嗜酸性粒細胞計數在 COVID-19患者外周血中動態變化分析研究

徐月 周權 陳波 黃強 聶龍 肖力 任品 涂明利

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)自首例發現至爆發以來便迅速蔓延至全球，其傳染性極強[1]，病死率高。部分患者迅速惡化致急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)，甚至死亡。因此，提高COVID-19的救治水平成為臨床工作者面臨的重大挑戰，而探索方便有效的臨床監測指標也顯得尤為重要[2]。中國新冠肺炎診療方案的發布，對世界COVID-19疫情的控制發揮了積極作用。各版指南都把“發病早期外周血白細胞總數正常或降低，淋巴細胞計數減少”作為診斷依據之一[3]，筆者在臨床實踐中發現較多COVID-19患者嗜酸性粒細胞(eosinophils，EOS)在早期呈現明顯降低，且隨著病情的恢復而恢復，而死亡患者在死亡前則很少恢復。為了探討EOS計數動態檢測在 COVID-19 臨床價值，對478例COVID-19患者的臨床資料進行回顧性分析。

資料與方法

一、對象與分組

本研究經隨州市中心醫院倫理委員會批準。納入2020年2月1日至3月15日在隨州市中心醫院經病毒核酸檢測確診為COVID-19的所有患者，作為新冠組。本組病例共478例，男243例(占50.8%)，女235例(占49.2%)。平均年齡48歲±14歲，均符合《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第八版)》[3]診斷標準。以同期480例社區獲得性肺炎(community-acquired pneumonia, CAP)患者作為CAP組。其中男性245例(占51.1%)，女性235例(占48.9%)，平均年齡50歲±16歲。以近期479例健康體檢人群作為健康對照組。其中男性243例(占50.7%)，女性236例(占49.3%)，平均年齡46歲±12歲。以上三組人群性別、年齡差異無統計學意義(P>0.05)。

根據COVID-19患者生存或死亡情況，將新冠組分為存活組(441例，男性225例，占51.0%；女性216例，占49.0%，平均年齡46歲±13歲)與死亡組(37例，男性18例，占48.6%；女性19例，占51.4%，平均年齡70歲±10歲)兩個亞組；按入院EOS計數降低與否，又將新冠組分為EOS正常組(男性127例，占48.1%；女性137例，占51.9%；平均年齡49歲±13歲)和EOS降低組(男117例，占54.7%；女97例，占45.3%；平均年齡46歲±15歲)兩個亞組。EOS正常組和EOS降低組統計分析時共剔除無發熱患者及胸部影像學資料不全的病例共155例。

二、指標和方法

統計各組患者外周血細胞計數(抽取肘靜脈血2 mL于EDTA真空抗凝管中, 充分混勻后, 在邁瑞BC-6800 plus全自動血液分析儀上進行檢測)，比較分析各組(亞組)EOS、淋巴細胞(lymphocyte，LYM)、白細胞(leukocyte，LEU)計數的變化趨勢。

分析比較新冠組各亞組患者EOS計數恢復時間與體溫恢復時間、胸部CT影像恢復時間、COVID-19病毒核酸轉陰時間。

三、統計方法

數據分析采用SPSS 25.0版本，計算連續型變量以中位數M(P25，P75)表示，使用Mann-Whitney U檢驗或Kruskal-Wallis H檢驗比較不同組中患者的數據差異。樣本率的比較采用χ2檢驗和Fisher確切概率法。圖形的繪制采用GraphPad 8.0版本繪制。以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

一、新冠組患者與CAP組、對照組患者的外周血細胞計數

新冠組患者的EOS(0.01×109/L)、LYM(1.02×109/L)、LEU(4.40×109/L)計數降低的比例高于CAP組、健康對照組，且差異具有統計學意義。新冠組EOS計數降低的比例為55.2%，高于新冠組LEU(39.7%)，P<0.05，差異具有統計學意義。新冠組中EOS計數降低的比例高于LYM(55.0%)計數降低的比例，但P>0.05，差異無統計學意義。結果(見表1)所示。

二、存活組和死亡組COVID-19患者的外周血細胞計數

部分(67.5%)死亡患者入院時EOS計數降低至0，無法檢出。死亡組患者的EOS(0.00×109/L)、LYM(0.45×109/L)計數低于存活組COVID-19患者，LEU(6.40×109/L)計數明顯高于存活組COVID-19患者，死亡組COVID-19患者EOS計數和LYM計數下降率分別為91.8%和83.7%，明顯高于存活組COVID-19患者的EOS計數下降率53.7%和LYM計數下降率53%，且差異具有統計學意義。在死亡組中，EOS計數降低的比例高于LYM、LEU計數降低的比例，P<0.05，且差異具有統計學意義(見表2)。

表1 新冠組患者與CAP組、健康對照組患者的外周血細胞計數比較

表2 存活組和死亡組COVID-19患者外周血細胞計數比較

三、存活組與死亡組COVID-19患者住院期間外周血EOS計數的動態變化

本研究進一步分析了存活組與死亡組COVID-19患者住院期間的EOS計數的變化。從(圖1)中可以看出存活組COVID-19患者EOS 計數隨著住院時間的延長迅速上升，而死亡組EOS計數隨著住院時間的延長EOS計數始終維持在較低水平。且死亡患者在死亡前仍有65.5%的患者EOS計數未恢復至正常。

四、EOS降低組與EOS正常組COVID-19患者的臨床恢復情況

COVID-19存活患者中有237人EOS計數在治療前低于正常下限值。EOS降低組患者發熱，退熱時間較EOS正常組用時久，且差異具有統計學意義，胸部CT改善(治療后復查胸部CT炎癥較入院時的胸部CT明顯吸收)時間、病毒核酸轉陰時間、住院時間均較EOS正常組用時久，P>0.05差異無統計學意義。EOS降低組患者EOS計數恢復正常的中位時間是5天， EOS計數的恢復早于胸部CT改善、病毒核酸轉陰，P<0.05，差異均具有統計學意義。

圖1 嗜酸性粒細胞計數的動態變化

表3 EOS降低組和EOS正常組COVID-19患者臨床恢復情況

討 論

COVID-19是以冠狀病毒2型(SARS-CoV-2)引起的以肺為主要靶器官的全身多器官損傷性疾病。大多數COVID-19患者只出現輕微或不復雜的疾病，但約14%的患者出現需要住院治療和氧氣支持的嚴重疾病，5%的患者需要進入重癥監護室[4]。嚴重時可導致嚴重的肺損傷和ARDS，甚至死亡[5]。

《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第八版)》指出疾病早期患者外周血LEU總數正常或下降，LYM計數下降；重癥患者外周血LYM計數逐漸下降[3]。LYM減少是COVID-19患者的常見特征，可能是與疾病嚴重程度和死亡率相關的關鍵因素[6]。本研究顯示大部分COVID-19患者EOS計數降低，且降低比例超過LEU，但各版指南均未提及EOS在COVID-19中的作用。Zhang[7]等人的研究發現大多數患者出現EOS計數減少(55.2%)。同樣，Qian[8]等人回顧了91例COVID-19患者的病歷，發現47例患者(51.65%)EOS減少。本研究發現，隨州地區COVID-19患者發病初期EOS計數減少，55.2%的COVID-19患者EOS計數減少。進一步分析還發現EOS減少比例高于LEU，這一結果與先前的研究[9]一致。

EOS通常只占循環LEU的小部分(1%～3%)[10]，Xie[11]等人的研究表明，EOS也與疾病的嚴重程度有關。本研究顯示，91.8%的死亡病例EOS計數明顯降低， 大多數死亡患者的EOS計數低至0。死亡病例住院期間的EOS計數始終低于存活患者，且死亡患者在死亡前仍有65.5%的患者EOS計數未恢復至正常。本研究中兩組COVID-19患者EOS計數不同，死亡患者EOS計數明顯降低，而在治療后大部分患者EOS計數持續低下。在存活組COVID-19患者中，經治療后大部分患者EOS計數很快恢復至正常。而EOS計數持續維持在較低水平的患者幾乎全部死亡，這在某種程度上或可提示患者預后不良。

本研究還發現EOS計數的恢復較胸部CT改善、病毒核酸轉陰早。治療后患者EOS計數迅速恢復，有利于患者病情的判斷。本研究中新冠組與CAP組患者均無鼻炎、哮喘、蕁麻疹等過敏性疾病情況，也無寄生蟲感染情況。因為EOS具有殺傷細菌、寄生蟲的功能，也是免疫反應和過敏反應過程中極為重要的細胞[12]，在限制病毒感染及促進體內病毒清除方面具有重要的作用[13]。活化的嗜酸性粒細胞可以抵抗致命的呼吸道病毒感染[14]，嗜酸性粒細胞不僅參與免疫效應功能，而且還執行組織保護和免疫調節功能，這些功能積極地促進了體內穩態。因此，長期嗜酸性粒細胞耗竭，可能導致繼發性疾病的發展[15]。所以長時間的嗜酸性粒細胞缺乏可能提示患者預后不良。EOS計數不僅在SARA-COV-2中呈現出這種狀態，在SARS病毒感染[16]、甲型H1N1流感[17]、傷寒中也呈現同樣的狀態。同樣有研究表明，EOS可促進宿主細胞免疫，從而減少流感病毒在肺中的復制，提高病毒的清除率[18]。所以一定數量的嗜酸性粒細胞對于人體是非常重要的，它能夠促進體內維持一種穩態的狀態。如果患者在病程中出現EOS計數持續低下，則說明患者的治療效果可能不佳，也提示此患者可能出現一系列其他繼發性病變，提示病情嚴重、預后不良，在臨床上需要予以重視。

EOS的變化通過血常規就能檢測，可重復性強，檢測方法快速、簡便可行且費用低廉，可以作為臨床上判斷病情嚴重程度、評估患者療效及預后的重要且有效的指標。所以EOS在評估COVID-19患者的療效、病情嚴重程度中可能具有一定的臨床價值。

本研究證實了COVID-19患者早期EOS計數正?；蛳陆担蚁陆档谋壤踔脸^LEU，但各版指南中并未將EOS計數下降納入COVID-19患者早期實驗室檢查異常指標。且大部分死亡患者在死亡前EOS計數始終未恢復至正常，所以EOS計數在某種程度上或可作為COVID-19患者病情評估的一項重要參考指標。所以希望本研究能為新冠肺炎診療指南的修訂，提供一定的臨床參考依據。