常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全身性麻醉藥物的使用

盧 曉,于靈芝,周聰穎,李如穎,陳文君,江善祥

(1.迪哲醫(yī)藥有限公司,上海201203;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,南京210095;3.上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心,上海201203;4.上海紐約大學(xué)文理學(xué)院,上海200062)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究以及藥物或醫(yī)療器械上市前的評估中應(yīng)用廣泛。在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)操作過程中，經(jīng)常涉及到對受試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行手術(shù)以及其他侵入機(jī)體的操作，例如胚胎移植、肝臟原位腫瘤移植、腎臟切除等，這些操作均需要?jiǎng)游锾幱跓o意識(shí)狀態(tài)，這就需要對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行全身性麻醉。此外，一些非手術(shù)操作，如心臟超聲探查、顱內(nèi)腫瘤的CT掃描、局部腫瘤的放射治療等也需要借助于全身性麻醉以達(dá)到保定的目的。而麻醉效果的評估、圍麻醉期的管理、麻醉藥物的藥理作用等都會(huì)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理狀態(tài)以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。本文對常見的全身性麻醉藥物進(jìn)行概括性介紹，并列舉幾種常見實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬在麻醉過程中應(yīng)該要注意的事項(xiàng)，以期為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獸醫(yī)提供一定的參考。

1 常見全身性麻醉藥物的使用介紹

全身性麻醉藥物從給藥途徑上大致分為兩類：注射類麻醉藥和吸入性麻醉藥。

注射類全身麻醉藥有很多優(yōu)點(diǎn)：臨床應(yīng)用廣泛，易于操作，不需要額外的機(jī)器進(jìn)行輔助，不需要?dú)夤懿骞埽瑢?shí)驗(yàn)人員沒有職業(yè)健康方面的擔(dān)憂，而且在各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬上的參考資料豐富［1-4］。但是缺點(diǎn)也很明顯：首先是注射類全身麻醉藥多屬于管制藥物，購買程序繁復(fù)、周期長，管理要求嚴(yán)；其次，注射類全身麻醉藥使用過程中，無論是靜脈注射還是肌內(nèi)注射，動(dòng)物血藥濃度很難實(shí)時(shí)檢測，動(dòng)物生理狀態(tài)難以控制，容易發(fā)生意外情況。

吸入性麻醉藥因?yàn)槭褂脫]發(fā)罐，能很精確地控制麻醉氣體的通量，保證持續(xù)且穩(wěn)定的輸出，在動(dòng)物處于正常的呼吸狀態(tài)下，進(jìn)入肺泡的麻醉氣體可以和動(dòng)脈血流維持一個(gè)動(dòng)態(tài)的平衡，保證吸入動(dòng)物都能進(jìn)入相似的麻醉狀態(tài)，減少動(dòng)物組間的數(shù)據(jù)差異，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。這一點(diǎn)對研究者來說是非常重要的。當(dāng)然，吸入性麻醉藥也有短板：首先，吸入性麻醉需要特定的設(shè)備進(jìn)行操作，無法使用鼻罩的大動(dòng)物還需要?dú)夤懿骞埽@對使用人員的操作技術(shù)提出了較高的要求；其次吸入性麻醉藥普遍具有揮發(fā)性強(qiáng)的特點(diǎn)，麻醉氣體的泄露會(huì)對操作人員帶來一定的職業(yè)安全隱患。

下面對常見的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉藥物進(jìn)行介紹：

1.1 戊巴比妥鈉（Sodium pentobarbital）

戊巴比妥鈉屬于巴比妥類麻醉藥，在《麻醉藥物和精神藥物目錄》中屬于第二類精神藥物，通常以注射液的形式進(jìn)行銷售。其優(yōu)點(diǎn)包括：使用方便，可以肌內(nèi)注射、腹腔注射（但其pH值高，腹腔注射可引起疼痛）或靜脈注射；價(jià)格便宜；易于儲(chǔ)存；麻醉起效快；麻醉持續(xù)時(shí)間較長。戊巴比妥鈉在小鼠、大鼠、兔、犬的代謝半衰期分別為38、100、85和200 min［5］。戊巴比妥鈉的缺點(diǎn)也非常明顯，包括：其屬于法規(guī)管制藥物，購買流程復(fù)雜；鎮(zhèn)痛效果微弱［6］，手術(shù)結(jié)束后，需要額外使用鎮(zhèn)痛藥才能符合動(dòng)物福利要求。

戊巴比妥鈉對被麻醉動(dòng)物的整體生理指標(biāo)有顯著影響，能夠選擇性地抑制葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)［7］，并且對大鼠的基礎(chǔ)肝臟血糖和胰島素均有抑制作用［8］。另外，注射戊巴比妥鈉后，動(dòng)物的心臟輸出量也會(huì)受到影響。例如，大鼠靜脈注射戊巴比妥鈉會(huì)引起血壓的快速下降，從105 mmHg快速下降至75 mmHg，直到30 min后才緩慢恢復(fù)到90 mmHg左右［9］。此外，戊巴比妥鈉對大鼠的呼吸抑制也很明顯，注射后呼吸頻率從195次∕min降至71次∕min，且與劑量呈正相關(guān)，40 mg∕kg的戊巴比妥鈉腹腔注射SD大鼠，能使血液pH降低1.2%（約0.09～0.10），同時(shí)血液中二氧化碳的壓力升高46%（約11 mmHg）；成年雄性BALB∕c小鼠接受50 mg∕kg劑量的戊巴比妥鈉能夠達(dá)到足夠的鎮(zhèn)靜，但是60 mg∕kg就會(huì)出現(xiàn)個(gè)別小鼠死亡的現(xiàn)象，提示戊巴比妥鈉的安全范圍非常窄［10］。

戊巴比妥鈉是一種較為理想的安樂死藥物，但是不推薦作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的全身性麻醉藥物。不可否認(rèn)的是，戊巴比妥鈉在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中已有豐富的數(shù)據(jù)累積，因此在有充足的科學(xué)依據(jù)，且經(jīng)過動(dòng)物倫理委員會(huì)的審批，并有充足的獸醫(yī)護(hù)理的前提下，仍可進(jìn)行有條件的使用。

1.2 氯胺酮（Ketamine）

氯胺酮價(jià)格便宜，安全范圍廣，使用方便，在獸醫(yī)臨床上應(yīng)用十分廣泛。氯胺酮是非人靈長類、貓、豬短時(shí)麻醉的最佳選擇之一，但對兔以及大鼠、小鼠的麻醉效果個(gè)體差異較大。與其他α-2受體激動(dòng)劑（美托嘧啶、賽拉嗪）聯(lián)合用藥時(shí)，在犬、貓、豬、兔、嚙齒類動(dòng)物上均能達(dá)到理想的麻醉效果。使用氯胺酮時(shí)，需要配合阿托品或者格隆溴銨一起使用，以減少唾液的分泌。動(dòng)物注射氯胺酮后會(huì)出現(xiàn)“分離麻醉”，即動(dòng)物對周圍環(huán)境出現(xiàn)了認(rèn)知的錯(cuò)位，這主要是由于氯胺酮抑制了下丘腦的電生理信號傳遞，同時(shí)卻能夠刺激腦葉的活躍度［11］。需要注意的是，與其他麻醉藥相比，動(dòng)物被氯胺酮麻醉后，喉頭反射和角膜反射依舊存在，或者只是一定程度的降低，這會(huì)對氯胺酮的使用量造成一定的誤判。

氯胺酮具有良好的鎮(zhèn)痛效果，且肌內(nèi)注射的鎮(zhèn)痛效果好于腹腔注射。但是氯胺酮溶液的pH值較低，10%的氯胺酮注射液pH值在3.5左右，這容易刺激注射部位的肌肉，導(dǎo)致局部肌肉損傷（在小動(dòng)物身上尤其明顯）。氯胺酮不易與血漿蛋白結(jié)合，進(jìn)入機(jī)體后處于游離狀態(tài)，能夠快速分布到血流豐富的器官中，如大腦、肺臟。同時(shí)氯胺酮脂溶性高，很容易穿透血腦屏障，因此腦內(nèi)的氯胺酮濃度比較高［12］。

氯胺酮主要代謝產(chǎn)物為去甲氯胺酮，呈水溶性，主要通過腎臟排出，因此減少腎臟的尿量分泌能夠減緩氯胺酮的排出，延長氯胺酮的麻醉時(shí)間。氯胺酮可以通過興奮交感神經(jīng)來促進(jìn)心肌的收縮力，增強(qiáng)心搏輸出量，這對于處于麻醉的動(dòng)物尤其重要。在使用氯胺酮麻醉靈長類動(dòng)物時(shí)，對心率幾乎沒有影響［13］。氯胺酮對呼吸的影響與劑量之間有相關(guān)性，但影響也非常小。

1.3 舒泰-50（Zoletil 50）

舒泰-50又稱替拉唑（Telazol），是左拉西泮（Zolazepam）和替來他明（Tiletamine）質(zhì)量比1∶1的混合物，通常能提供30 min左右的外科麻醉時(shí)間。目前，舒泰-50在國內(nèi)為非管制藥物。為增強(qiáng)藥效，降低不良反應(yīng)，舒泰-50常和賽拉嗪或者美托嘧啶聯(lián)合用藥［14］。

舒泰-50中起到麻醉主導(dǎo)作用的是替來他明，作為N-甲基-D-天門冬氨酸（N-Methyl-D-aspartic acid，NMDA）受體抑制劑，在低劑量下對大鼠、小鼠有興奮作用，高劑量下有一定的麻醉效果，但是對兔和豚鼠的麻醉效果不佳［15］。舒泰-50在貓、犬、猴、大鼠體內(nèi)的半衰期分別是2～4 h、1.2 h、1～1.5 h和30～40 min。低劑量舒泰-50對多數(shù)動(dòng)物的血液生化指標(biāo)沒有影響，但是大劑量肌內(nèi)注射可以引起兔體內(nèi)尿素氮和肌酐水平上升［16］。

1.4 阿佛丁（Avertin）

阿佛丁的有效成分為三溴乙醇（Tribromoethanol，TBE），是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為66.7%的叔戊醇溶液。目前，阿佛丁是非管制藥物，使用方便，麻醉時(shí)間短，麻醉起效快，在大鼠、小鼠的胚胎移植過程中應(yīng)用廣泛。

阿佛丁在溶液配制后的放置過程中會(huì)產(chǎn)生毒性，pH下降，生成代謝產(chǎn)物。動(dòng)物注射阿佛丁后胃部和小腸的液體分泌會(huì)增加，有些動(dòng)物還會(huì)出現(xiàn)腸梗阻現(xiàn)象，這可能是導(dǎo)致動(dòng)物死亡的主要原因［17］。阿佛丁對動(dòng)物的呼吸和心臟功能均有抑制作用，且安全范圍窄。由于阿佛丁溶液的不穩(wěn)定性，且不同動(dòng)物個(gè)體對阿佛丁的敏感性差異很大，雌性動(dòng)物敏感性高于雄性動(dòng)物，因此在使用過程中建議現(xiàn)配現(xiàn)用，盡量避免長時(shí)間的保存。

鑒于阿佛丁會(huì)引起動(dòng)物的注射部位出現(xiàn)炎癥或者腹膜炎，會(huì)給動(dòng)物造成比較嚴(yán)重的痛苦，因此建議只在終點(diǎn)麻醉時(shí)使用［17-18］，或者經(jīng)過動(dòng)物倫理委員會(huì)審核并有充足的獸醫(yī)護(hù)理情況下，只在少數(shù)短時(shí)麻醉時(shí)使用。

1.5 丙泊酚（Propofol）

丙泊酚作為臨床上常用的一種全身性麻醉藥，通常以靜脈注射方式用藥，麻醉起效快，麻醉效果確切。丙泊酚的體內(nèi)清除率非常快，在犬、大鼠和豬體內(nèi)大約為50～80 mL·min－1·kg－1，在兔體內(nèi)更快，達(dá)到340 mL·min－1·kg－1。在8周齡的SD大鼠體內(nèi)，活性丙泊酚的有效時(shí)間約5.3 min，在新西蘭白兔體內(nèi)只有2.1 min，這表明丙泊酚對兔的麻醉效果要比其他種屬差［19］。

大鼠注射丙泊酚后會(huì)出現(xiàn)劑量相關(guān)性的血壓下降，但是心臟輸出量和腎臟血量均沒有明顯變化［20］。因此在心血管疾病研究時(shí)，需要避免使用丙泊酚。另外丙泊酚并不能很好地穿透胎盤屏障，羊靜脈注射丙泊酚后，母體濃度是胎兒的3倍，注射1 h后，可以達(dá)到6～9倍的濃度差。同樣胎兒的代謝清除時(shí)間也會(huì)超過母體，因此在動(dòng)物剖宮產(chǎn)時(shí)不建議使用丙泊酚進(jìn)行麻醉［21］。使用丙泊酚（尤其是高劑量）后，小鼠、兔、貓和豬有可能會(huì)出現(xiàn)呼吸暫停，因此在使用丙泊酚時(shí)需要重點(diǎn)關(guān)注動(dòng)物的呼吸監(jiān)護(hù)情況［22］。

1.6 水合氯醛（Chloral hydrate）

水合氯醛在體內(nèi)會(huì)經(jīng)過肝臟乙醇脫氫酶的代謝，形成三氯乙醇（Trichloro-ethanol），該代謝產(chǎn)物是水合氯醛的活性物質(zhì)，同時(shí)也是一種強(qiáng)致癌物［23］。水合氯醛的鎮(zhèn)痛效果非常微弱［24］。在低劑量時(shí)，水合氯醛對心血管的影響較小，但是在麻醉劑量下對心臟和呼吸系統(tǒng)的抑制非常嚴(yán)重［23］。

水合氯醛溶液對黏膜和肌肉組織的刺激性很大，肌內(nèi)注射或者腹腔注射會(huì)造成較為嚴(yán)重的炎癥或壞死［23］。水合氯醛大劑量使用時(shí)會(huì)引起溶血或者出現(xiàn)血尿，重復(fù)給藥會(huì)引起肝臟和腎臟的嚴(yán)重?fù)p傷。而且這種對動(dòng)物機(jī)體的損傷沒有種屬差異。目前，獸醫(yī)臨床和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)已不再推薦使用水合氯醛進(jìn)行動(dòng)物麻醉［25］。但是由于水合氯醛對一些受體刺激較小，在某些特殊的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)中還可能被用到；如果使用水合氯醛，則必須經(jīng)過動(dòng)物倫理委員會(huì)的審批，且有相應(yīng)的減少動(dòng)物痛苦的獸醫(yī)護(hù)理措施。

1.7 烏拉坦（Urethane）

烏拉坦的化學(xué)成分為氨基甲酸乙酯（Ethyl carbamate），易溶于水、乙醇和脂類。烏拉坦常用于神經(jīng)學(xué)研究，因?yàn)槠鋵ι窠?jīng)傳遞的影響較小，且一次注射后可以維持較長時(shí)間的穩(wěn)定麻醉（6～10 h）。烏拉坦麻醉過程中對心肺系統(tǒng)的影響也很小。但是與水合氯醛相似，烏拉坦也是強(qiáng)致癌物質(zhì)［26］。因此，出于職業(yè)衛(wèi)生的考慮，稱量烏拉坦粉末時(shí)需要佩戴防護(hù)口罩和手套，且要在通風(fēng)柜內(nèi)進(jìn)行配制。

烏拉坦對動(dòng)物的血壓和血糖都有影響。雌性Wistar大鼠腹腔注射1.2 g∕kg烏拉坦，可使平均血壓降至95 mmHg，并持續(xù)1 h。禁食后的大鼠注射1.25 g∕kg烏拉坦1 h后，血糖值可由58 mg∕dL（1 mg∕dL=0.055 5 mmol∕L）升高到168 mg∕dL［27］。另外，注射烏拉坦有腸系膜毛細(xì)血管毒性，會(huì)造成腹腔積液，并繼發(fā)腎臟的損傷。另有研究表明，烏拉坦的麻醉效果是通過直接改變神經(jīng)細(xì)胞膜的興奮性，而不是通過干擾神經(jīng)信號傳遞，這會(huì)造成神經(jīng)細(xì)胞的損傷［26］。因此在使用烏拉坦之前要考慮是否有其他可替代的麻醉藥，不建議在存活手術(shù)中使用烏拉坦。

1.8 美托嘧啶（Medetomidine）和賽拉嗪（Xylazine）

美托嘧啶存在兩種異構(gòu)體：右旋美托嘧啶和左旋美托嘧啶。只有右旋美托嘧啶有生物活性，具有麻醉效果。大鼠皮下注射美托嘧啶吸收迅速，血漿濃度在10 min內(nèi)可以達(dá)到峰值；在大腦內(nèi)約15～20 min達(dá)到峰值，濃度是血漿中的5倍。美托嘧啶代謝清除時(shí)間約為1.6 h，對大鼠可以產(chǎn)生良好的麻醉效果，但是對小鼠和兔的效果不明顯［27-28］。

賽拉嗪作為一種α-2受體激動(dòng)劑，很少單獨(dú)使用，通常會(huì)與其他麻醉藥聯(lián)合使用起到麻醉和鎮(zhèn)痛的效果。賽拉嗪對小鼠的麻醉效果很差，且其鎮(zhèn)痛效果在不同品系間的差異也很大。豬對于絕大多數(shù)α-2受體激動(dòng)劑不敏感，使用任何試驗(yàn)劑量的賽拉嗪都不會(huì)對豬產(chǎn)生足夠的鎮(zhèn)靜或鎮(zhèn)痛效果［29］。由于賽拉嗪能夠抑制胰島素的分泌，動(dòng)物注射賽拉嗪會(huì)引起高血糖［30-31］。

這兩種藥物通常會(huì)和氯胺酮或者舒泰-50分別進(jìn)行聯(lián)合用藥，以彌補(bǔ)單一藥物的缺點(diǎn)，將麻醉效果最優(yōu)化。

1.9 異氟烷（Isoflurane）

腦部手術(shù)使用異氟烷可能是最佳的選擇。由于異氟烷能夠擴(kuò)張外周血管，但是對心肌的收縮性抑制作用并不明顯，所以當(dāng)使用異氟烷麻醉時(shí)，動(dòng)物的動(dòng)脈血壓能夠降低，但顱內(nèi)壓力沒有明顯改變。異氟烷對心臟局部缺血性壞死有一定的保護(hù)作用，例如冠狀動(dòng)脈阻塞小鼠模型使用異氟烷麻醉時(shí)，能使阻塞區(qū)域變小［32］。異氟烷分子非常穩(wěn)定，在體內(nèi)只有約0.2%的攝入量發(fā)生代謝，這能極大減少肝臟和腎臟的損傷。在為期12 d的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果表明異氟烷的麻醉效果非常一致［33］。異氟烷對于妊娠或者新生大鼠、小鼠幼崽是安全的，是胚胎移植過程中推薦使用的麻醉劑［34］，同樣也是剪尾采樣和剪腳趾采樣操作時(shí)推薦的麻醉劑。

1.10 乙醚（Ether）

乙醚是非常古老的氣體麻醉劑，在現(xiàn)代非可燃性的高效氣體麻醉劑出現(xiàn)之前應(yīng)用廣泛。

目前，乙醚已不推薦使用，其中一個(gè)重要原因是，當(dāng)空氣中乙醚濃度超過1.8%后極易發(fā)生爆燃。在動(dòng)物麻醉以及蘇醒過程中，甚至動(dòng)物被安樂死后，從動(dòng)物體內(nèi)散發(fā)出的乙醚很容易達(dá)到爆燃的臨界值。除了容易爆燃外，乙醚對呼吸道有很強(qiáng)的刺激性，會(huì)促使呼吸道分泌物增加。

與其他氣體相比，乙醚麻醉起效濃度比較高。使用乙醚麻醉時(shí)，多數(shù)動(dòng)物的最小肺泡濃度（minimum alveolar concentration，MAC）為1.9%，且由于其具有較高的血?dú)夥植枷禂?shù)，需要較長時(shí)間才能從各個(gè)器官中排出，所以動(dòng)物出現(xiàn)過量麻醉后，搶救困難［35］。

2 不同種屬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉

2.1 嚙齒類動(dòng)物（大鼠、小鼠）

影響嚙齒類動(dòng)物如大鼠和小鼠麻醉效果的因素有很多，基因修飾大鼠、小鼠遺傳背景不同，插入或者敲除基因表達(dá)都會(huì)對麻醉效果有影響。飼養(yǎng)環(huán)境對麻醉效果也有不可忽視的影響，比如有些刨花墊料能夠改變肝臟中酶的變化，影響麻醉藥物的體內(nèi)代謝［36］。群養(yǎng)的嚙齒類動(dòng)物麻醉后需要特別注意觀察，直到動(dòng)物能夠完全自主活動(dòng)，因?yàn)槿吼B(yǎng)的嚙齒類動(dòng)物存在社會(huì)等級，低等級的動(dòng)物通常成為被攻擊的對象，尤其在沒有清醒的情況下很可能被啃食。

嚙齒類動(dòng)物由于特殊的胃部生理結(jié)構(gòu)，出現(xiàn)嘔吐的癥狀極其罕見，除非檢測某些生理指標(biāo)時(shí)需要禁食，否則沒有必要麻醉前禁食。由于嚙齒類動(dòng)物代謝速率快，禁食時(shí)間應(yīng)該盡可能縮短，在任何時(shí)候都不應(yīng)該禁水。

在使用注射麻醉藥時(shí)，應(yīng)稱量每只嚙齒類動(dòng)物的體質(zhì)量，根據(jù)體質(zhì)量來計(jì)算使用麻醉藥的劑量，而不應(yīng)該對所有組內(nèi)的嚙齒類動(dòng)物注射相同劑量。這是因?yàn)閲X類動(dòng)物的體質(zhì)量輕，使用的麻醉藥體積也小，很容易過量注射或者注射量不足。尤其是老年組動(dòng)物的個(gè)體生理狀態(tài)差別很大，準(zhǔn)確稱質(zhì)量更加重要。氯胺酮聯(lián)合賽拉嗪或美托嘧啶是嚙齒類動(dòng)物注射麻醉的首選，其中一個(gè)明顯優(yōu)點(diǎn)就是聯(lián)合用藥的麻醉效果可以被下面3種藥物逆轉(zhuǎn)：咪唑克生（Idazoxan）、育亨賓（Yohimbine）或阿替美唑（Atipamezole）［37］。

由于嚙齒類動(dòng)物的體表面積相對較大，麻醉過程中的保溫非常重要，手術(shù)過程中一些細(xì)節(jié)也會(huì)顯著降低動(dòng)物體溫，比如：術(shù)部剃毛、使用乙醇溶液和碘伏等消毒液、動(dòng)物被放置在金屬材質(zhì)的操作臺(tái)面上、操作環(huán)境通風(fēng)量大等。

表1 幾種常用麻醉藥的優(yōu)缺點(diǎn)比較Table 1 Positives and negatives of commonly used anesthetic drugs

2.2 兔

兔是公認(rèn)的麻醉困難的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一。大量文獻(xiàn)報(bào)告，由于種屬、性別、個(gè)體的差異，兔對麻醉劑的敏感性差異巨大［1，17，25］；同時(shí)由于其特殊的解剖結(jié)構(gòu)，插管也非常困難；而且麻醉藥對不同品種兔呼吸系統(tǒng)的抑制作用差異也很大［25］。

兔很容易感染各種病原體，如嗜肺巴斯德桿菌、肺支原體等，會(huì)引起一系列的呼吸系統(tǒng)癥狀，這對兔的麻醉藥耐受性產(chǎn)生一定影響。被感染的兔由于肺功能受損，機(jī)體適應(yīng)了高碳酸狀態(tài)，麻醉后會(huì)出現(xiàn)自主呼吸困難［38］。因此，選擇SPF兔可以排除感染因素對麻醉藥的影響。

兔同大鼠、小鼠一樣，由于胃部構(gòu)造特殊，極少發(fā)生嘔吐。兔的胃部排空時(shí)間非常長，即便禁食5 d，仍有食物留存在胃內(nèi)。另外，由于兔呼吸基本依賴于膈肌，理論上，禁食12 h可有效降低胃內(nèi)容物的體積，避免壓迫膈肌，滿足麻醉的需求。需要注意的是，3 kg以下的兔在禁食的情況下，會(huì)出現(xiàn)血糖快速下降以及體內(nèi)產(chǎn)酸量快速上升，而且體質(zhì)量低于2 kg的兔對酸中毒的代償能力較弱。因此，對于3 kg以下的兔，禁食需要謹(jǐn)慎，禁食時(shí)間不應(yīng)超過12 h，且麻醉前無需禁水［1，39］。

注射部位應(yīng)避開頸部位置，因?yàn)楸６〞r(shí)會(huì)抓取頸部的皮膚。成年新西蘭白兔或荷蘭兔肌內(nèi)注射時(shí)，每次劑量應(yīng)該低于1.0 mL。靜脈注射采用的部位通常為耳緣靜脈，在注射前，尤其是新員工培訓(xùn)時(shí)，建議在注射部位涂抹具有局部麻醉作用的藥物（如利多卡因凝膠），以緩解局部注射的疼痛。

長時(shí)間麻醉或者腸道手術(shù)后，建議給兔口服乳酸桿菌或者健康兔的糞便，這樣能夠顯著改善其腸道菌群［38］。

2.3 小型豬

小型豬容易發(fā)生局部動(dòng)脈血管的痙攣以及心室的心律不齊，由于皮下脂肪較厚，因此很難檢測外周動(dòng)脈的變化。小型豬的肺臟較脆弱，因此在麻醉后需要呼吸機(jī)介入時(shí)，應(yīng)該注意氣體的壓力。

小型豬的麻醉多采用肌內(nèi)注射的方式，注射部位為頸部或后腿肌肉處，尤其是后頸部的肌肉是最佳選擇。小型豬的外周靜脈不容易觀察到，如采用靜脈注射，最好選用耳部靜脈。另外，小型豬麻醉后要特別注意心率的監(jiān)控。小型豬的心率在70～150次∕min，低于70次∕min就需要引起重視［40］。麻醉藥對心率的影響也要考慮，比如芬太尼和賽拉嗪能降低心率，而阿托品能夠提高心率。

2.4 犬

犬作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物歷史悠久，在獸醫(yī)臨床上，犬用麻醉劑的選擇范圍非常廣。同其他大動(dòng)物一樣，麻醉前需要查看歷史健康檢查記錄，動(dòng)物個(gè)體的異常對于麻醉效果有很大影響。此外，麻醉前應(yīng)收集一些基本的生理數(shù)據(jù)，如心率、呼吸頻率、直腸溫度、黏膜顏色以及毛細(xì)血管再充盈時(shí)間等。很多機(jī)構(gòu)都建議麻醉前收集血液學(xué)數(shù)據(jù)，至少包括總蛋白水平和紅細(xì)胞比容。術(shù)前需要6～12 h禁食，在完全蘇醒前不能提供食物［41］。

在誘導(dǎo)麻醉前，打開靜脈通路有幾個(gè)好處：可以進(jìn)行靜脈維持麻醉；有利于補(bǔ)充體液，維持滲透壓平衡，防止水分流失；有利于麻醉意外情況的緊急搶救。靜脈通路常用位置為前肢的頭靜脈，或后肢的隱靜脈，必要時(shí)可以在鎮(zhèn)靜或者麻醉后使用頸部靜脈進(jìn)行留置針的埋置；留置針埋置后，需要使用繃帶進(jìn)行固定，且需要佩戴頭套防止啃咬。

麻醉期間如需要進(jìn)行補(bǔ)液，建議的補(bǔ)液速率為5～10 mL·kg－1·h－1，以維持電解質(zhì)平衡，防止脫水。麻醉過程中需要保溫并進(jìn)行監(jiān)護(hù)，當(dāng)心率持續(xù)低于60次∕min，則需要干預(yù)［41］。

2.5 非人靈長類

實(shí)驗(yàn)用非人靈長類動(dòng)物的種屬覆蓋范圍很廣，從只有幾百克的新大陸猴到重達(dá)50 kg的猩猩均有使用的記錄，因此麻醉藥的選擇以及用藥量差異很大。由于非人靈長類動(dòng)物與人之間存在多種人獸共患病，因此在麻醉時(shí)，需要特別注意生物安全防護(hù)。接觸非人靈長類動(dòng)物的操作人員均應(yīng)該有足夠的培訓(xùn)，能夠充分意識(shí)到人畜共患病的危害［40］。

為防止嘔吐物進(jìn)入肺部，非人靈長類動(dòng)物在麻醉前通常禁食12 h，其中新大陸猴（狨猴和絹毛猴）由于體質(zhì)量較輕，通常禁食6～8 h。禁水既不能降低胃內(nèi)容物量，也不能升高體液pH值，因此不建議麻醉前禁水。

表2 常見種屬不同麻醉藥的推薦使用方法Table 2 Recommended usage of common anesthetic drugs

3 小結(jié)和展望

沒有一種麻醉藥物可以適用于所有動(dòng)物，也沒有一種麻醉藥物是沒有缺點(diǎn)的。每種麻醉藥物的麻醉效果與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理狀態(tài)，以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對疼痛的感知程度密切相關(guān)。因此選用麻醉藥時(shí)，需要重點(diǎn)考慮動(dòng)物的生理特點(diǎn)和動(dòng)物種屬特性，以及科研目的。以戊巴比妥鈉為例，同樣劑量下，雌性NZW小鼠的麻醉時(shí)間為50 min，而在DBA小鼠則長達(dá)250 min。環(huán)境因素也會(huì)影響麻醉時(shí)長，包括飲食、環(huán)境溫度、墊料等。例如，環(huán)境溫度為18℃時(shí)，BALB∕c小鼠腹腔注射60 mg∕kg戊巴比妥鈉后，麻醉時(shí)長為195 min；而環(huán)境溫度為26℃時(shí)，麻醉時(shí)間縮短為100 min［43］。動(dòng)物在懷孕狀態(tài)下進(jìn)行麻醉，無論使用的麻醉藥物能否穿過胎盤屏障，都需要謹(jǐn)慎；而且在懷孕時(shí)，母體的生理狀態(tài)如生理負(fù)荷、激素水平都有很大差異，這會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物對麻醉藥的敏感性不同。

動(dòng)物的健康狀態(tài)需要在麻醉前進(jìn)行詳細(xì)評估。雖然在實(shí)際操作中，對嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行全面體檢很難實(shí)現(xiàn)，但是一些基本的情況應(yīng)該評估到，如荷瘤狀態(tài)、警覺性、脫水與否等，這些都會(huì)對麻醉效果以及麻醉后的恢復(fù)產(chǎn)生影響。

注射方式對麻醉藥效果的影響也很大。嚙齒類動(dòng)物常用腹腔注射，而對大動(dòng)物則最常用的是肌內(nèi)注射和靜脈注射。在任何動(dòng)物上，都不推薦皮下注射，因?yàn)槠は伦⑸浜螅樽硭幍恼T導(dǎo)期會(huì)變長，而且起效時(shí)間不一致。

氣體麻醉時(shí)，通常使用精密的揮發(fā)罐將麻醉氣體和氧氣進(jìn)行混合，然后通入待麻醉動(dòng)物的呼吸系統(tǒng)起作用。不同麻醉氣體的沸點(diǎn)是不同的。常用麻醉氣體中，只有異氟烷和氟烷（Halothane）具有非常接近的沸點(diǎn)，可以共用揮發(fā)罐；而其他麻醉氣體必須有專門的揮發(fā)罐。如果將不同麻醉氣體混合在同一個(gè)揮發(fā)罐內(nèi)使用，會(huì)無法確定輸出的麻醉氣體濃度。使用氣體麻醉時(shí)，需要特別注意麻醉廢氣對操作人員健康的影響。如麻醉操作在有硬管連接到外部的安全柜（II級，B2型）內(nèi)操作時(shí)，可以不用考慮廢氣回收；其他情況下，都需要將麻醉盒連接至活性炭吸附裝置或者負(fù)壓抽氣系統(tǒng)。需要注意的是，活性炭過濾網(wǎng)對于一氧化氮的吸附效果很差；另外，吸附管需要定期更換，以確保不超過其吸附容量。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獸醫(yī)對麻醉相關(guān)知識(shí)的儲(chǔ)備非常重要。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獸醫(yī)需要知道所使用藥物的優(yōu)缺點(diǎn)和常見的不良反應(yīng)，并熟知被麻醉動(dòng)物的生理特性，從而利用這些知識(shí)審核實(shí)驗(yàn)方案，培訓(xùn)員工，協(xié)助實(shí)驗(yàn)人員麻醉，保障動(dòng)物福利，提高效率。尤其是在培訓(xùn)員工方面特別重要，因?yàn)閷?shí)際操作過程中，對動(dòng)物進(jìn)行麻醉的通常是實(shí)驗(yàn)人員而不是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獸醫(yī)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獸醫(yī)主要起到監(jiān)督的作用，此時(shí)需要保證操作人員得到足夠的培訓(xùn)。

總之，影響麻醉藥物的麻醉效果因素眾多，多數(shù)麻醉藥對動(dòng)物各項(xiàng)生理指標(biāo)都有影響，能夠直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利。因此在麻醉的選擇上應(yīng)充分考慮麻醉藥的儲(chǔ)存要求、使用方法，以及麻醉藥在不同種屬上的差異，不同麻醉藥對動(dòng)物生理指標(biāo)的影響，同時(shí)結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)康模x擇最適合的麻醉藥。

[作者貢獻(xiàn)]

盧曉：負(fù)責(zé)文章的材料收集和整理，并結(jié)合實(shí)踐進(jìn)行文章撰寫；

于靈芝：負(fù)責(zé)部分英文材料的翻譯，以及材料整理；

周聰穎：對全文的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性進(jìn)行確認(rèn)，并修改英文摘要；

李如穎、陳文君：提供第一線的實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)，并提出修改建議；

江善祥：對全文內(nèi)容提供指導(dǎo)。

[利益聲明]所有作者均聲明本文不存在利益沖突。