化療聯合免疫治療晚期惡性腫瘤對外周血T淋巴細胞亞群水平的影響

張玉鋒

（北京市仁和醫院腫瘤科，北京 102600）

惡性腫瘤有著較高的死亡率和發病率，誘發因素較多，如生活習慣、飲食習慣、遺傳因素、免疫因素等，惡性腫瘤疾病的臨床表現多因其所在部位、器官及發展程度差異而不同，但大部分惡性腫瘤疾病早期臨床癥狀多缺乏特異性，而當特異性癥狀發生時，腫瘤往往已處于晚期。目前我國對惡性腫瘤疾病的治療以外科手術及放化療為主，其中手術切除多適合早期或較早期的實體腫瘤患者，該類患者有一定治愈的可能；化療是手術治療效果欠佳及復發、轉移患者首選的治療手段，通過抗癌藥物殺死癌細胞，能抑制癌細胞生長及DNA復制，可阻止染色體分離，抗腫瘤效果顯著，但化療可引起諸多毒副反應，且可降低患者免疫力，影響預后。免疫治療是一種新興的治療手段，在抗腫瘤的同時，可提高患者免疫力，改善預后[1]。有研究指出，免疫細胞參與腫瘤細胞的發生發展，其中以影響T淋巴細胞亞群的作用最為顯著，通過檢測T淋巴細胞亞群可評估患者機體細胞免疫功能，有助于療效預測及預后評估[2-3]。近年臨床發現化療聯合免疫治療用于惡性腫瘤疾病患者治療取得了顯著成果，但目前臨床關于化療聯合免疫治療用于惡性腫瘤患者治療中對外周血T淋巴細胞亞群的影響尚存在爭議[4]。因此，本研究對此展開研究，旨在為臨床提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年12月至2021年6月北京仁和醫院收治的70例惡性腫瘤患者為研究對象進行回顧性分析，根據不同治療方案分為觀察組（39例）和對照組（31例）。觀察組患者中男性20例，女性19例；年齡30～71歲，平均年齡（54.36±1.23）歲；腫瘤類型：胃癌4例，非小細胞肺癌18例，食管癌5例，結直腸癌12例。對照組患者中男性19例，女性12例；年齡33～72歲，平均年齡（53.84±1.25）歲；腫瘤類型：胃癌3例，非小細胞肺癌16例，食管癌3例，結直腸癌9例。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經北京市仁和醫院倫理委員會批準。診斷標準：均經組織病理學診斷，且符合美國癌癥聯合委員會（AJCC）分期標準為腫瘤Ⅳ期者[5]。納入標準：①術前經內鏡、病理檢查確診且符合AJCC分期標準者；②年齡≥30歲；③既往無手術、放療、化療及生物免疫治療史者；④預計生存時間≥3個月者；⑤均為意識清楚者。排除標準：①伴其他免疫系統疾病者；②哺乳期、孕期女性；③近3個月內行新輔助治療者；④長期或近30 d內服用過免疫抑制劑者；⑤有癥狀的腦轉移者；⑥惡性淋巴瘤者；⑦存在EGFR、ALK基因突變的非小細胞肺癌者；⑧伴精神疾病史者。

1.2 研究方法 對照組患者行單一化療治療，根據不同腫瘤類型采用不同化療方案，其中主要化療藥物包括：注射用順鉑（齊魯制藥有限公司，國藥準字H20023460，規格：10 mg/支）、注射用鹽酸吉西他濱（南京正大天晴制藥有限公司，國藥準字H20093403，規格：0.2 g/支）、注射用鹽苷酸吉西他濱（南京正大天晴制藥有限公司，國藥準字H20093404，規格：1.0 g/支）、奧沙利鉑注射液（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，國藥準字H20213312，規格：100 mL:50 mg）、氟尿嘧啶注射液（天津金耀藥業有限公司，國藥準字H12020959，規格：10 mL:0.25 g）、紫杉醇注射液（四川江匯宇制藥股份有限公司，國藥準字H20203702，規格：5 mL:30 mg）等。觀察組患者采用化療聯合信迪利單抗注射液[信達生物制藥(蘇州)有限公司，國藥準字S20180016，規格：10 mL:100 mg]免疫治療，治療前用氯化鈉注射液沖洗輸液管道，根據腫瘤類型給予靜脈輸注2 mg/kg或3 mg/kg信迪利單抗，輸注時間30～60 min，2～3周為1個治療周期。①標本采集：均于患者第1次化療前和化療2個周期后采集外周血標本，于清晨空腹下采集2 mL肘靜脈血，經EDTA常規抗凝處理，3 000 r/min離心10 min，取上清液，于-80 ℃中保存，2 h內送入檢驗科待檢。②實驗室檢查：采用流式細胞儀[深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司，粵食藥監械(準)字2014第2400295號，型號：BriCyte E6]檢測外周血T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）表達水平。

1.3 觀察指標 ①比較兩組患者治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水 平。 ② 比 較 不 同 類型腫瘤患者化療聯合免疫治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.4 統計學分析 采用SPSS 21.0軟件進行數據處理，計量資料以（）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內比較采用配對樣本t檢驗；計數資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較 兩組患者治療前CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者治療后CD4+、CD4+/CD8+水平高于治療前，CD8+水平低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05），CD3+水平與治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；觀察組患者治療后CD4+、CD4+/CD8+水平均高于對照組，CD8+水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），CD3+水平與對照組比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（）

表1 兩組患者治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05。

組別 例數 CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 39 58.32±0.22 60.81±1.63 27.23±4.7942.53±5.45* 43.03±3.8720.21±4.44* 0.83±0.381.16±0.81*對照組 31 58.41±0.26 60.64±1.72 27.36±4.6236.48±4.95* 43.15±3.8626.33±4.64* 0.78±0.310.83±0.45*t值 1.568 0.422 0.114 4.802 0.129 5.615 0.592 2.030 P值 0.121 0.673 0.909 0.000 0.897 0.000 0.555 0.046

2.2 不同類型腫瘤患者化療聯合免疫治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較 非小細胞肺癌、胃癌、食管癌、結腸癌患者治療后CD4+、CD4+/CD8+水平均高于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05），CD8+水平低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05），CD3+水平與治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 不同類型腫瘤患者化療聯合免疫治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（）

表2 不同類型腫瘤患者化療聯合免疫治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較（）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05。

類型 例數 CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后非小細胞肺癌 18 59.58±0.6259.96±0.68 28.36±3.4244.98±4.08*46.33±4.4221.87±2.11* 0.91±0.211.38±0.84*t值 1.751 13.244 21.188 2.302 P值 0.088 0.000 0.000 0.027胃癌 4 59.79±1.3260.61±1.92 28.32±3.2143.86±4.16*45.47±4.3522.11±2.72* 0.92±0.191.51±0.32*t值 0.703 5.914 9.106 3.170 P值 0.507 0.001 0.001 0.019食管癌 5 58.72±0.2660.19±2.93 30.69±1.1748.71±4.23*45.51±5.2120.55±6.19* 1.01±0.121.26±0.18*t值 1.117 9.181 6.898 2.584 P值 0.296 0.000 0.000 0.032結腸癌 12 59.13±1.3260.21±1.35 30.82±1.3647.18±4.81*43.22±3.3922.03±2.12* 0.86±0.121.38±0.11*t值 1.981 11.337 18.358 11.065 P值 0.060 0.000 0.000 0.000

3 討論

惡性腫瘤死亡率較高，近年隨著人們生活習慣及飲食習慣的改變，惡性腫瘤發病率顯著上升且有著年輕化趨勢。部分惡性腫瘤具有一定的隱蔽性，如胃癌，早期極易與其他胃部疾病混淆，耽誤患者最佳治療時機，在確診時往往已發展為晚期惡性腫瘤，增加治療難度及死亡風險。近年臨床對晚期惡性腫瘤治療多采用化療干預，雖對患者體內擴散的癌細胞起到一定治療作用，但部分患者有嚴重的毒副反應，易發生免疫功能下降等，且部分患者預后較差[6]。隨著醫學技術的飛速發展，目前免疫療法逐漸受到臨床關注，其中PD-1單抗免疫療法是一種新型的免疫治療方案，在諸多惡性腫瘤疾病晚期患者治療中取得一定療效。

免疫系統始終參與腫瘤發生發展過程，有學者認為，免疫系統可檢測和消除腫瘤細胞[7]。也有研究表示，免疫功能不全或獲得性免疫缺陷者，更容易患某些特定類型的腫瘤[8]。細胞免疫在抗腫瘤中發揮主要作用，其中以T淋巴細胞亞群作用最為顯著，CD3+表示全部T細胞；CD4+為輔助性T淋巴細胞，能輔助B細胞產生抗體，具有免疫監視作用，促進分泌白細胞介素，激活自然殺傷細胞，達到抗腫瘤的效果；CD8+為一種抑制性T淋巴細胞，可抑制免疫反應，CD4+與CD8+在正常情況下保持一定的平衡比例，可維持機體免疫功能正常運作。當CD4+/CD8+比值降低，提示患者體內存在免疫調節功能紊亂及免疫抑制情況。故通過檢測惡性腫瘤疾病患者治療前后外周血T淋巴細胞亞群變化，可為判斷、評估患者治療效果和預后提供一定的數據支持。

化療藥物為細胞毒性藥物，是目前惡性腫瘤疾病最主要的治療手段之一，可殺傷腫瘤細胞，起到一定的抗腫瘤作用，但化療藥物對正常增殖和分化細胞也有一定的殺傷作用，可減少淋巴細胞，故有研究認為，惡性腫瘤患者在化療治療的同時，機體免疫功能也在進一步降低[9]。信迪利單抗是臨床常用的PD-1單抗藥物，可通過提高機體免疫力來增強抗腫瘤效果，改善患者預后，與PD-1結合后可阻斷PD-1與PDL2、PD-L1結合，消除對T細胞的抑制，解除因化療等因素引起的免疫抑制效應，增強T細胞對腫瘤細胞的滅殺能力。有研究指出，在常規化療基礎上聯合信迪利單抗免疫療法可提高惡性腫瘤患者臨床療效，改善免疫功能，增強免疫力[10]。分析原因，在化療基礎上，信迪利單抗免疫治療可通過激活T細胞，提高對腫瘤細胞的殺傷能力，且在一定程度上可延緩腫瘤復發，提升治療效果，延長患者的生存周期。本研究，觀察組患者治療后CD4+、CD4+/CD8+水平均高于對照組，CD8+水平低于對照組，表明在化療基礎上聯合免疫療法，能有效改善患者免疫能力，提高患者免疫功能。本研究結果顯示，非小細胞肺癌、胃癌、食管癌、結腸癌患者在治療后CD4+、CD4+/CD8+水平均較治療前升高，CD8+水平低于治療前，進一步表明，化療聯合免疫治療可改善患者免疫功能，同時通過檢測外周血T淋巴細胞亞群變化能對惡性腫瘤疾病患者化療效果評估提供一定的數據支持，有助于患者預后判斷，對患者進一步治療方案的制定也有重要的參考意義。本研究中，兩組治療前后CD3+均無明顯變化，且觀察組不同腫瘤類型患者CD3+治療前后也無明顯變化，或與研究時間、樣本量大小等有關。

綜上所述，惡性腫瘤患者應用化療聯合免疫治療可改善其免疫力，但本研究所選樣本量較小，在今后可適當擴大樣本量深入研究，為此領域提供客觀理論支持。