毛細(xì)支氣管炎患兒血清中LTB4、CCL11的表達(dá)及臨床意義

陳國(guó)金　張志博　陳國(guó)光

【摘要】 目的：探究毛細(xì)支氣管炎患兒血清中白三烯B4（LTB4）、CC趨化因子配體11（CCL11）的表達(dá)及臨床意義。方法：選擇2020年1月-2021年5月遼寧省健康產(chǎn)業(yè)集團(tuán)阜新礦總醫(yī)院診治的毛細(xì)支氣管炎患兒100例作為觀察組，根據(jù)病情嚴(yán)重程度分為輕癥組69例和重癥組31例，同時(shí)選擇同期在本院進(jìn)行健康體檢的100名健康兒童作為對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清LTB4、CCL11表達(dá)水平，采用受試者工作特征（ROC）曲線評(píng)估血清LTB4、CCL11對(duì)重癥毛細(xì)支氣管炎的預(yù)測(cè)價(jià)值。結(jié)果：重癥組血清LTB4、CCL11表達(dá)水平均高于輕癥組和對(duì)照組，且輕癥組均高于對(duì)照組（P<0.05）。LTB4的曲線下面積（AUC）為0.711，最佳截?cái)嘀禐?3.45 mg/L，靈敏度、特異度分別為0.62、0.65;CCL11的AUC為0.763，最佳截?cái)嘀禐?5.71 μg/mL，靈敏度、特異度分別為0.66、0.72;LTB4聯(lián)合CCL11預(yù)測(cè)毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的AUC為0.835，靈敏度、特異度分別為0.79、0.74。結(jié)論：血清LTB4、CCL11與毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度密切相關(guān)，早期檢測(cè)可作為預(yù)測(cè)毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的重要標(biāo)志物。

【關(guān)鍵詞】 毛細(xì)支氣管炎 白三烯B4 CC趨化因子配體11 炎癥 嚴(yán)重程度

Expression and Clinical Significance of LTB4 and CCL11 in Serum of Children with Bronchiolitis/CHEN Guojin， ZHANG Zhibo， CHEN Guoguang. //Medical Innovation of China， 2022， 19（07）： -130

[Abstract] Objective： To investigate the expression and clinical significance of serum leukotriene B4 （LTB4） and CC Chemokine ligand 11 （CCL11） in children with bronchiolitis. Method： A total of 100 cases of children with bronchiolitis treated in Fuxin Mine General Hospital of Liaoning Health Industry Group from January 2020 to May 2021 were selected as the observation group， and according to the severity of the disease， they were divided into the mild group （n=69） and the severe group （n=31）. Meanwhile， 100 healthy children who underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the control group. Enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect the expression levels of serum LTB4 and CCL11， and receiver operating characteristic （ROC） curve was used to evaluate the predictive value of serum LTB4 and CCL11 on severe bronchiolitis. Result： The expression levels of LTB4 and CCL11 in severe group were higher than those in mild group and control group， and those in the mild group were higher than those in the control group （P<0.05）. The area under curve（AUC） of LTB4 was 0.711， the optimal cut-off value was 23.45 mg/L， the sensitivity and specificity were 0.62 and 0.65. The AUC of CCL11 was 0.763， the optimal cut-off value was 35.71 μg/mL， the sensitivity and specificity were 0.66 and 0.72. The AUC of LTB4 combined with CCL11 was 0.835， the sensitivity and specificity were 0.79 and 0.74， respectively. Conclusion： Serum LTB4 and CCL11 are closely related to the severity of bronchiolitis， and early detection can be used as an important marker to predict the severity of bronchiolitis.

[Key words] Bronchiolitis Leukotriene B4 CC Chemokine ligand 11 Inflammation Severity

First-author’s address： Fuxin Mine General Hospital of Liaoning Health Industry Group， Fuxin 123000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.07.030

毛細(xì)支氣管炎主要由細(xì)菌和病毒感染毛細(xì)支氣管所致，是兒科中較為常見的感染性疾病[1]。毛細(xì)支氣管炎患兒的預(yù)后視其病情嚴(yán)重程度而定，輕者自愈，而病情嚴(yán)重時(shí)則會(huì)危及患兒的生命[2]。小兒毛細(xì)支氣管炎的發(fā)生發(fā)展十分迅速，準(zhǔn)確且及時(shí)判定患兒毛細(xì)支氣管炎的嚴(yán)重程度對(duì)于患兒的診治和預(yù)后評(píng)估尤為重要，并且可以作為評(píng)估患兒是否需要住院治療的重要指標(biāo)。白三烯B4（LTB4）是由白細(xì)胞產(chǎn)生，參與細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)過程，在慢性阻塞性肺疾病和膿毒癥等炎癥反應(yīng)疾病中高表達(dá)[3]。CC趨化因子配體11（CCL11）是一種炎癥性配體蛋白，其受體主要分布于嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞中并調(diào)節(jié)其趨化反應(yīng)過程，在慢性骨髓炎和腦卒中等炎癥相關(guān)性疾病中高表達(dá)，在慢性骨髓炎和腦卒中患者預(yù)后診斷中具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值[4]。有研究提出，LTB4、CCL11參與了毛細(xì)支氣管炎的發(fā)生、發(fā)展過程[5-6]，因此，本研究通過檢測(cè)血清LTB4、CCL11水平，旨在探討其在毛細(xì)支氣管炎患兒中的水平及其與毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年1月-2021年5月遼寧省健康產(chǎn)業(yè)集團(tuán)阜新礦總醫(yī)院診治的100例毛細(xì)支氣管炎患兒作為觀察組，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）患兒年齡為2～12歲;（2）符合毛細(xì)支氣管炎患兒的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];（3）入院后經(jīng)臨床查體或X線片檢查確診為毛細(xì)支氣管炎;（4）有明顯的喘憋和咳嗽癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）并發(fā)腫瘤患兒;（2）肝腎功能異常患兒;（3）存在自身免疫性疾病;（4）入院前4個(gè)月內(nèi)服用過免疫抑制劑以及抗血小板等藥物;（5）先天性心臟病患兒;（6）入院前2個(gè)月內(nèi)接受過抗菌、抗炎治療。根據(jù)毛細(xì)支氣管炎診療指南將患兒分為輕癥組69例和重癥組31例[8]，同時(shí)選擇同期在本院進(jìn)行健康體檢的100名健康兒童作為對(duì)照組，納入標(biāo)準(zhǔn)：于同期在本院進(jìn)行健康體檢的兒童，年齡2～12個(gè)月。排除標(biāo)準(zhǔn)：2個(gè)月內(nèi)未患感染性疾病，既往無過敏史，無反復(fù)呼吸道感染病史，無先天性心臟病，無腫瘤、寄生蟲病、自身免疫性疾病。臨床研究開展前研究對(duì)象家屬均簽署知情同意書，并且本研究經(jīng)過本院倫理委員會(huì)同意。

1.2 方法 抽取患兒的空腹靜脈血3 mL，室溫下凝血1 h后6 000 r/min離心15 min（離心半徑12.5 cm），收集上清用于后續(xù)檢測(cè)。血清LTB4、CCL11檢測(cè)均采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，分別采用LTB4檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)廠家：北京孚博生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20180814，規(guī)格：96T）及CCL11檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)廠家：上海恒渡生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20181106，規(guī)格：96T）進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。平均年齡、血清LTB4、CCL11表達(dá)水平等計(jì)量資料采用（x±s）的方式表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。采用受試者工作特征（ROC）曲線分析各指標(biāo)對(duì)重癥毛細(xì)支氣管炎的診斷價(jià)值，P<0.05則表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組和觀察組的臨床資料比較 對(duì)照組和觀察組的性別、年齡和喂養(yǎng)方式比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

2.2 各組血清LTB4、CCL11的表達(dá)水平比較 重癥組血清LTB4、CCL11表達(dá)水平均明顯高于輕癥組和對(duì)照組（P<0.05），且輕癥組均明顯高于對(duì)照組（P<0.05）。見表2。

2.3 血清LTB4、CCL11對(duì)重癥毛細(xì)支氣管炎的預(yù)測(cè)價(jià)值 采用ROC曲線下面積評(píng)估血清LTB4、CCL11對(duì)重癥毛細(xì)支氣管炎的預(yù)測(cè)價(jià)值，結(jié)果顯示，LTB4的曲線下面積（AUC）為0.711，95%CI（0.616，0.870），最佳截?cái)嘀禐?3.45 mg/L，靈敏度、特異度分別為0.62、0.65;CCL11的AUC為0.763，95%CI（0.675，0.851），最佳截?cái)嘀禐?5.71 μg/mL，靈敏度、特異度分別為0.66、0.72;LTB4聯(lián)合CCL11預(yù)測(cè)重癥毛細(xì)支氣管炎的AUC為0.835，95%CI（0.760，0.909），靈敏度、特異度分別為0.79、0.74。見圖1。

3 討論

毛細(xì)支氣管炎好發(fā)于2歲以下嬰幼兒，研究報(bào)道顯示呼吸道合孢病毒是引起毛細(xì)支氣管炎的主要病原菌，在毛細(xì)支氣管炎患者中的檢出率約為76%[9]。除呼吸道合孢病毒外，還有鼻病毒、流感病毒和肺炎支原體等均是引起毛細(xì)支氣管炎的病原菌[10]。尋找與毛細(xì)支氣管炎發(fā)病密切相關(guān)的生物標(biāo)志物分子，對(duì)于降低毛細(xì)支氣管炎的發(fā)生率和改善患兒預(yù)后具有重要意義。

LTB4水平的升高與炎癥性疾病的發(fā)生密切相關(guān)，在過敏性皮膚炎和過敏性鼻炎患者中均能夠檢測(cè)到LTB4表達(dá)量上調(diào)，可以作為過敏性皮膚炎和過敏性鼻炎診斷的生物標(biāo)志物[11-12]。LTB4調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，首先LTB4參與白三烯B4受體1（BLT1）信號(hào)通路的活化過程，而BLT1信號(hào)通路的活化與炎癥反應(yīng)的發(fā)生密切相關(guān)。Xiong等[13]的研究表明，LTB4能夠活化BLT1信號(hào)通路，進(jìn)而促進(jìn)炎癥因子白介素-33（IL-33）的產(chǎn)生和釋放，導(dǎo)致過敏反應(yīng)的發(fā)生。同時(shí)LTB4參與炎癥小體的形成。Hegde等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，LTB4的表達(dá)受到c-Jun氨基末端激酶（JNK）信號(hào)通路的調(diào)控，JNK信號(hào)通路的活化能夠上調(diào)LTB4的表達(dá)，LYB4與IL-1β參與形成炎癥小體，并促進(jìn)肺炎的發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn)，重癥組血清LTB4水平明顯高于輕癥組，而輕癥組則高于對(duì)照組，表明隨著毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的增加，患兒體內(nèi)的LTB4水平明顯升高，推測(cè)其原因可能是由于LTB4一方面能夠活化BLT1信號(hào)通路，進(jìn)而上調(diào)IL-33和白介素-6（IL-6）等炎癥因子的表達(dá)，從而促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生[15]。同時(shí)LTB4水平升高能夠促進(jìn)炎癥小體的形成，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)發(fā)生。炎癥反應(yīng)的異常上調(diào)會(huì)促進(jìn)組織細(xì)胞的損傷和死亡，導(dǎo)致患兒的毛細(xì)支氣管損傷和呼吸道功能障礙，從而導(dǎo)致毛細(xì)支氣管炎的惡化以及患兒的死亡[16-17]。

CCL11是免疫反應(yīng)過程中的重要分子，參與嗜酸性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活化，同時(shí)調(diào)節(jié)白細(xì)胞的趨化作用。Alghsham等[18]研究發(fā)現(xiàn)，CCL11水平上調(diào)能夠促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞水平上升，同時(shí)促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。而Gutiérrez-rivas等[19]的研究表明，CCL11水平的異常升高會(huì)導(dǎo)致CD4+T細(xì)胞減少，從而導(dǎo)致患者免疫功能缺陷的發(fā)生。同時(shí)CCL11參與血管生成，進(jìn)而調(diào)節(jié)白細(xì)胞的趨化作用。Park等[20]的研究發(fā)現(xiàn)，CCL11能夠激活絲氨酸/蘇氨酸激酶（Akt）信號(hào)通路，進(jìn)而上調(diào)VEGF的產(chǎn)生，從而促進(jìn)血管生成。本研究發(fā)現(xiàn)重癥組血清CCL11水平明顯高于輕癥組，而輕癥組則高于對(duì)照組，表明隨著毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的增加，患兒體內(nèi)的CCL11水平明顯升高，表明血清CCL11水平與患兒的病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。推測(cè)其原因可能是由于毛細(xì)支氣管炎發(fā)病過程中大量趨化因子釋放，并且白細(xì)胞的趨化作用增強(qiáng)，導(dǎo)致白細(xì)胞大量轉(zhuǎn)移至病灶區(qū)域。由于CCL11在白細(xì)胞的趨化作用中起到重要作用，因此促進(jìn)CCL11表達(dá)上調(diào)能夠有效提高白細(xì)胞的趨化過程[21-22]。同時(shí)在毛細(xì)支氣管炎發(fā)病過程中由于炎癥反應(yīng)的發(fā)生會(huì)導(dǎo)致患兒的毛細(xì)支氣管處的毛細(xì)血管大量損傷，機(jī)體對(duì)此作出適應(yīng)性變化，及時(shí)修復(fù)損傷的毛細(xì)血管[23]。由于CCL11能夠活化AKT信號(hào)通路并促進(jìn)新生血管的生成，因此在毛細(xì)支氣管炎患兒中CCL11水平升高[24-25]。

結(jié)果還顯示，LTB4聯(lián)合CCL11預(yù)測(cè)毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的價(jià)值較高，ROC曲線下面積為0.835，靈敏度、特異度分別為0.79、0.74，明顯優(yōu)于LTB4、CCL11單獨(dú)預(yù)測(cè)的價(jià)值。提示早期檢測(cè)毛細(xì)支氣管炎患兒血清LTB4、CCL11水平，可作為臨床預(yù)測(cè)毛細(xì)支氣管炎嚴(yán)重程度的重要生化標(biāo)志物。

綜上所述，血清LTB4、CCL11水平異常升高與毛細(xì)支氣管炎的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，早期聯(lián)合檢測(cè)有助于預(yù)測(cè)毛細(xì)支氣管炎患兒病情嚴(yán)重程度，在毛細(xì)支氣管炎患兒的診斷和治療中具有一定臨床價(jià)值。

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（收稿日期：2021-07-22） （本文編輯：占匯娟）