先檢測(cè)重金屬的污染程度。

1.2.4全氟/多氟烷基化合物(PFAS):PFAS是廣泛用于消費(fèi)性商品的保護(hù)涂料,例如不粘和耐水的包裝涂料、消防泡沫等,具有極強(qiáng)的穩(wěn)定性,在自然條件下無(wú)法降解,半衰期可達(dá)40~90年,是一種持久性有機(jī)污染物。目前已有毒理學(xué)研究表明,PFAS會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成肝臟毒性、發(fā)育和生殖毒性、遺傳和免疫毒性,并有致癌作用[13]。

1.2.5亞硝胺:亞硝胺是一種化學(xué)致癌物,最早因在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)被喂食含有亞硝鹽魚(yú)粉的動(dòng)物出現(xiàn)了肝衰竭而引起科學(xué)家的注意。上世紀(jì)中期在挪威因飼養(yǎng)了用亞硝酸鹽保存的青魚(yú)粉飼料引起肝中毒,導(dǎo)致綿羊、水貂急性死亡[14-15];在嚙齒類動(dòng)物中進(jìn)行的亞硝胺致癌性實(shí)驗(yàn)研究表明,在肝、肺和胃中,即使百萬(wàn)分之一濃度的亞硝胺也有致瘤作用;抗壞血酸可以抑制亞硝化反應(yīng),通常被添加到飼料中以減少亞硝胺的形成,但飼喂高脂飲食時(shí)抗壞血酸又能反過(guò)來(lái)促進(jìn)體內(nèi)亞硝胺的形成[16]。動(dòng)物的天然原料日糧中亞硝胺一般來(lái)源于魚(yú)粉。

1.3 飼料硬度

顆粒飼料或膨化飼料是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料中較為常見(jiàn)的兩種類型,經(jīng)制粒和膨化的飼料能提高飼料的消化吸收率,同時(shí)也較為符合動(dòng)物的采食特性和生理消化特點(diǎn)。如有些嚙齒類動(dòng)物的牙齒是終生生長(zhǎng),適當(dāng)?shù)娘暳嫌捕饶芊乐寡例X的過(guò)度生長(zhǎng)。如果飼料硬度不夠會(huì)降低動(dòng)物的咀嚼作用和胃腸刺激作用,影響動(dòng)物的消化機(jī)能;反之,如果硬度過(guò)高則會(huì)減少幼齡小鼠的采食,影響其生長(zhǎng)發(fā)育。如在BALB/c裸小鼠生長(zhǎng)性能的研究中發(fā)現(xiàn),將飼料硬度控制在108~137 N范圍,BALB/c裸小鼠能獲得較好的生長(zhǎng)性能,同時(shí)對(duì)飼料的利用率也最高[17]。因此,建議在設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的時(shí)候除實(shí)驗(yàn)需求的變量之外,也應(yīng)將飼料硬度納入可能造成結(jié)果差異的來(lái)源之一,可以采用顆粒硬度測(cè)試的方法盡可能將其調(diào)到一致的水平。

1.4 飼料殺菌方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼料大都要經(jīng)過(guò)滅菌才能使用,目前采用較多的是輻照滅菌法和蒸汽高壓滅菌法,對(duì)于一些大動(dòng)物的飼料原料如蔬菜、水果會(huì)通過(guò)藥物浸泡、清洗、加熱的方法進(jìn)行消毒。經(jīng)蒸汽高壓滅菌的飼料會(huì)破壞某些對(duì)熱不穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)成分,例如維生素A、C、B1、B6,高溫之后蛋白質(zhì)的質(zhì)量和利用率也會(huì)下降[18],即便在飼料生產(chǎn)的過(guò)程中特別增加對(duì)熱不穩(wěn)定的維生素濃度,損失的百分比在不同的批次間也有所差異,難以保證相同的占比,這也可能成為降低實(shí)驗(yàn)重復(fù)性的原因之一。除此之外,研究表明淀粉含量較高的飼料(例如天然原料飼料)高壓滅菌之后會(huì)產(chǎn)生丙烯酰胺,丙烯酰胺對(duì)嚙齒類動(dòng)物具有致癌性[19]。輻照滅菌對(duì)飼料的營(yíng)養(yǎng)成分影響較小,但也會(huì)對(duì)飼料中的某些維生素、氨基酸等成分造成一定程度的破壞,如發(fā)生蛋白質(zhì)變性,脂質(zhì)過(guò)氧化等現(xiàn)象[20]。研究報(bào)道,維生素B1、維生素B2、維生素B6、泛酸和葉酸等經(jīng)輻照之后會(huì)發(fā)生降解或流失,飼料中粗脂肪含量及多不飽和脂肪酸含量也會(huì)因照射而發(fā)生氧化反應(yīng),造成脂肪含量的降低[21-22]。動(dòng)物長(zhǎng)期食用維生素、氨基酸等含量不足的飼料會(huì)減低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量,飼料中脂肪含量的多少也可能對(duì)高脂飼料造模的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。其他滅菌方法還包括干熱滅菌,干熱滅菌能殺滅霉菌和大腸桿菌,但也會(huì)破壞營(yíng)養(yǎng)成分,且滅菌效果不夠徹底,藥物熏蒸、藥物浸泡、清洗等滅菌方法不常用。總之,上述的消毒方法雖都有一定的殺菌效果,但都同時(shí)降低了飼料的質(zhì)量,且會(huì)損失部分營(yíng)養(yǎng)成分,建議通過(guò)化學(xué)、生物指標(biāo)等方法進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控,清潔動(dòng)物還需直接對(duì)飼料進(jìn)行無(wú)菌測(cè)試。

1.5 飼料儲(chǔ)存

合理的飼料儲(chǔ)存對(duì)動(dòng)物的健康和營(yíng)養(yǎng)至關(guān)重要,飼料儲(chǔ)存不當(dāng)或存放時(shí)間過(guò)久會(huì)使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生降解,飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值減弱,不再能滿足特定物種的營(yíng)養(yǎng)要求。淀粉是飼料的主要成分之一,儲(chǔ)存濕度大于75%時(shí)淀粉被水解,飼料中的糖分含量減少;含有高脂肪和維生素的飼料很容易因氧化而降解,從而降低適口性和采食量;另外,儲(chǔ)存溫度和濕度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致霉菌生長(zhǎng),產(chǎn)生的霉菌毒素引發(fā)食物中毒[23]。因此,飼料儲(chǔ)存也是提高飼料品質(zhì)的一個(gè)重要原因,良好的存放條件能夠最大限度保存飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,促進(jìn)動(dòng)物的健康生長(zhǎng)。

1.6 飼料制作錯(cuò)誤

因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)錯(cuò)誤造成的結(jié)果差異較為少見(jiàn),但在寵物、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料行業(yè)曾有報(bào)道。早在1990年就發(fā)生了由于飼料制造錯(cuò)誤,飼料中維生素C不足,導(dǎo)致飼養(yǎng)的恒河猴和松鼠猴出現(xiàn)了壞血病的臨床特征[24];還曾數(shù)次報(bào)道馬飼料中無(wú)意添加了莫能菌素,或者是因?yàn)樵谂:婉R之間對(duì)飼料設(shè)備的清潔不足導(dǎo)致交叉污染[25]。飼料配方或制造錯(cuò)誤的現(xiàn)象雖然罕見(jiàn),但其造成的結(jié)果差異卻是顯著的,它能夠在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)影響許多動(dòng)物,甚至是對(duì)照組,因此建議在購(gòu)買新的飼料時(shí),采集所有批次的飼料冷凍保存至少1年,以便在必要時(shí)進(jìn)行回溯性測(cè)試。

1.7 隨意飼喂與飲食限制

嚙齒類動(dòng)物由于采食習(xí)慣和生理需要通常采取隨時(shí)進(jìn)食的飼養(yǎng)方式,其他大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般是定時(shí)定量的飼喂,防止過(guò)量飼喂而對(duì)健康造成危害。對(duì)于隨時(shí)采食的嚙齒動(dòng)物,控制采食量和熱量有一定的困難,它們通常是成群飼養(yǎng),熱量攝入較多,而活動(dòng)范圍少[26],導(dǎo)致肥胖癥,慢性腎臟疾病和心臟疾病,增加腫瘤發(fā)病率[27],降低壽命,不利于某些疾病機(jī)制的研究,并且同籠中優(yōu)勢(shì)動(dòng)物會(huì)比同伴吃得更多,使得同籠中的動(dòng)物熱量攝入失衡。目前,美國(guó)毒理學(xué)會(huì)(NTP)針對(duì)毒理學(xué)研究而設(shè)計(jì)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大小鼠的飼料標(biāo)準(zhǔn)NTP-2000配方,與之前采用的NIH-07配方相比,該標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量低,脂肪含量高,可減少慢性腎臟病變,提高生存率[28],有助于慢性毒性實(shí)驗(yàn)研究中對(duì)較晚時(shí)間點(diǎn)的評(píng)估。不過(guò),限制采食也會(huì)帶來(lái)可能的問(wèn)題,原因是限制飲食的動(dòng)物在喂食時(shí)會(huì)立即進(jìn)食,從而導(dǎo)致生物化學(xué)和生理學(xué)發(fā)生變化,并且白天喂食夜間進(jìn)食的動(dòng)物會(huì)改變其晝夜節(jié)律[29]。對(duì)于嚙齒動(dòng)物的采食建議制定喂養(yǎng)計(jì)劃表,在固定時(shí)間自由采食定量的飼料,從而較好的控制其飲食。

2 討論

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的要求是盡可能減少個(gè)體間差異,生理生化指標(biāo)正常,動(dòng)物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化,因此,一方面,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料在滿足動(dòng)物基本生長(zhǎng)繁殖的條件下,要盡可能保證營(yíng)養(yǎng)恒定,減少因營(yíng)養(yǎng)不足或過(guò)多改變動(dòng)物質(zhì)量。另一方面,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究人員應(yīng)盡可能考慮純合飼料,特別是在已知研究的結(jié)果會(huì)受飲食影響的情況下,還應(yīng)當(dāng)注意對(duì)照日糧的配方與實(shí)驗(yàn)日糧的配方一致。再者,即使是純化的飼料也可能含有微生物或化學(xué)污染物,在使用前應(yīng)該先做檢測(cè);如果必須使用天然原料日糧時(shí),也應(yīng)考慮采用開(kāi)放式配方,以使所用飼料的成分更加透明,同樣地,也要定期檢測(cè)其營(yíng)養(yǎng)成分,從而更易于結(jié)果的重復(fù)性。

本實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)每年對(duì)北京市嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量抽查的病理檢測(cè),連續(xù)幾年的檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)送檢的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物少數(shù)出現(xiàn)肝細(xì)胞腫脹、肺臟及心臟局灶性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化[30],可能與飼料的品質(zhì)及飼喂方式直接相關(guān)。目前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員對(duì)飼料因素的影響作用似乎還不夠重視,希望未來(lái)在基于動(dòng)物的研究中能引起研究者更多的關(guān)注,在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的過(guò)程中將飼料因素納入變量控制的范圍之內(nèi),從而減少飼料對(duì)其結(jié)果的潛在影響,保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性和精確度。

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