血清TK1 和sCD30 水平與T 細胞淋巴瘤患者臨床特征的相關(guān)性

王欣，梁艷麗，李艷秋

T 細胞非霍奇金淋巴瘤（T-non-Hodgkinlymphoma，T-NHL）是血液科常見惡性腫瘤，病因復(fù)雜，多認為與感染、遺傳、免疫功能異常等因素有關(guān)，且流行病學調(diào)查顯示，T-NHL 發(fā)病率逐年增高［1］。目前，全身化療是T-NHL 主要治療手段，可延長患者生存時間，但相關(guān)研究顯示，腫瘤臨床分期、免疫學等多種因素與患者預(yù)后有關(guān)［2］。因此，明確T-NHL患者臨床特征，對指導個體化治療意義重大。胸苷激酶1（thymidine kinase 1，TK1）是一種細胞周期相關(guān)酶，主要表達于分裂細胞胞質(zhì)中，當正常細胞組織增殖或惡變時，TK1 會被大量釋放入血，導致血清TK1 水平升高［3］。有研究顯示，TK1 在胃癌、肺癌等多種惡性腫瘤中均有重要作用，且可結(jié)合其他腫瘤標志物評估患者預(yù)后［4］。可溶性CD30（sCD30）是重要免疫活性指標，可反映機體免疫情況，相關(guān)研究表明，sCD30 過表達可能是T-NHL 發(fā)生的危險因素［5］。結(jié)合上述研究猜測，TK1 和sCD30 可能與T-NHL 患者臨床特征存在一定關(guān)系。本研究通過觀察T-NHL 患者血清TK1 和sCD30 表達情況，分析血清TK1 和sCD30 表達與T-NHL 患者臨床特征的關(guān)系，以指導未來對疾病的早期合理干預(yù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集遂寧市中心醫(yī)院2016 年9 月至2019 年10 月收治的32 例T-NHL 患者資料進行回顧性分析。 32 例患者中男17 例，女15 例；年齡（61.65±3.68）歲，范圍44～78 歲；體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）為21.13±1.34，范圍17.3～24.8。本研究的實施經(jīng)過遂寧市中心醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 入選標準

（1）納入標準：①T-NHL 符合《內(nèi)科學（第8版）》［6］中疾病相關(guān)診斷標準，且經(jīng)穿刺活檢或手術(shù)病理檢查確診；②均為初次檢查發(fā)現(xiàn)；③影像學檢查、病理檢查、實驗室檢查等資料均完整。（2）排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②哺乳或妊娠期患者；③合并免疫系統(tǒng)疾病。

1.3 方法

1.3.1 臨床特征判斷 收集所有T-NHL 患者穿刺活檢或手術(shù)病理檢查結(jié)果和病例資料等，觀察患者臨床特征，包括：臨床分期（參照Ann Arbor 分期標準［7］評估，Ⅰ期：腫瘤侵犯單個淋巴結(jié)區(qū)域或侵犯單個結(jié)節(jié)外部位；Ⅱ期腫瘤侵犯≥2 個淋巴結(jié)區(qū)域，但侵犯部位均在膈肌同側(cè)，或同側(cè)存在局限性結(jié)外侵犯；Ⅲ期：腫瘤侵犯膈肌上下淋巴結(jié)，同時存在局限性結(jié)外侵犯或侵犯脾臟；Ⅳ期：腫瘤侵犯淋巴結(jié)、脾臟、咽淋巴環(huán)，同時侵犯一個或多個結(jié)外器官，伴有或不伴有淋巴結(jié)腫大表現(xiàn)）、淋巴結(jié)外浸潤（經(jīng)增強CT 或PET-CT 檢查得知，腫瘤細胞侵襲至淋巴結(jié)外器官或組織）、全身癥狀［存在發(fā)熱（不明原因體溫≥38℃）、消瘦（6 個月內(nèi)體重不明原因降低≥10%）、盜汗（入睡后汗出異常，醒后汗泄）等］。

1.3.2 血清TK1 和sCD30 水平檢測 采集TNHL 患者入院時清晨空腹肘部靜脈血5 ml，置于4℃冰箱內(nèi)靜置1 h 后，采用全自動低速離心機（上海盧湘儀離心機儀器有限公司，型號：TD5M）以3 000 r/min 轉(zhuǎn)速離心10 min（離心半徑8 cm），取上層血清待檢；采用免疫增強化學發(fā)光法檢測血清TK1 水平，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測血清sCD30 水平，檢測試劑盒均購自上海江萊生物科技有限公司，檢驗流程嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 23.0 軟件進行數(shù)據(jù)處理，全部計量資料均經(jīng)Shapiro-Wilk 正態(tài)性檢驗，符合正態(tài)分布的計量資料采用均數(shù)±標準差（±s）表示，不同臨床分期、淋巴結(jié)外浸潤、全身癥狀T-NHL 患者血清TK1 和sCD30 水平比較采用獨立樣本t檢驗；不同T 細胞淋巴瘤病種分類T-NHL 患者血清TK1 和sCD30 水平比較采用單因素方差分析檢驗；經(jīng)單項Logistic 回歸分析，并建立Logistic 多元回歸模型，分析血清TK1 和sCD30 水平對T-NHL 患者臨床分期的影響；繪制受試者工作曲線（ROC），并計算曲線下面積（AUC），以檢驗血清TK1 和sCD30 水平預(yù)測臨床高分期風險的價值，AUC 值＞0.9 表示預(yù)測性能較高，0.70～0.90 表示有一定預(yù)測性能，0.50～0.70 表示預(yù)測性能較差。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床特征情況

32 例T-NHL 患者中臨床分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別為4 例、2 例、16 例、10 例，淋巴結(jié)外浸潤11 例（其中Ⅲ期5 例，Ⅳ期6 例），伴有全身癥狀22 例（其中Ⅲ期9 例，Ⅳ期13 例），T 細胞淋巴瘤包括血管免疫母T 細胞淋巴瘤8 例（Ⅰ期4 例，Ⅱ期2 例，Ⅲ期2 例），外周T 細胞淋巴瘤，非特指16 例（Ⅲ期10 例，Ⅳ期6 例），間變性淋巴瘤激酶（ALK）陽性間變T 細胞淋巴瘤1 例（Ⅲ期1 例），ALK 陰性間變T 細胞淋巴瘤2 例（Ⅲ期2 例），NK/T 細胞淋巴瘤5 例（Ⅲ期1 例，Ⅳ期4 例）。見表1。

表1 32 例T-NHL 患者臨床特征情況

2.2 不同臨床特征T-NHL 患者血清TK1 和sCD30 水平比較

有淋巴結(jié)外浸潤、全身癥狀、不同病理類型T細胞淋巴瘤患者血清TK1 和sCD30 水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；Ⅲ/Ⅳ期患者血清TK1 和sCD30 水平均高于Ⅰ/Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2、3。

表2 不同臨床特征T-NHL 患者血清TK1 水平比較（pmol/L，± s）

表2 不同臨床特征T-NHL 患者血清TK1 水平比較（pmol/L，± s）

注：T-NHL 為T 細胞非霍奇金淋巴瘤，TK1 為胸苷激酶1，ALK 為間變性淋巴瘤激酶，NK/T 細胞為自然殺傷細胞/T 淋巴細胞

項目臨床分期臨床特征Ⅰ/Ⅱ期Ⅲ/Ⅳ期t/F 值3.869 P 值0.001淋巴結(jié)外浸潤1.986 0.056全身癥狀有無有無1.309 0.201 T 細胞淋巴瘤病種分類血管免疫母T 細胞外周T 細胞，非特指ALK 陽性、陰性間變T 細胞NK/T 細胞例數(shù)6 26 11 21 22 10 8 16 0.014 0.998 3 5 TK1 1.33±0.68 2.56±0.71 2.67±0.73 2.15±0.69 2.44±0.73 2.08±0.70 1.24±0.65 1.28±0.64 1.25±0.67 1.22±0.68

2.3 血清TK1 和sCD30 表達對T-NHL 患者臨床分期的影響

經(jīng)單項Logistic 回歸分析并建立Logistic 多元回歸模型分析結(jié)果顯示，血清TK1 和sCD30 過表達可能是T-NHL 患者臨床分期的影響因素（OR＞1，P＜0.05）。見表4。

表3 不同臨床特征T-NHL 患者血清sCD30 水平比較（kU/L，± s）

表3 不同臨床特征T-NHL 患者血清sCD30 水平比較（kU/L，± s）

注：T-NHL 為T 細胞非霍奇金淋巴瘤，T 細胞為T 淋巴細胞，NK/T 細胞為自然殺傷細胞/T 淋巴細胞，ALK 為間變性淋巴瘤激酶

項目臨床分期臨床特征Ⅰ/Ⅱ期Ⅲ/Ⅳ期t/F 值4.309 P 值＜0.01淋巴結(jié)外浸潤2.010 0.054全身癥狀有無有無1.490 0.147 T 細胞淋巴瘤病種分類血管免疫母T 細胞外周T 細胞，非特指ALK 陽性、陰性間變T 細胞NK/T 細胞例數(shù)6 26 11 21 22 10 8 16 0.086 0.967 3 5 sCD30 131.52±10.24 153.24±11.30 154.51±11.33 146.37±10.65 153.24±11.62 146.81±10.58 128.54±10.62 129.65±11.32 132.25±10.34 130.25±11.32

表4 血清TK1 和sCD30 表達對T-NHL 患者臨床分期的影響

2.4 血清TK1 和sCD30 水平預(yù)測T-NHL 患者臨床高分期價值

繪制ROC 曲線，結(jié)果顯示，當血清TK1 和sCD30 的截斷值（cut-off 值）分別取1.375 pmol/L、130.245 kU/L 時，預(yù)測T-NHL 患者臨床高分期風險價值的AUC 分別為0.872、0.888，有一定預(yù)測價值。相關(guān)預(yù)測參數(shù)見圖1、表5。

表5 血清TK1 和sCD30 水平預(yù)測T-NHL 患者臨床高分期風險價值分析結(jié)果

圖1 血清TK1 和sCD30 單獨及聯(lián)合預(yù)測T-NHL 患者臨床高分期風險價值的ROC 曲線圖

3 討論

T-NHL 惡性程度高，盡早明確疾病的臨床特征，對擬定個體化治療方案、促進患者康復(fù)具有重要意義［8］。隨著分子生物學的深入研究，多種細胞因子被證實在惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用［9］。因此，積極找出可評估T-NHL 腫瘤惡性增殖程度的相關(guān)指標，對指導早期干預(yù)意義重大。

TK1 是一種特殊激酶，該酶可將胸苷催化為1-磷酸胸苷酸，促進腫瘤細胞DNA 合成，正常情況下，TK1 表達量受細胞周期調(diào)控，且與腫瘤細胞DNA 合成情況呈正比［10-11］。但研究顯示，正常細胞組織代償增生或腫瘤細胞惡性增殖時，血清TK1 水平會大幅升高，甚至超過TK1 正常水平的2～10 倍，而在無增殖性的細胞中，血清TK1 幾乎不表達［12］。Zhu 等［13］研究發(fā)現(xiàn)，胰腺導管細胞癌組織中TK1 含量高于癌旁組織，且TK1 含量與胰腺導管細胞癌臨床分期、單一T 分期存在一定關(guān)系。2014 年，Niaman 等［14］研究顯示，小細胞肺癌與非小細胞肺癌患者血清TK1 水平存在差異，且血清TK1 可用于評估2 種肺癌患者預(yù)后。結(jié)合上述研究結(jié)果猜測，血清TK1 可能與T-NHL 患者臨床特征存在聯(lián)系。本研究結(jié)果顯示，高分期的T-NHL 患者血清TK1 水平均高于低分期T-NHL 患者。經(jīng)Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，血清TK1 過表達可能是T-NHL 患者臨床分期的影響因素。原因是TK1 水平會隨著機體出現(xiàn)大量增殖細胞而快速升高，是臨床評估腫瘤細胞增殖度的標志物，具有較高的特異度和靈敏度，而T-NHL 患者臨床分期越高，腫瘤細胞增殖越嚴重，TK1 水平也越高。進一步繪制ROC 曲線發(fā)現(xiàn)，血清TK1 預(yù)測T-NHL 患者臨床高分期風險有一定價值，當血清TK1 取1.375 pmol/L 時，提示T-NHL 患者臨床高分期高風險，且隨水平升高風險增加。

sCD30 是一種分布在活化T 細胞、自然殺傷細胞等細胞表面的Ⅰ型膜貫通性糖蛋白，正常情況下，sCD30 低表達，但T 細胞大量激活時，sCD30 表達量顯著增高，且可能會導致機體免疫應(yīng)答障礙［15-16］。因免疫失調(diào)是多種惡性腫瘤發(fā)生的主要因素，且可能與T-NHL 發(fā)生存在一定關(guān)系，故考慮可將sCD30 用于評估T-NHL 發(fā)生風險［17］。2015 年，Purdue 等［18］研究發(fā)現(xiàn)，隨著血清sCD30 水平升高，T-NHL 發(fā)生風險顯著增加。謝瑜等［19］研究發(fā)現(xiàn)，sCD30 對T-NHL 具有一定診斷價值，且不同臨床特征T-NHL 患者血清sCD30 水平存在差異。由此猜測，血清sCD30 對T-NHL 發(fā)生風險評估具有較高價值，且可能與T-NHL 患者臨床特征存在一定關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，Ⅲ/Ⅳ期T-NHL 患者血清sCD30 水平均高于Ⅰ/Ⅱ期患者；經(jīng)Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，血清sCD30 過表達是T-NHL 患者臨床分期的影響因素。進一步繪制ROC 曲線發(fā)現(xiàn)，血清sCD30 預(yù)測T-NHL 患者臨床Ⅲ/Ⅳ期風險有一定價值，當血清sCD30 取130.245 kU/L 時，提示T-NHL 患者臨床高分期高風險，且隨水平升高風險增加，證實了上述猜測。本研究還發(fā)現(xiàn)，血清TK1 和sCD30 聯(lián)合檢測預(yù)測T-NHL 患者臨床高分期風險價值高于各項單一預(yù)測，故臨床可考慮將2者聯(lián)合檢測，以提高臨床對T-NHL 患者臨床特征分析鑒別的準確性，并指導臨床干預(yù)。還有研究顯示，T-NHL 患者預(yù)后與腫瘤侵襲程度息息相關(guān)［20］。但本研究并未探討不同腫瘤侵襲度患者血清TK1和sCD30 水平差異，這是本研究的局限性，未來仍需開展大樣本量的前瞻性研究加以驗證。

綜上所述，T-NHL 患者臨床分期可能與血清TK1 和sCD30 過表達有關(guān)，未來可考慮通過檢測血清TK1 和sCD30 水平變化，指導T-NHL 患者的早期臨床特征分析與合理干預(yù)，可能對改善T-NHL 患者的預(yù)后有積極意義。