不同消毒劑配方處理豆天蛾卵對其生長發育的影響

李曉峰 郭明明 廖懷建 鄧盼 李大維 李俊領 樊繼偉 陳鳳

摘要 為探究人工養殖豆天蛾過程中卵的最佳消毒時長及篩選最優消毒劑配方，首先以38%鹽酸+37%甲醛+水（0.5∶0.5∶10，V/V）為消毒劑，測定不同時長消毒處理對豆天蛾卵生長發育的影響，獲得最佳消毒時長;再以此為基礎，探究不同消毒劑配方（以下簡稱配方）處理對豆天蛾卵孵化率、25日齡幼蟲存活率、體重和體長等指標的影響。結果表明，消毒30 min的豆天蛾卵孵化率（80.00%）、25日齡幼蟲的存活率（59.72%）、體長（8.02 cm）及體重（8.96 g）最高，且顯著高于對照。配方20（37%甲醛∶31%雙氧水∶水=0.5∶0.5∶10，V/V）處理后的卵孵化率（86.67%）、25日齡幼蟲存活率（66.67%）、體長（8.88 cm）和體重（10.70 g）優于其他配方，且顯著高于對照，表明配方20對豆天蛾卵的消毒效果最好，為本試驗篩選出的最優配方。此結果為人工養殖豆天蛾提供了一定的理論基礎和技術支持。

關鍵詞 豆天蛾卵; 消毒劑配方; 生長發育; 優選

中圖分類號： S433.4

文獻標識碼： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2020686

Abstract The purpose of this study was to investigate the appropriate disinfection duration of the eggs of Clanis bilineata tsingtauica and to screen the best formula from different disinfectants. The effects of egg-soaking for different time with 38% hydrochloric acid mixed with 37% formaldehyde and water （volume ratio： 0.5∶0.5∶10） on the growth and development of eggs were determined to obtain the best disinfectant time lengths. On this basis， the hatching rate， survival rate， body weight and body length of 25-day-old larvae were explored after treatment of eggs with different disinfectant formulas （hereinafter referred to as formula）. The results showed that the egg hatching rate （80.00%）， the survival rate （59.72%）， body length （8.02 cm） and body weight （8.96 g） of 25-day-old larvae were significantly higher than that of the control group when the eggs were sterilized for 30 minutes. The hatching rate， and the survival rate and body length of 25-day-old larvae were 86.67%， 66.67% and 8.88 cm， respectively， when using formula 20 （37% formaldehyde∶31% hydrogen peroxide∶water=0.5∶0.5∶10，V/V） to disinfect for 30 minutes， which were significantly higher than that of the control group. The results indicated that the formula 20 was the best formula among all the formulas tested and the optimum for disinfectant of C.bilineata tsingtauica eggs. This study provided certain theoretical basis and technical support for artificial breeding of C.bilineata tsingtauica.

Key words eggs of Clanis bilineata tsingtauica; disinfectant formula; growth and development; screening

豆天蛾Clanis bilineata tsingtauica Walker屬鱗翅目天蛾科豆天蛾屬，幼蟲俗稱為豆丹、豆蟲，主要分布于我國的黃淮流域、長江流域和華南地區[1]。其寄主植物主要有大豆、葛藤、洋槐等。豆天蛾是大豆生產上的暴發性害蟲，其幼蟲在5齡進入暴食期，輕者將葉片吃成缺刻，重者可將豆株吃成光稈，使其不能結莢，嚴重影響大豆產量[2]。

豆丹因其蛋白質含量高，富含必需氨基酸及脂肪酸，加之口感獨特[35]，具有重要的食用價值和醫學價值[6]。因而豆天蛾已從害蟲轉變為重要的經濟昆蟲，逐漸向著產業化發展[78]。在江蘇蘇北地區，豆丹的市場需求與日俱增，企業和當地養殖戶已開始嘗試人工養殖，擴大豆丹供給規模以填補市場供應缺口。

豆丹大規模人工飼養過程中通過人工干預其交配、產卵、孵化及滯育等各個生長環節以及生長環境，使豆天蛾年世代數增加，一年內單位土地面積上豆丹產量提高。但目前技術尚不成熟，各環節僅憑經驗進行，尚未形成標準的、可參考的技術規范。如，養殖戶憑經驗在豆天蛾卵孵化前使用消毒劑對其進行浸泡消毒，以去除卵表面的有害微生物，提高卵的孵化率及孵化后幼蟲的存活率。但浸泡時長、使用消毒劑種類各不相同，因而各養殖戶所生產豆丹的品質高低不一，給豆天蛾市場的良好運行帶來隱患。

目前針對豆天蛾的相關研究主要有營養價值[910]和生物學特性[1113]等，而關于人工飼養技術方面報道較少。本研究從人工養殖豆天蛾卵的處理環節展開，通過記錄、測量與對比豆天蛾卵的孵化率、25日齡幼蟲存活數、存活率、體長、體重等參數，探究了豆天蛾卵經不同消毒劑處理對其及幼蟲生長發育的影響，從而篩選出可用于實際養殖的消毒劑。為完善和規范豆天蛾人工飼養提供了產品支持和技術保障。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試蟲源

本試驗所用的豆天蛾卵均采自江蘇省連云港市云臺農場。選擇當日產的、外形圓潤飽滿、顏色鮮艷的豆天蛾卵，帶回實驗室放入25 cm×15 cm×15 cm帶蓋的塑料盒中，而后置于（25±1）℃恒溫培養箱中培養，待用。

1.1.2 供試試劑

試驗所用試劑主要有：鹽酸（質量分數38%），雙氧水（質量分數31%），84消毒液，甲醛溶液（質量分數37%），所有試劑均購自北京百靈威科技有限公司。將試劑于4℃冰箱保存，備用。

1.1.3 供試耗材與設備

試驗所用耗材主要為長25 cm、寬20 cm、孔徑為0.01 mm的塑料網袋（江蘇淼宇環保科技有限公司）;所用設備主要為電熱恒溫干燥箱（康恒儀器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 最佳消毒時長的篩選

采用連云港當地各豆丹養殖基地常用的消毒方法。將鹽酸溶液與甲醛溶液等體積混合后與水按1∶10的體積比稀釋，制成消毒劑。取恒溫培養箱中培養的5日齡卵，按30粒一組放入一個塑料網袋中，將網口扎緊，防止蟲卵灑落。消毒時長設10、20、30、40、50 min共5個梯度。在容積500 mL燒杯中倒入400 mL消毒液，將裝有豆天蛾卵的小網袋浸入，每處理3個重復， 每個網袋為1個重復。處理完畢后立即將網袋用清水沖凈，以只用清水沖洗的3個網袋為對照組，用濾紙輕輕擦拭后放在實驗臺陰干。

在大豆田塊搭建防蟲大棚，防止其他昆蟲對試驗的干擾，將大豆田分為若干小區，每小區長（南北方向）3 m，寬（東西方向）1 m，將各小區整齊排列，南北方向每排6個小區，東西方向每排3個小區，共18個小區。小區之間間隔0.5 m，并用紗網隔開，防止豆天蛾幼蟲逃逸。5個處理組和對照組均設3次重復，每個小網袋為1次重復，共18個小網袋，編號完成后將每個小網袋隨機套在1個試驗小區的大豆植株上。每日9：00和17：00觀察各網袋內卵發育情況。卵孵化后繼續保持套袋狀態，防止螞蟻等昆蟲對初孵幼蟲的影響，待幼蟲5日齡時解開網袋，使幼蟲可在小區內大豆植株間自由轉移、取食。記錄25日齡幼蟲的存活率。存活率=豆天蛾幼蟲存活數/豆天蛾卵孵化數×100%;此外，測量并記錄各處理及對照的25日齡豆天蛾幼蟲的體長及體重，從而比較和篩選豆天蛾卵的最佳消毒時長。

1.2.2 消毒劑配方的組分及稀釋比例

將4種消毒液單獨或兩兩等體積混配，以蒸餾水為溶劑分別按1∶5、1∶10、1∶20的體積比稀釋，從而形成不同的消毒劑配方。各配方成分及稀釋比如表1所示。

1.2.3 各消毒劑配方消毒效果的比較

方法如1.2.1，每小區長（南北方向）3 m，寬（東西方向）1 m，將各小區整齊排列，南北方向每排11個小區，東西方向每排6個小區，共66個小區。小區之間間隔0.5 m，并用紗網隔開，防止豆天蛾幼蟲逃逸。在1.2.1中得到的最佳消毒時長的基礎上，采用21種配方對豆天蛾卵進行消毒。處理組和對照組均設3次重復，每個小網袋（30粒卵）為1次重復，共66個小網袋，編號完成后將每個小網袋隨機套在1個試驗小區的大豆植株上。比較經不同配方處理后豆天蛾卵的孵化率，25日齡豆天蛾幼蟲存活率、體長及體重，從而對21種配方進行優選。

1.2.4 數據處理

本試驗參數主要有孵化率、存活率、體長和體重。所有數據均由Excel 2013和SPSS 17.0處理。主要參數間的差異性采用One-way ANOVA方差分析;其中，孵化率和存活率間的比較首先要進行反正弦平方根轉換，然后采用Duncan氏新復極差法進行不同處理之間的差異顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 豆天蛾卵的最佳消毒時長

2.1.1 消毒時長對豆天蛾卵發育的影響

用消毒劑處理不同時長后豆天蛾卵的孵化數、孵化率及25日齡幼蟲存活數、存活率如表2所示。處理30 min的豆天蛾卵孵化率最高，達80.00%，其次分別為處理10 min和20 min，孵化率分別達到77.78%和75.56%。此3組處理的孵化率均顯著高于對照（53.33%）孵化率（P<0.05）。而其他處理和對照均無顯著差異（P>0.05）。卵處理30 min， 25日齡幼蟲存活率最高，達到59.72%，其次分別為處理40 min和對照，分別為59.32%和43.75%。但因處理40 min卵的孵化率低，因此25日齡幼蟲存活數比處理30 min少8頭。

2.1.2 處理時長對幼蟲體長及體重的影響

在消毒劑中浸泡不同時長對豆天蛾25日齡幼蟲體長及體重的影響如表3所示。經不同時長處理后豆天蛾25日齡幼蟲的體長及體重表現較為一致。處理30 min的體長最大，為8.02 cm，其次分別為處理40 min和10 min，體長分別為7.74 cm和7.66 cm;此3組處理的25日齡幼蟲體長均顯著大于對照和50 min處理（P<0.05）。處理30 min的25日齡幼蟲體重最大，為8.96 g，其次為處理40 min，體重為8.68 g。30 min處理的體重大于對照以及10、20 min和50 min處理（P<0.05）。處理20 min的25日齡幼蟲體長和體重分別為7.38 cm和7.66 g，與對照的體長和體重差異不顯著（P>0.05）。處理50 min的25日齡幼蟲體長和體重分別為5.34 cm和3.84 g，均顯著小于對照（P<0.05）。

2.2 不同消毒劑配方處理卵對豆天蛾卵發育和25日齡幼蟲存活的影響

不同配方消毒處理對豆天蛾卵孵化及25日齡幼蟲存活的影響如表4所示。每種配方均處理90粒豆天蛾卵，25日齡幼蟲存活數最高的處理為配方20，達到52頭。其次為配方7、9、11、17，25日齡幼蟲存活數相同，均為44頭。上述5種配方中，25日齡幼蟲存活數由卵的孵化率和25日齡幼蟲存活率決定。配方7和20處理后的豆天蛾卵孵化率最高，均達到86.67%，其次分別為配方9、19和12，卵的孵化率分別為81.11%、74.44%和73.33%。此5種配方處理后的卵孵化率相互之間無顯著差異（P>0.05），但均顯著高于對照的53.33%（P<0.05）。但配方12和19處理后的豆天蛾卵所孵化的幼蟲到25日齡時存活率僅為53.03%和29.85%，故最終25日齡幼蟲存活數僅為35頭和20頭。經配方5處理后的豆天蛾卵所孵化幼蟲的25日齡存活率最高，達75.68%;其次分別為配方14和11，25日齡幼蟲存活率分別為71.18%和70.97%。但因配方5和14處理的豆天蛾卵孵化率低，導致25日齡幼蟲存活數較少，僅分別為28頭和42頭。因此，結合生產實際，按照25日齡幼蟲存活數進行比較，配方7、9、11、17、20為初篩消毒劑較佳配方。

2.3 不同消毒劑配方處理卵對幼蟲體長和體重的影響

21種配方處理卵后，豆天蛾25日齡幼蟲體長和體重如表5所示。由2.2篩選的配方7、9、11、17、20中，配方20處理后的卵發育為25日齡幼蟲體長最長，達8.88 cm，其次分別為配方17、9、11和7，體長分別為8.56、8.42、8.14 cm和8.08 cm;另外，配方19和21處理后幼蟲的體長也較長，分別為8.52 cm和8.38 cm。這7種配方處理后的25日齡幼蟲體長顯著大于對照的6.78 cm （P<0.05），不同配方處理后的卵發育為25日齡幼蟲體重的結果與體長表現基本一致。體重最重的處理為配方20，達到10.70 g，其次為配方17、9、11和7，體重分別為10.24、9.38、9.02 g和8.66 g;另外，配方19和21處理后幼蟲的體重均為9.64 g。這7種配方均顯著大于對照的6.50 g（P<0.05）。綜上，經配方20處理后的卵，其孵化率及25日齡幼蟲的存活數、體長和體重均達到最大值，表明配方20對豆天蛾卵的消毒效果最好，故配方20為本試驗篩選的最優消毒劑配方;其次為配方17。

3 討論

本文以豆天蛾卵為研究對象，首先探究了豆天蛾卵經消毒劑不同時長浸泡消毒后，其孵化率、25日齡幼蟲存活數、存活率、體長和體重等參數的變化，從而確定最佳消毒時長。以此為基礎，探究了21種配方處理豆天蛾卵對卵的孵化率、25日齡幼蟲存活數、存活率、體長和體重等參數的影響，從而對21種配方進行優選。

本試驗表明，蟲卵消毒時長過長或過短均不能起到理想的消毒效果。消毒時長為10 min和20 min時，卵孵化率高于對照，但因未消毒完全導致幼蟲生長發育階段存活率低;消毒時間為40 min和50 min時，由于消毒時間過長，可能使卵活性受到影響，直接表現為孵化率降低。尤其是消毒時長為50 min時，卵孵化率只有34.44%，25日齡幼蟲存活率僅為35.48%，均低于其他處理和對照。此現象在25日齡幼蟲的體長和體重兩個參數上表現得更為明顯。消毒30 min時，幼蟲體長和體重達到最大。而消毒時間低于30 min幼蟲體長和體重雖然大于對照，但小于30 min的參數值。而消毒時間過長（50 min）則由于卵的活性受影響，幼蟲的生長發育也隨之變弱，導致體長和體重均顯著低于對照。

在消毒30 min的基礎上，本試驗篩選出消毒效果最好的為配方20（37%甲醛∶31%雙氧水∶水=0.5∶0.5∶10，V/V），其次為配方17（37%甲醛∶38%鹽酸∶水=0.5∶0.5∶10，V/V）。本試驗發現，單一成分的甲醛或雙氧水，在稀釋比為1∶10時，消毒效果并不明顯，這說明甲醛和雙氧水混配對豆天蛾卵消毒效果有一定的促進作用，但是加成作用還是增效作用需要繼續探究。配方19成分與20相同，但稀釋比為1∶5，在各參數上的表現均低于配方20，這說明合理的消毒劑配比濃度對試驗結果影響較大，下一步可在此基礎上對稀釋比進行細分，從而對消毒劑進行進一步的優化。

馮雨艷等[1]的研究表明，當豆天蛾幼蟲處于恒溫、恒濕、食物充足的條件下，卵和幼蟲死亡率顯著小于自然條件下的死亡率。因而在豆丹大規模人工飼養過程中，應盡量在恒溫、恒濕的培養箱中培養豆天蛾卵，對初齡幼蟲應飼喂新鮮豆葉，根據天氣條件及時調整大棚內溫濕度，防止氣候條件突變對豆丹產量造成影響。同時，要通過黑光燈誘捕、信息素誘捕等措施及時控制大棚內斜紋夜蛾等害蟲的發生，保證初齡幼蟲的正常生長。

本研究通過豆天蛾卵孵化率、25日齡幼蟲存活率等參數進行比較，對消毒劑配方進行優選，為豆丹的大規模人工飼養提供了一定的理論基礎和技術支持。本試驗是在自然條件下進行的，導致豆天蛾自然條件下孵化率低、幼蟲死亡率較高的因素尚不明確，故下一步可著手探究豆天蛾卵表面的致病微生物的菌落構成，了解其致病機理，尋找防治致病病原菌的有效方法;另外，還應進行自然條件下溫度、濕度和光照等非生物因素的單一或復合影響的研究，從而可更有針對性地篩選消毒劑配方。

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（責任編輯：楊明麗）