單月桂酸甘油酯及其與富馬酸復配對川藏黑豬配套系商品仔豬生長性能、抗氧化能力及免疫功能的影響

陳 瑾 ， 楊加豹 ， 鄧 卉 ， 劉進遠

（1.四川省畜牧科學研究院，四川成都 610066；2.動物遺傳育種四川省重點實驗室，四川成都 610066）

2020 年7 月1 日我國正式禁止飼料添加促生長類抗生素， 因此尋找和抗生素作用效果相當的替代品迫在眉睫。 中鏈脂肪酸（MCFA）是指碳鏈長度在6 ～12個的飽和脂肪酸， 包括己酸、辛酸、癸酸和月桂酸等（耿春銀等，2014）。 體外試驗已經表明，MCFAs 及其甘油一酯對致病菌、 病毒及寄生蟲的活性具有一定的抑制作用。 單月桂酸甘油酯（GML）是其中抑菌活性最強的化合物（張希等，2016）。 近年來研究表明，GML 在提高動物生長性能、改善機體健康方面具有一定的作用（藍俊虹等，2020；劉夢蕓等，2017）。同時 GML 和有機酸在體外具有抑菌增效作用 （張希等，2016；Kim等，2013），但GML 和有機酸復配在仔豬上的應用研究鮮見報道。本試驗旨在研究GML 及其與富馬酸（FA） 復配對川藏黑豬配套系商品仔豬生長性能、 血清生化指標、 抗氧化性能及免疫功能的影響，為禁抗后GML 及其與FA 復配在養殖業中的應用提供數據支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 GML 購自杭州康源食品有限公司， FA 購自四川畜科飼料有限公司，供試仔豬和試驗場地由四川綿陽明興農業科技開發有限公司提供。

1.2 試驗設計及飼養管理 試驗選用80 頭初始體重為（14.99±1.45）kg 的健康川藏黑豬配套系商品仔豬，按照體重相近、公母各半的原則，隨機分為4組，每組5個重復，每個重復4 頭豬。 對照組飼喂不含抗生素的基礎飼糧； 抗生素組在基礎飼糧中添加50 mg/kg 吉他霉素、50 mg/kg 喹烯酮和75 mg/kg 金霉素；GML組在基礎飼糧中添加300 mg/kg GML；GML+FA組在基礎飼糧中添加 300 mg/kg GML 和 6 g/kg FA。 基礎飼糧參考 NRC（2012）飼養標準和我國飼料成分與營養價值進行配制， 其組成及營養水平見表1。 GML+FA組用FA 替代等量玉米構成試驗飼糧。 試驗預試期7 d，正式期30 d，四川綿陽明興豬場進行，試驗過程中豬自由采食和飲水， 防疫消毒程序按豬場管理規定進行。

表1 基礎日糧組成及營養水平（風干基礎）

1.3 指標測定及方法

1.3.1 生長性能 試驗期間每天記錄各圈試驗豬只的采食量，分別于試驗第1、15、30 天，對每頭豬進行空腹稱重，計算出平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。

1.3.2 腹瀉程度 試驗期間每天早、中、晚定時觀察各圈豬只的糞便情況，并給予評分。1 分為硬糞；2 分為正常糞便；3 分為軟糞， 部分形成糞便；4 分為半液狀、漿糊狀糞便；5 分為水樣糞便；糞便得分為4、5 分者確定為腹瀉。 詳細記錄各圈豬只的腹瀉頭數及評分，計算出腹瀉率，計算公式如下：

腹瀉率/%=（腹瀉仔豬頭數×腹瀉天數）/（總試驗豬頭數×試驗天數）×100。

1.3.3 血清生化指標、 免疫指標及抗氧化指標試驗結束時， 從每組的每個重復中隨機選取2 頭豬進行前腔靜脈采血，分離血清，-20 ℃冰箱保存待測。 送至成都市公共衛生中心用血液生化自動分析儀測定總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、血糖（GLU）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量以及谷草轉氨酶（AST）和谷丙轉氨酶（ALT）活性。 依照相應商品試劑盒（南京建成生物工程研究所）的說明測定免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白 G（IgG）、免疫球蛋白 M（IgM）、白細胞介素-2（IL-2）、白細胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和干擾素-γ（IFN-γ）含量，谷胱甘肽過氧化物酶 （GSH-Px）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、過氧化氫酶（CAT）活性及總抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量。

1.4 數據分析 數據采用Microsoft Excel 2007進行整理， 采用SPSS 18.0 進行單因素方差分析和多重比較，P ＜ 0.05 為差異顯著，P ＜ 0.01 為差異極顯著。

2 結果

2.1 GML 及GML+FA 對仔豬生長性能及腹瀉程度的影響 由表 2 可知， 在 1 ～ 14、15 ～ 30 d以及 1 ～ 30 d 階段，各組的 ADG、ADFI、F/G 和腹瀉率均無顯著差異（P ＞0.05）。 但從數值上來看，1 ～ 14 d GML組的 ADG 和 ADFI 為各組最低，GML+FA組的 ADG 為各組最高。 15 ～ 30 d 抗生素組、GML組和GML+FA組的ADG 比對照組分別提高了 4.76%、2.76%和 6.32%。 1 ～ 30 d 抗生素組和 GML+FA組的 ADG 相似，F/G 相同， 均優于對照組。 GML+FA 的腹瀉率較對照組降低26.84%，與抗生素組相當。 GML組的ADFI 在各階段及全期均為最低。

表 2 GML 及 GML+FA 對仔豬生長性能和腹瀉程度的影響

2.2 GML 及GML+FA 對仔豬血液生化指標的影響 由表3 可知， 與對照組相比， 抗生素組的BUN 顯著降低了 25.96%（P ＜ 0.05）。 其余血清生化指標各組之間均無顯著差異（P ＞0.05）。

表 3 GML 及 GML+FA 對仔豬血液生化指標的影響

2.3 GML 及GML+FA 對仔豬血清抗氧化能力的影響 由表4 可知，與對照組相比，抗生素組的血清 T-SOD 活性提高了 29.50%（P ＜ 0.01）；GML組血清中T-SOD 活性和MDA 含量分別提高了11.98%和 55.49%（P ＜ 0.05），GSH-PX活性和 TAOC 分別降低了 10.12%（P ＜ 0.05）和 30.77%（P ＜0.01）；GML+FA組血清 MDA 含量提高了 52.47%（P ＜ 0.05）。 各組仔豬血清 CAT 活性無顯著差異（P ＞ 0.05）。

表 4 GML 及 GML+FA 對仔豬血清抗氧化能力的影響

2.4 GML 及GML+FA 對仔豬血清免疫指標的影響 由表5 可知，與對照組相比，抗生素組血清IgM 和IL-6 含量分別降低了16.92%和20.01%（P＜ 0.05）；GML組血清免疫指標均無顯著差異（P ＞0.05）；GML+FA組血清 IgA、IgG、IL-6 和 TNF-α含 量 分 別 提 高 了 8.38% 、27.04% 、23.97% 和21.70%（P ＜ 0.05）。 GML+FA組血清 IgA、IgG、IgM、IL-6 TNF-α 和 IFN-γ 含量均極顯著或顯著高于抗生素組 （P ＜ 0.01 或 P ＜ 0.05）。 各組仔豬血清 IL-2 含量均無顯著差異（P ＞ 0.05）。

表 5 GML 及 GML+FA 對仔豬血液免疫指標的影響

3 討論

3.1 GML 及其與FA 復配對仔豬生長性能的影響 GML 可在動物生產中作為脂肪乳化劑和抑菌添加劑應用。目前關于GML 對動物生長性能的影響結果仍存爭議。藍俊虹等（2020）研究表明，飼糧中添加1000 mg/kg GML 能顯著增加仔豬ADG，顯著降低F/G，提高仔豬生長性能。 李濤等（2013）研究表明，飼料中添加0.4% GML 對斷奶仔豬生產性能影響差異不顯著。 López-Colom 等（2020）考察了從椰子油中提取的中鏈脂肪酸鈉鹽混合物（其中月桂酸占總脂肪酸的48.4%）對沙門氏菌和大腸桿菌攻毒仔豬的保護作用，結果表明，該混合物對沙門氏菌攻毒前后的仔豬生長性能無顯著影響，但顯著降低了大腸桿菌攻毒后4 ～8 d仔豬的日增重。 在本試驗中，GML 對生長性能無顯著影響，但在各階段都有降低采食量的趨勢，這可能是因為GML 中含有一定量的游離月桂酸，影響了適口性，導致采食量降低。

GML 是脂肪酸及其衍生物中抑菌活性最強的化合物， 和有機酸復配在體外具有抑菌增效作用（張希等，2016；Kim 和 Rhee，2013）。 但 GML 和有機酸復配在仔豬上的應用研究鮮見報道。 曠義文等（2018）將 MCFAs（包含月桂酸和葵酸）、甲酸鈣、乳酸鈣和檸檬酸添加到斷奶仔豬飼糧中，并與含氧化鋅的抗生素飼糧進行比較。結果表明，飼糧添加MCFAs 和有機酸的混合物替代 ZnO 有利于提高斷奶仔豬的采食量和生長速度， 并且不影響飼料的轉化效率。本研究結果表明，GML 與FA 復配提高了日增重，降低了腹瀉率，但從統計上未達到顯著水平。 分析原因可能和GML 的添加量有關，Gebhardt 等（2020）評價了在保育豬飼糧中添加MCFAs 促進生長的效果， 結果表明MCFAs 添加量為 0.25%、0.5%、1.0%和 1.5%時，ADG、ADFI和 FCR 呈線性劑量依賴性改善（P ＜ 0.01）。 本研究中GML 的添加量僅為0.03%，遠低于達到顯著水平的添加量。

3.2 GML 及其與FA 復配對仔豬血清生化指標的影響 動物機體新陳代謝機能和組織細胞通透性的改變最終反映在血清生化指標的改變上 （蔣小豐等，2009）。血清BUN 是體內蛋白質和氨基酸代謝的產物，BUN 含量降低表明氮沉積增加。 本研究中，抗生素組的BUN 含量顯著降低，表明抗生素能提高蛋白質代謝的利用率。 TP 和ALB 含量反映了機體蛋白質的吸收和代謝狀況 （鄭有秀等，2018）。血清GLU 含量分別反映出機體糖代謝情況。 血清中 ALT 和 AST 的水平高低反映了肝臟是否受到損傷以及損傷程度（王吉等，2017）。血清 TC、TG、HDL-C 和 LDL-C 含量是衡量機體脂類代謝的重要指標。 本試驗研究結果表明，GML及其與 FA 復配對血清 TP、ALB、GLU、BUN、TC、TG、HDL-C、LDL-C 含量及 ALT、AST 活性均無顯著影響。 表明GML 和FA 的添加不會對川藏黑豬仔豬健康狀況和營養物質代謝產生負面影響。

3.3 GML 及其與FA 復配對仔豬血清抗氧化能力的影響 機體的健康狀況與抗氧化能力大小存在著密切的聯系。 體內的抗氧化系統包括T-SOD、GSH-Px、CAT 等。 血清 T-AOC 是用于衡量機體抗氧化系統功能狀況的綜合性指標，可反映機體所具有的總抗氧化能力，MDA 含量則反映脂質過氧化程度。 在蛋雞（劉夢蕓等，2017）、花鱸（孫彩云等，2021）、斷奶羔羊（王賀澤等，2021）上的研究表明，GML 添加能夠提高 T-AOC、SOD 和 GSH-Px 活性，提高機體抗氧化能力。然而尹彩娜等（2008）研究表明，在小鼠日糧中添加椰子油能顯著提高小鼠血清MDA 濃度， 顯著降低 GSH-Px 活性。 本研究中GML 及其與FA 復配顯著提高了仔豬血清MDA含量， 單獨添加GML 還顯著或極顯著降低了血清中的GSH-PX活性和T-AOC，表明GML 可降低仔豬血清總抗氧化能力。出現不同結果的原因可能與GML 的來源、添加量和試驗條件不同有關。

3.4 GML 及其與FA 復配對仔豬血清免疫功能的影響 免疫球蛋白是血液和組織液中的一類糖蛋白，由B 細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞所產生， 是介導體液免疫的重要免疫因子。 曠義文等（2018）研究表明，有機酸和中鏈脂肪酸合用可顯著增加仔豬血清IgG 含量，提高免疫功能。De Keyser 等（2019）報道，仔豬飼喂辛酸和己酸的混合物后，再用脂多糖攻毒，其血清中的IgA 含量顯著高于抗生素組。 本研究結果也表明，GML 與FA 復配能提高仔豬血清IgA 和IgG 含量，與前人的研究結果相同。 細胞因子是免疫系統的重要組成部分，IL-6 可刺激 T 細胞、B 細胞、雜交瘤細胞和干細胞增殖， 促進B 細胞產生免疫球蛋白。TNF-α 能殺傷腫瘤細胞，參與免疫調節（周光炎，2019）。 Kono 等（2004）研究表明，中鏈脂肪酸甘油三酯能保護脂多糖誘導的大鼠腸道損傷， 增強腸道 IL-6 的 mRNA 表達水平，降低 TNF-α 和 IL-18的表達水平。 Ren 等（2019）報道，在仔豬飼糧中添加0.64%甲酸、0.25%丙酸和0.2%癸酸， 可緩解大腸桿菌攻毒后的炎性反應， 表現為攻毒后9 h 和24 h 血漿 TNF-α 和 IFN-γ 濃度顯著降低。 本研究結果表明，GML 與FA 復配提高了仔豬血清IL-6和TNF-α 含量，和前人的報道有所不同，這可能和有機酸復合物的種類差異和動物健康狀況有關。 有機酸復合物的免疫調節作用可能與其對腸道微生物的影響有關（Zentek 等，2013），通過腸道微生物和免疫系統的互作，間接影響免疫系統。

4 結論

GML 及其與FA 復配取代飼用抗生素對川藏黑豬配套系商品仔豬生長性能無明顯影響， 降低了仔豬抗氧化能力，但提高了仔豬免疫功能。在本試驗條件下，GML 與FA 復配相比于GML 更加有利于仔豬的生長。