非洲豬瘟防控下的豬流行性腹瀉返飼馴化成功案例探討

王 蘭 ，劉勝敏 ，李 智 ，曲向陽 ，任夫波

（1.海南農墾草畜豬業有限公司，海南 海口 570125；2.南京博維特健康管理有限公司，江蘇 南京 210031）

豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhoea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine Epidemic Diarrhoea Virus，PEDV）引起的一種主要導致仔豬腹瀉、嘔吐、脫水，嚴重者死亡的腸道傳染性疾病。該病對各年齡階段豬只均易感，尤其是對哺乳仔豬，具有高發病率，高死亡率的特征。當前，針對PED的防控仍然以采用疫苗免疫和生物安全為主，但由于PEDV變異毒株的流行，疫苗免疫對各場豬群的保護力參差不齊。盡管非洲豬瘟（ASF）進入中國以來，規模化豬場對生物安全的防控不斷升級，但非洲豬瘟發生以后的復產及新建豬場引種需求增加，引種后母豬沒有進行PED的馴化或免疫，當PEDV進入豬場以后，仍然導致發病嚴重，損失慘重。

1 豬流行性腹瀉（PED）

PED作為一種急性傳染性腹瀉病，其在國內的流行已經給養豬業造成嚴重的經濟損失。1978年，比利時研究人員通過電鏡檢測腹瀉仔豬腸道內的病毒粒子確認引起PED的病原是一種新型冠狀病毒，并命名為CV777。PEDV病毒顆粒由囊膜和核衣殼兩部分組成，囊膜上有許多從核心向外呈放射狀排列的花瓣樣纖突，纖突長約18～23 nm，形似皇冠，確如其名。PEDV基因組屬于不分節段、具有侵染性的單股正鏈RNA。

PEDV的 S蛋白是病毒的主要結構蛋白，在病毒識別宿主細胞、促進病毒粒子和細胞表面受體結合以及促進病毒和細胞膜的融合過程、刺激宿主體內產生中和抗體、決定病毒的體外培養適應力以及病毒在體內的致弱方面發揮重要作用。

PEDV主要侵染豬的腸道消化系統，當病毒經口鼻途徑進入宿主體內并突破腸道內物理屏障后，其主要寄居于豬小腸內，與小腸上皮細胞表面的特異性受體結合后，通過膜融合的方式進入宿主細胞并在24 h內進行大量復制，進而破壞豬小腸上皮細胞的正常形態，引起腸絨毛萎縮、變短和脫落，同時導致腸壁出現充血，變薄、透明,并腸內充滿淡黃色液體。

PEDV作為導致仔豬腹瀉的主要傳染性病原，因其引起的臨床癥狀和病理變化與豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）及近些年新發現的豬δ-冠狀病毒（PDCoV）很相似，又常常與引起腹瀉的其他病原混合感染，故難以進行區分，所以對于PEDV引起的豬流行性腹瀉的診斷不能單純地以臨床癥狀和病理變化為判斷依據，必須借助相關的實驗室技術進行鑒別診斷。

當前的流行病學調查表明，PED的暴發主要與豬和相關人員的流動有很大關系，而豬場一旦暴發PED，并沒有特效的措施進行及時有效的根除治療。因此，對于PED的防控手段主要還是依靠疫苗免疫和加強生物安全管理。已商品化應用的PED疫苗主要有PED弱毒活疫苗、細胞滅活苗和新型基因工程疫苗。

2 案例分享

2.1 發病背景

2021年3月，海南某地區新建存欄5 600頭商品母豬場投產不久，分娩舍新生仔豬出現嚴重腹瀉，脫水死亡，傳播迅速，經實驗室檢測確定感染PEDV；由于該場引種后備母豬未進行過PED的馴化或疫苗免疫，為PEDV陰性豬場。暴發PED后，腹瀉癥狀在產房迅速蔓延，脫水死亡仔豬與日俱增，同時該豬場未來一個月有2 000頭后備母豬待分娩，急需采取緊急措施來控制PED的發生。

2.2 臨床初步診斷

3月17日下午分娩一區4單元，有8窩仔豬出現吐奶腹瀉，18日上午，仔豬腹瀉嚴重，當天該單元累計有18窩仔豬腹瀉。同時，分娩一區3單元出現5窩仔豬腹瀉，5單元有10窩仔豬吐奶腹瀉（圖1），后備豬舍母豬同樣出現水樣腹瀉且采食下降（圖2）。初步判斷可能是由于病毒性感染導致的腹瀉。能夠導致仔豬嚴重腹瀉的病毒主要包括 PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV等，這幾種病毒引起的臨床癥狀很相似，僅根據臨床癥狀難以鑒別區分，故需要借助相關實驗室診斷技術進行鑒別。

圖1 新生仔豬嚴重腹瀉脫水

圖2 后備母豬水樣腹瀉

2.3 實驗室確診

腹瀉發生以后，3月18日上午將腹瀉樣品送實驗室，經qPCR檢測，PEDV陽 性、TGEV、PoRV、PDCoV陰性；確定該場為PEDV感染。

2.4 處置策略

盡管當前該地區非洲豬瘟感染風險也高，但考慮到對PED最有效的控制措施為返飼，經過豬場管理層和技術團隊的商討，為了豬場今后PED防控的長遠考慮，決定以返飼馴化配合疫苗免疫的方式控制PED。具體策略如下。

2.4.1 排除ASFV感染風險

采集豬場異常豬尾尖血、母豬和仔豬的腹瀉樣品、環境樣品進行非洲豬瘟病毒（ASFV） 檢測，排除場內ASFV感染，特別是環境中是否存在ASFV，確定為PEDV單純感染，保證返飼計劃的安全性。

2.4.2 通過返飼快速建立母豬群免疫力

3月18-22日，豬場收集發生腹瀉24-36 h內的仔豬（腹瀉嚴重并且沒有進行過治療）糞便或腸道病料。

采集腸道病料時，每頭仔豬均需要分別收集腸道；在對仔豬收集部分脾臟病料時，將每窩仔豬（約10頭仔豬）脾臟放入到一個包裝袋中，并進行合樣檢測，進行ASFV、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬藍耳病病毒（PRRSV）三種疾病病毒的PCR檢測，若ASFV陽性，不得返飼。

制備的仔豬腸道病料勻漿，根據qPCR檢測的Ct值，估算每份腸道所能返飼的豬群數量，通常每頭腹瀉仔豬的腸道可用于20頭豬的返飼； 此后1周內，對場內所有母豬群及公豬進行3次返飼。

對返飼效果的評估，初期主要以返飼后豬群的臨床表現為準。該場經過1周3次的返飼，3月28日返飼結束，至少70%豬群在返飼后表現出采食下降、腹瀉等癥狀，表明返飼后豬群感染比例很高，返飼基本成功。

2.4.3 降低場內PEDV病毒載量

在臨產母豬沒有建立母源抗體保護前，停止產房的所有生產操作，包括接產、非必要的助產、閹割、斷尾等，參考Macrebel操作；減少不同欄位之間的交叉污染。

對全場進行分區管理并做好生物安全細節操作，減少場內病毒的循環，降低環境中病毒對新生仔豬感染壓力。

保證產房豬群的全進全出，做到斷奶后，對產床進行嚴格的清洗消毒工作，降低產房環境中的PEDV。

2.4.4 返飼后的疫苗免疫策略

返飼成功以后1個月，對全群進行PEDV滅活疫苗加強普免一次。母豬群在分娩前6周免疫PEDV弱毒活疫苗1次，分娩前3周免疫PEDV滅活苗1次。以確保母豬群在未來的生產周期內能夠產生持續不斷的免疫力，給新生仔豬提供母源抗體保護。

2.5 返飼效果評估

母豬群返飼結束1周以后，場內母豬的排毒減少，母豬根據批次轉入分娩舍，分娩舍腹瀉仔豬的數量逐步下降，2周以后，腹瀉損失數量下降明顯（圖3）。通常返飼后，母豬需要2周左右時間，體內才能產生針對PEDV的母源抗體。

圖3 返飼后腹瀉損失仔豬

分別對返飼后2周、1個月及加強免疫滅活疫苗1個月后的母豬群進行PEDV IgG抗體水平監測，母豬群PEDV抗體均為100%陽性，且IgG抗體均維持較高水平（表1）。同時，仔豬臨床腹瀉基本消失，表明該場通過返飼馴化控制PED取得成功。

表1 返飼后母豬群抗體監測

3 討論

PEDV作為導致仔豬腹瀉的主要傳染性病原，因其引起的臨床癥狀和病理變化與TGEV、PoRV、PDCoV很相似，又常常與引起腹瀉的其他病原混合感染，故難以進行區分，所以對于PEDV引起的豬流行性腹瀉的診斷，不能單純地以臨床癥狀和病理變化為判斷依據，必須借助相關的實驗室技術進行鑒別診斷。非洲豬瘟發生以后，集團化獨立實驗室和第三方實驗室檢測能力發展迅速，為各類疾病快速有效的鑒別診斷提供很大幫助。針對PED、TGE等病毒性疾病的檢測，豬場也可以常備一些商品化的膠體金快速檢測試紙條，用以緊急疫情時的病原快速篩檢，為臨床快速處置搶占先機。

當前的流行病學調查表明，PED的暴發主要與豬和相關人員的流動有很大關系，而豬場一旦暴發PED，并沒有特效的藥物進行及時有效的根除治療。因此，對于PED的防控手段主要還是依靠疫苗免疫和加強生物安全管理。

伴隨非洲豬瘟防控的需求，豬場生物安全等級不斷提升，新建母豬場發生PED，除了供種豬場本身就存在PEDV感染帶毒的可能性外，引種過程的運輸風險、區域內PED流行、生物安全防控存在漏洞等都可能是導致PED發生的因素。當前防控非洲豬瘟的壓力下，仍然需要復盤梳理豬場的生物安全漏洞；同時重視后備母豬在分娩前的PED馴化，通常采用病料返飼會比直接進行疫苗免疫效果要好，倘若采取返飼的策略，則必須首先要排除非洲豬瘟等重大疾病的感染風險，其次對臨床返飼的有效方式和效果評估需要建立標準，返飼后母豬群的抗體的產生需要2周左右時間，同時需要加強對環境中PEDV的控制，尤其重視分娩舍全進全出后的清洗消毒工作。必要時，需要將分娩舍10日齡以上仔豬提前斷奶轉至保育場以減少仔豬群在發病場的損失。返飼成功后，想要維持豬場PED的持續穩定，建議豬場選擇產前活疫苗配合滅活疫苗的方式進行跟胎免疫。

非洲豬瘟發生以后，豬場生物安全條件的大幅升級和實驗室檢測能力的提升，為ASF、PED等重大疾病的防控和監測提供有力幫助，豬場在不斷做好生物安全的同時，也需要定期對豬群進行各類疾病的健康監測，以便及時預警，快速干預，有助于豬場生產效益的提升。