血清可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1、尾加壓素Ⅱ水平與冠狀動脈慢血流的關系

李 娟，周 國

冠狀動脈慢血流(coronary slow flow，CSF)是指無阻塞冠狀動脈出現的循環延遲，在影像學表現為正常冠狀動脈遠端出現顯影延遲現象[1]。隨著冠狀動脈造影技術的提高和臨床普及，冠狀動脈慢血流檢出率不斷增加，冠狀動脈慢血流可導致急性冠脈綜合征、惡性心律失常和心源性猝死等嚴重心血管事件，逐漸受到關注[2]。識別冠狀動脈慢血流有助于早期治療，預防嚴重心血管事件的發生。可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(soluble lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1，sLOX-1)是血管內皮細胞表面氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)受體的可溶性形式，在外周血液中可檢測到，sLOX-1具有調節血管內皮功能、氧化應激和炎癥反應功能，參與動脈粥樣硬化損傷過程[3]。尾加壓素Ⅱ(urotensin-Ⅱ，UⅡ)是一種生長抑素環肽，在心血管系統廣泛分布，參與充血性心力衰竭、冠心病、高血壓等心血管疾病發病過程[4]。sLOX-1、UⅡ在冠狀動脈慢血流中的作用機制尚不清楚。本研究探討血清sLOX-1、UⅡ水平與冠狀動脈慢血流發病的關系以及對冠狀動脈慢血流的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年9月—2020年7月山東省立第三醫院收治的經冠狀動脈造影檢查提示冠狀動脈無明顯狹窄但存在冠狀動脈慢血流現象病人82例為冠狀動脈慢血流組。冠狀動脈慢血流診斷標準：采用Judkins法經橈動脈或股動脈進行冠狀動脈造影檢查(西門子C臂冠狀動脈造影機器，5F冠狀動脈造影導管)，采用校正心肌梗死溶栓試驗(TIMI)血流幀數法評價冠狀動脈血流速度，幀數>27幀為冠狀動脈慢血流[5]。另選取同期冠狀動脈造影檢查提示冠狀動脈無明顯狹窄且冠狀動脈血流正常的病人51例為對照組。本研究獲得醫院倫理委員會批準，病人及其家屬均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準 納入標準：①因胸悶、胸痛、心前區不適就醫，住院行冠狀動脈造影檢查；②未進行冠狀動脈介入、靜脈溶栓、擴張手術；③無冠狀動脈痙攣、無冠狀動脈內氣體栓塞。排除標準：①患有先天性心臟病、瓣膜病、心肌病；②合并免疫性疾病、急慢性感染、血液系統疾病、惡性腫瘤；③嚴重心力衰竭、心源性休克、惡性心律失常者；④既往心臟手術史或近3個月大手術史后者；⑤合并肝、腎、肺等重要臟器損傷者。

1.3 血清sLOX-1、UⅡ檢測 受試者均于入院24 h內采集清晨空腹靜脈血5 mL，注入促凝試管待血液凝固取上層液于離心管，置于TDZ4-WS低速自動平衡離心機(長沙湘智離心機儀器有限公司)4 ℃ 3 000 r/min離心15 min(離心半徑10 cm)，取血清保存于-70 ℃低溫冰箱(美國Thermo公司)，48 h內完成待檢。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清sLOX-1、UⅡ水平，儀器為瑞士Hamilton FAME全自動酶聯免疫分析儀，試劑盒購自美國R&D公司。

1.4 臨床資料收集 收集病人年齡、性別、體質指數(body mass index，BMI)、基礎疾病、吸煙史、飲酒史、心率、收縮壓、舒張壓、生化指標[總膽固醇(total cholesterol，TC)、三酰甘油(triglycerides，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、尿素氮(urea nitrogen，BUN)、血肌酐(serum creatinine，SCr)、尿酸(uric acid，UA)、丙氨酸氨基轉移酶(alanine aminotransferase，ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(aspartate aminotransferase，AST)、空腹血糖(fasting plasma glucose，FPG)、白細胞(white blood cell，WBC)計數、血小板(platelet，PLT)]。采用羅氏 Modular全自動生化分析儀檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、AIb、BUN、SCr、UA、ALT、AST。采用雅培I2000全自動化學發光免疫分析儀及配套試劑檢測FPG。采用全自動血細胞分析儀檢測WBC計數、PLT。

2 結 果

2.1 兩組病人一般資料比較 冠狀動脈慢血流組年齡、男性比例、吸煙史比例、心率、BMI、UA、FPG、WBC均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組病人一般資料比較

2.2 兩組血清sLOX-1、UⅡ水平比較 冠狀動脈慢血流組血清sLOX-1、UⅡ水平高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血清sLOX-1、UⅡ水平比較 (±s)

2.3 冠狀動脈慢血流病人血清sLOX-1、UⅡ水平與臨床指標的相關性 Pearson相關性分析結果顯示，冠狀動脈慢血流病人血清sLOX-1、UⅡ水平與WBC計數、UA、TIMI血流幀數呈正相關(r值分別為0.496，0.501，0.601，0.438，0.506，0.637，P均<0.05)。詳見表3。

表3 血清sLOX-1、UⅡ水平與冠狀動脈慢血流病人臨床指標的相關性

2.4 冠狀動脈慢血流的影響因素分析 構建影響冠狀動脈慢血流的Logistic回歸模型，以是否發生冠狀動脈慢血流為因變量(賦值：0=否，1=是)，年齡(連續性變量)、性別(賦值：1=女，2=男)、吸煙史(賦值：1=否，2=是)、心率(連續性變量)、BMI(連續性變量)、UA(連續性變量)、FPG(連續性變量)、WBC計數(連續性變量)、sLOX-1(連續性變量)、UⅡ(連續性變量)為自變量，逐步法排除無關變量(α入=0.05，α出=0.10)，校正年齡、性別、基礎疾病等混雜因素，最終得出吸煙史、血清sLOX-1、UⅡ水平是冠狀動脈慢血流的影響因素(P<0.01)。詳見表4。

表4 冠狀動脈慢血流影響因素的Logistic回歸分析

2.5 血清sLOX-1、UⅡ水平診斷冠狀動脈慢血流的價值分析 sLOX-1、UⅡ預測冠狀動脈慢血流的最佳截斷值分別為206.01 ng/mL、102.34 mg/L，ROC曲線下面積(area under the curve，AUC)分別為0.742，0.790，sLOX-1+UⅡ預測冠狀動脈慢血流的AUC為0.932(見圖1)，大于單獨sLOX-1、UⅡ(Z值分別為2.645，2.551，P均<0.05)，sLOX-1、UⅡ、sLOX-1+UⅡ預測冠狀動脈慢血流的靈敏度、特異度、約登指數見表5。

表5 sLOX-1、UⅡ、sLOX-1+UⅡ預測冠狀動脈慢血流的效能

圖1 sLOX-1、UⅡ、sLOX-1+UⅡ預測冠狀動脈慢血流的ROC曲線圖

3 討 論

冠狀動脈慢血流臨床表現以胸悶、胸痛等類似冠心病癥狀為主，病情進展可能出現急性冠脈綜合征、惡性心律失常等嚴重后果，威脅病人生命。冠狀動脈慢血流發病機制尚不完全清楚，可能是多種因素共同作用的結果，已有研究顯示，微血管功能障礙、內皮功能障礙、炎癥反應、血液黏滯度增加、冠狀動脈粥樣硬化等均可能與冠狀動脈慢血流發病有關[6]。目前，診斷冠狀動脈慢血流的方法主要為冠狀動脈造影，但是該方法有創，檢查費用較高。生物學指標檢測簡便、快捷、經濟，探討與冠狀動脈慢血流發生密切相關的分子機制，對冠狀動脈慢血流早期診斷有重要意義[7]。

LOX-1是內皮細胞上發現的ox-LDL受體，LOX-1通過結合內吞ox-LDL介導內皮細胞損傷、增殖、遷移、增厚，導致內皮功能紊亂，進而參與動脈粥樣硬化進程，被認為是急性冠脈綜合征、冠心病等潛在生物學標志物[8]。sLOX-1由胞外結構域降解后釋放入血，與多種血管內皮損傷機制有關，由于外周血檢測快捷，sLOX-1在臨床應用前景更為廣闊[9]?，F有報道顯示，sLOX-1在急性冠脈綜合征病人中出現峰值的時間早于肌鈣蛋白T，預測急性冠脈綜合征預后具有較高靈敏度和特異度[10]。sLOX-1與冠心病冠脈粥樣硬化斑塊程度有關，與經冠狀動脈介入術后2年內主要心血管事件有關[11]。sLOX-1在冠狀動脈慢血流中的研究尚不多見，是否可用作冠狀動脈慢血流診斷血清學指標尚待探討。本研究發現，冠狀動脈慢血流組血清sLOX-1水平明顯升高，sLOX-1水平與WBC計數、UA、TIMI血流幀數呈正相關，UA、炎癥反應均被證實與冠狀動脈內皮功能障礙有關，sLOX-1可能與炎癥反應在微血管和內皮功能障礙發病機制中存在協同作用，提示sLOX-1的升高可能是導致冠狀動脈血流減慢的原因之一[12]?；貧w分析結果顯示，高sLOX-1水平是導致冠狀動脈慢血流的原因，分析機制可能為：sLOX-1與ox-LDL激活后可激活細胞膜上NADPH 氧化酶，導致氧化應激反應，活性氧大量產生，一氧化氮生成減少，引起內皮功能障礙[8]。其次，sLOX-1生成增多誘導單核細胞黏附，促使趨化因子、炎性因子表達，加重血管炎癥反應，并誘導平滑肌細胞凋亡，單核細胞、巨噬細胞泡沫化，加速動脈粥樣硬化進程[13]。sLOX-1介導的冠狀動脈粥樣硬化可明顯影響冠狀動脈形態結構和血流動力學，導致血流速度減慢，引起冠狀動脈慢血流現象。

UⅡ是迄今為止發現的最強的收縮血管活性物質，在心肌細胞、冠狀動脈粥樣硬化斑塊、脂質沉積血管平滑肌細胞、巨噬細胞內均有表達，發揮調節心肌、縮血管、促心肌成纖維細胞和血管平滑肌細胞增殖等功能[15]。UⅡ在心肌纖維化疾病、左心室肥厚、心肌梗死等疾病發病機制中均扮演重要角色[15-17]。UⅡ與冠狀動脈慢血流相關性的報道并不多見，本研究探討血清UⅡ水平與冠狀動脈慢血流的發病的關系，結果發現，在冠狀動脈慢血流病人中UⅡ水平明顯升高，高水平UⅡ與冠狀動脈慢血流的發生密切相關，機制可能為：血管內皮功能依賴于內源性血管收縮和舒張平衡，冠狀動脈慢血流病人存在內源性血管收縮和擴張系統失衡，UⅡ作為強收縮血管物質，其收縮血管作用是內皮素-1的10～100倍，UⅡ可釋放內皮縮血管肽，通過增加冠狀動脈阻力減緩血液流通，形成冠狀動脈慢血流[18]。另一種解釋為，UⅡ通過參與冠狀動脈粥樣硬化過程影響冠脈血流動力學，UⅡ在冠狀動脈粥樣硬化斑塊內和脂質沉積血管平滑肌細胞中高度表達，促使平滑肌細胞遷移、增殖，加速冠狀動脈粥樣硬化進程，冠狀動脈血流動力學參數與冠狀動脈粥樣硬化病變程度關系密切，冠狀動脈粥樣硬化可能導致管腔狹窄，冠脈彈性降低，導致血流阻力增加，速度減慢[19-20]。本研究中相關性分析結果顯示，冠狀動脈慢血流病人血清UⅡ水平與WBC計數、UA、TIMI血流幀數呈正相關，說明UⅡ和WBC計數、UA可能存在相互作用機制，共同導致了冠狀動脈慢血流現象的發生。機制可能為：機體慢性低度炎癥反應影響血管內皮功能，引起UⅡ釋放，在炎癥反應、UⅡ縮血管效應以及高UA血癥介導的內皮細胞損傷共同作用下，發生了冠狀動脈血流動力學改變。

本研究中ROC分析結果顯示，sLOX-1、UⅡ診斷冠狀動脈慢血流的AUC分別為0.742，0.790，提示sLOX-1、UⅡ均可為冠狀動脈慢血流診斷提供一定參考，但均存在靈敏度不足弊端，聯合sLOX-1、UⅡ明顯提高了診斷效能，說明sLOX-1、UⅡ均升高的病人冠狀動脈血流動力學改變更為明顯，確診冠狀動脈慢血流的可能性更大。本研究中Logistic回歸分析結果顯示，吸煙史與冠狀動脈慢血流的發生有關，是導致冠狀動脈慢血流發生的危險因素之一，長期大量吸煙可引起血管內皮功能、血管收縮和舒張功能受損，加快動脈粥樣硬化進程[21]。

綜上所述，冠狀動脈慢血流病人血清sLOX-1、UⅡ水平均升高，sLOX-1、UⅡ升高是冠狀動脈慢血流發生的危險因素之一，可以作為臨床冠狀動脈慢血流診斷的輔助血清學指標，為臨床治療提供新的靶點和方向。