基于國家專利的中藥復(fù)方治療慢性腎小球腎炎用藥規(guī)律研究

盧登勇，石曉冬，吳慧敏，陳宇珊，左金巾，翁雪瑩，羅芳，鐘建

1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，廣西 南寧 540001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023

慢性腎小球腎炎（chronic glomerulonephritis，CGN）是以血尿、蛋白尿、水腫或高血壓為主要臨床特征，多數(shù)起病隱匿，病情時輕時重、遷延不愈，具有腎功能惡化傾向，最終漸進(jìn)發(fā)展為慢性腎衰竭的一類腎小球疾病。西醫(yī)治療CGN以控制血壓、減少蛋白尿、抑制免疫反應(yīng)、抑制細(xì)胞增殖等為主，目前尚缺乏特效藥物。中醫(yī)歷代醫(yī)家對腎系疾病病因病機(jī)整體把握確切，近年來，中醫(yī)通過辨證施治，在改善腎功能、減少腎臟損傷、抗腎纖維化、增強(qiáng)機(jī)體免疫等方面具有一定優(yōu)勢。國家專利數(shù)據(jù)庫集眾醫(yī)家所長，匯集了大量療效顯著的中藥復(fù)方。本研究通過對治療CGN中藥復(fù)方專利進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，探索其潛在規(guī)律，為中醫(yī)藥治療CGN及新藥研發(fā)提供思路。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

登錄中國專利公布公告網(wǎng)（http://epub.cnipa.gov.cn），進(jìn)入“高級查詢”界面，“文本-名稱”分別輸入檢索詞“慢性腎小球腎炎 and 中藥”“慢性腎炎 and 中藥”進(jìn)行查詢，將檢索結(jié)果合并去重。檢索時間范圍為建庫至2021年6月23日。

1.2 數(shù)據(jù)篩選標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①治療CGN的中藥復(fù)方專利；②治療CGN含中藥提取物專利；③專利項目名稱中無治療CGN，但發(fā)明詳情頁明確說明治療CGN的專利。排除標(biāo)準(zhǔn)：①茶類、酒類、食品類及保健品類專利；②摘要或說明書中未給出具體藥物組成的專利；③摻雜非中藥或非中藥提取物其他成分的專利；④藥物組成、用量相同的專利僅錄入1次。

1.3 數(shù)據(jù)規(guī)范及錄入

建立CGN中藥復(fù)方專利數(shù)據(jù)庫，將專利基本信息錄入Excel2019，包括專利名稱、作者、發(fā)明時間、藥物組成、功效及主治證型等。參照 2020年版《中華人民共和國藥典》和《中藥大辭典》對中藥及中藥提取物（錄入對應(yīng)中藥名）進(jìn)行規(guī)范化命名，如“旱蓮草”規(guī)范為“墨旱蓮”、“仙靈脾”規(guī)范為“淫羊藿”等；參照《中醫(yī)診斷學(xué)》及《中醫(yī)臨床診療術(shù)語?證候部分》規(guī)范主治證型名稱。由2名研究人員獨立錄入并交叉校對，控制數(shù)據(jù)相異率＜3%。

1.4 數(shù)據(jù)分析

運用中醫(yī)傳承輔助平臺 V2.5對中藥復(fù)方專利的用藥頻次、主治證型進(jìn)行頻數(shù)分析；根據(jù)數(shù)據(jù)的離散程度和集中程度對參數(shù)進(jìn)行預(yù)讀（數(shù)據(jù)分散則調(diào)低相關(guān)參數(shù)，數(shù)據(jù)集中則調(diào)高相關(guān)參數(shù)），設(shè)置合理的支持度和置信度，對中藥復(fù)方的配伍規(guī)律及核心藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，并展示相關(guān)復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)；設(shè)置合理的相關(guān)度和懲罰度，進(jìn)行復(fù)雜系統(tǒng)熵聚類，在提取核心組合基礎(chǔ)上，采用無監(jiān)督的熵層次聚類算法進(jìn)一步聚類組合得出新處方，并進(jìn)行復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)可視化展示。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

共納入治療CGN中藥復(fù)方專利316項，涉及藥物798味。單項復(fù)方藥味數(shù)最多43味，最少2味，平均（12.00±6.83）味。

2.2 主治證型

316項治療CGN中藥復(fù)方最常見的主治證型為脾腎氣虛證（79次，25.00%），其余依次為氣陰兩虛證（55次，17.41%）、脈絡(luò)瘀阻證（40次，12.66%）、濕熱蘊(yùn)結(jié)證（37次，11.71%）等，見表1。

表1 316項治療CGN中藥復(fù)方專利主治證型

2.3 高頻單味藥

316項治療CGN中藥復(fù)方的高頻單味藥有黃芪（155次，49.05%）、茯苓（126次，39.87%）、白術(shù)（92次，29.11%）、丹參（82次，25.95%）等，見表2。

表2 316項治療CGN中藥復(fù)方專利高頻單味藥（頻次≥50）

2.4 高頻對藥

設(shè)置支持度個數(shù)為42（支持度為13.29%）、置信度為0.95，316項治療CGN中藥復(fù)方的高頻對藥有“黃芪-茯苓”“白術(shù)-茯苓”“黃芪-白術(shù)”等，見表3。

表3 316項治療CGN中藥復(fù)方專利高頻對藥（置信度＞0.95）

2.5 高頻角藥

設(shè)置支持度個數(shù)為24（支持度為7.59%）、置信度為0.95，316項治療CGN中藥復(fù)方的高頻角藥有“黃芪-白術(shù)-茯苓”“黃芪-茯苓-澤瀉”“白術(shù)-山藥-茯苓”等，見表4。

表4 316項治療CGN中藥復(fù)方專利高頻角藥（置信度＞0.95）

2.6 關(guān)聯(lián)規(guī)則分析

設(shè)置支持度個數(shù)為20（支持度為6.33%）、置信度為0.70，得到32條藥物關(guān)聯(lián)規(guī)則，按置信度從高到低排序，前11位結(jié)果見表5，藥物復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)見圖1?；谂湮橐?guī)律的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)核心藥物有黃芪、茯苓、白術(shù)等。

圖1 316項治療CGN中藥復(fù)方專利藥物復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)（置信度＞0.70）

表5 316項治療CGN中藥復(fù)方專利藥物關(guān)聯(lián)規(guī)則（置信度≥0.800）

2.7 核心組合及新處方

設(shè)置懲罰度為5、相關(guān)度為8，對316項中藥復(fù)方進(jìn)行復(fù)雜系統(tǒng)熵聚類，得到 3味藥物核心組合 18組（見表6）。采用無監(jiān)督的熵層次聚類算法對 316項中藥復(fù)方藥物進(jìn)行分析，得到用于聚類新方的藥物組合10組（見表7）。運用熵聚類方法進(jìn)一步合成，得到用于治療CGN的新方5首（見表8），新方復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)見圖2。

圖2 治療CGN新方復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)

表6 316項治療CGN中藥復(fù)方專利3味藥物核心組合

表7 用于治療CGN新方聚類的藥物組合

表8 基于熵層次聚類的治療CGN新方

3 討論

CGN發(fā)病與多種因素有關(guān)，可由不同病理類型的腎小球疾病演化而來，大部分發(fā)病機(jī)制不明，但起始因素多見于免疫介導(dǎo)性炎癥，由于病情遷延難愈，緩慢進(jìn)展，可最終發(fā)展至終末期腎病。改善或緩解臨床癥狀、防止腎功能進(jìn)行性減退，已成為相關(guān)研究者關(guān)注的主要內(nèi)容。CGN屬中醫(yī)學(xué)“腎風(fēng)”“血尿”“水腫”“虛勞”等范疇，臟腑虛損、外邪侵襲是本病發(fā)生的主要原因，正氣與病邪的消長導(dǎo)致病機(jī)復(fù)雜和證候多變，陰陽失衡，邪氣羈留，日久則五臟俱損。近年來，中醫(yī)秉承辨證論治精髓，采用多環(huán)節(jié)、多靶點、整體調(diào)節(jié)方式，在CGN臨床治療領(lǐng)域發(fā)揮了巨大作用。

本研究分析316項治療CGN的中藥復(fù)方專利數(shù)據(jù)，得出最常見的主治證型為脾腎氣虛證，其次為氣陰兩虛證、脈絡(luò)瘀阻證、濕熱蘊(yùn)結(jié)證等?！吨T病源候論》云：“水病無不由脾腎虛所為，脾虛不能制水，腎虛不能宣通水氣，水氣妄行，盈溢肌膚則通身腫也?！逼⑹мD(zhuǎn)輸，腎失開闔，水不自利，賴氣以動，其證多以脾腎氣虛為主。《素問?上古天真論篇》有“腎者主水，受五臟六腑之精而藏之”，《類經(jīng)圖翼?真陰論》有“水虧其源，則陰虛之病疊出”。腎為水火之宅、藏精之所，封藏失司、陰精統(tǒng)攝無權(quán)則溢于外，脾失健運、氣血化生不足則虛于內(nèi)，易形成氣陰兩虛之證?！端貑?調(diào)經(jīng)論篇》指出“孫絡(luò)水溢，則經(jīng)有留血”，《金匱要略?水氣病脈證并治》有“血不利則為水”，水液代謝失調(diào)，氣機(jī)阻遏，經(jīng)絡(luò)不通，瘀阻腎絡(luò)即為痼疾。《醫(yī)原》曰：“濕之化氣，氤氳濁膩，兼證最多，變遷最幻，愈期最緩?！睗駸嶂霸隗w內(nèi)稽留不去，膠著于腎，是導(dǎo)致病情緩慢進(jìn)展和遷延難愈的重要因素。故臨床治療CGN脾腎氣虛證常用培補(bǔ)脾腎、溫陽化氣法，氣陰兩虛證常用益氣養(yǎng)陰法，脈絡(luò)瘀阻證常用化瘀通絡(luò)法，濕熱蘊(yùn)結(jié)證常用清利濕熱法。

本研究通過頻數(shù)統(tǒng)計得出治療CGN的高頻單味藥有黃芪（49.05%）、茯苓（39.87%）、白術(shù)（29.11%）等。黃芪為補(bǔ)氣之圣藥，味甘，性微溫，具有益氣健脾、升陽、益衛(wèi)固表、利水消腫功效。藥理研究表明，黃芪有較強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用，能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞分化與成熟，具有抗氧化、解除血管痙攣、改善微循環(huán)從而修復(fù)腎小球濾過屏障等作用。茯苓味甘、淡，性平，具有健脾滲濕、利水、寧心功效。研究表明，茯苓不僅能促進(jìn)機(jī)體水鹽代謝，還能使免疫功能低下者的活性E花環(huán)值及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化值明顯上升，并能調(diào)節(jié)T細(xì)胞亞群比值，從而增強(qiáng)免疫功能。白術(shù)味甘、苦，性溫，可升可降，陽中陰也，有健脾補(bǔ)氣、燥濕利水功效?！捌⑼聊苤颇I水，所以封藏腎氣也”（《醫(yī)經(jīng)精義》）。腎炎之水腫，其本在腎，其制在脾。白術(shù)使脾健旺，助腎封藏，能祛除停滯體內(nèi)水濕之邪，為治水腫之良藥。藥理研究顯示，白術(shù)不僅具有持久且顯著的利尿作用，還有保護(hù)機(jī)體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能、促進(jìn)細(xì)胞免疫等作用。

通過組方規(guī)律分析可知，316項治療CGN中藥復(fù)方專利的常見對藥有“黃芪-茯苓”“白術(shù)-茯苓”“黃芪-白術(shù)”等。黃芪、白術(shù)、茯苓配伍，具有益氣健脾功效。高頻角藥有“黃芪-白術(shù)-茯苓”“黃芪-茯苓-澤瀉”“白術(shù)-山藥-茯苓”等。脾虛受水濕之邪困阻，氣不化水，水邪為患，當(dāng)培土實脾，恢復(fù)脾腎行水制水功能。重要關(guān)聯(lián)規(guī)則有“黃芪，白術(shù)，澤瀉→茯苓”“白術(shù)，生地黃→黃芪”“白術(shù)，山藥→茯苓”等，基于復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)得到核心藥物黃芪、茯苓、白術(shù)等。治水需補(bǔ)氣，氣足水易去。黃芪常與茯苓相配以補(bǔ)益氣機(jī)，同時合用白術(shù)運脾燥濕，以黃芪為核心藥物，培土治水效佳。

本研究得出用于新方聚類的藥物組合有“黨參-紅花-益母草”“黨參-紅花-桃仁”“黃芪-益母草-當(dāng)歸”等，新方有“黨參-紅花-益母草-白術(shù)-茯苓-山藥”“黨參-紅花-桃仁-白術(shù)-茯苓-黃芪”“黃芪-益母草-當(dāng)歸-續(xù)斷-淫羊藿-土茯苓”等。可見，以黨參、黃芪等補(bǔ)氣藥為核心，配伍紅花、益母草等活血化瘀藥使用最多，與該病的主治證型相應(yīng)?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，辨證運用活血化瘀類藥物能有效改善腎臟微循環(huán)，清除免疫復(fù)合物沉積，促進(jìn)纖維蛋白溶解，在阻斷腎臟纖維化等方面有獨特優(yōu)勢。CGN臨床治療和新藥研發(fā)可優(yōu)先考慮以培補(bǔ)脾腎、溫陽化氣為法，兼以活血通絡(luò)，以黃芪、茯苓、白術(shù)等為核心處方藥物進(jìn)行配伍加減。

綜上所述，本研究基于國家專利數(shù)據(jù)庫研究治療CGN中藥復(fù)方的用藥規(guī)律，可為臨床遣方用藥和中藥新藥研發(fā)提供參考依據(jù)。本研究未對藥物劑量和功效進(jìn)行統(tǒng)計分析，且中藥復(fù)方證候分型存在一定主觀因素，可能導(dǎo)致研究的局限性。今后將結(jié)合名老中醫(yī)診治經(jīng)驗及臨床研究進(jìn)一步深入探索。