活檢聯(lián)合TCT、HR-HPV檢測在宮頸疾病中的應(yīng)用

陳雁娜

子宮頸癌主要是指發(fā)生在子宮頸部位的惡性腫瘤，在女性惡性腫瘤中較為常見，受到生活方式以及飲食習(xí)慣改變等因素的影響，子宮頸癌患病率逐漸升高，對(duì)女性機(jī)體健康以及生命安全產(chǎn)生不利影響，因此對(duì)子宮頸癌和癌前病變實(shí)施有效篩查尤為重要[1]。人乳頭瘤病毒（human papillo mavirus，HPV）是疾病發(fā)生的最主要危險(xiǎn)因素。臨床傳統(tǒng)篩查方式是肉眼觀察以及宮頸刮片，在臨床應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，上述兩種檢測方式誤診率以及漏診率較高[2]。伴隨臨床檢測技術(shù)的發(fā)展高危型人乳頭瘤病毒檢測（high risk human papillomavirus，HR-HPV）、液 基 細(xì) 胞 學(xué) 檢 查（thinprep cytology test，TCT）以及陰道鏡下宮頸活檢等檢測方式均被應(yīng)用于臨床子宮頸癌篩查以及診斷中，盡管上述三項(xiàng)檢測方式可顯著提升檢測準(zhǔn)確性，但單一使用時(shí)容易受到多種因素影響，而造成檢測結(jié)果存在一定偏差[3]。為此，本次研究分析TCT檢查與HR-HPV檢測分別聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢的診斷情況，現(xiàn)將研究過程以及研究結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院接收的200例開展子宮頸癌篩查的女性為研究樣本，其檢查時(shí)間均在2019年6月—2020年6月。200例女性年齡22～70歲，平均年齡（45.62±5.02）歲；妊娠次數(shù)在1～4次，平均妊娠次數(shù)（2.69±1.18）次；分娩次數(shù)1～3次，平均分娩次數(shù)（1.66±0.28）次；在學(xué)歷水平方面，52例（26.00%）為初中及以下，80例（40.00%）為中專和高中，61例（30.50%）為大專和本科，7例（3.50%）為本科以上；體檢者87例（43.50%），出現(xiàn)陰道異常出血、性交后出血或是白帶增多等臨床表現(xiàn)者113例（56.50%）；其中有145例（72.50%）女性出現(xiàn)不同程度宮頸糜爛情況。所有女性對(duì)本次研究享有知情同意權(quán)，在充分了解研究內(nèi)容后自愿簽署相關(guān)文書。排除子宮切除者、有宮頸手術(shù)史、陰道病原體感染者以及妊娠女性。本次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過。

1.2 方法

全部女性均分別開展TCT以及HR-HPV，針對(duì)檢測結(jié)果呈陽性者再實(shí)施陰道鏡下宮頸組織活檢。

TCT檢測：醫(yī)師在女性宮頸管內(nèi)約1 cm部位使用一次性子宮細(xì)胞刷按順時(shí)針方向圍繞其宮頸部位轉(zhuǎn)動(dòng)5周，采集宮頸管細(xì)胞，之后使用保護(hù)液實(shí)施浸泡和漂洗，將采集并漂洗后的細(xì)胞樣本送至檢驗(yàn)科開展檢驗(yàn)。在檢測前需使用自動(dòng)細(xì)胞制片機(jī)將其制成標(biāo)本片，對(duì)制片要求上皮覆蓋率需超過10%。

HR-HPV檢測：于宮頸外口使用無菌生理鹽水進(jìn)行充分清洗，將一次性子宮細(xì)胞刷放置在宮頸內(nèi)，5 s后轉(zhuǎn)動(dòng)并采集宮頸分泌物，子宮細(xì)胞刷取出后放置在無菌玻璃瓶內(nèi)。選擇1 mL樣本，并置于離心管內(nèi)，持續(xù)10 min離心處理后，選擇管底細(xì)胞沉淀，添加50 μL裂解液后煮沸，再次進(jìn)行離心處理。開展聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增，反應(yīng)條件依次是：50℃環(huán)境中15 min，95℃環(huán)境中10 min，94℃環(huán)境中30 s，42℃環(huán)境中90 s，72℃環(huán)境中30 s，循環(huán)操作40次，并在72℃環(huán)境下延伸5 min。將擴(kuò)增后的產(chǎn)物置于冰箱中，最后開展基因分型。檢測當(dāng)前已知的16種致癌型HR-HPV-DNA，分別是16型、18型、31型、33型、35型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型、68型、CP8304型。

陰道鏡下宮頸組織活檢：在女性月經(jīng)結(jié)束3～7 d后，使用JH-5002型數(shù)碼電子陰道鏡（采購自江蘇佳華電子設(shè)備有限公司）對(duì)其實(shí)施相應(yīng)檢查，囑女性在檢查前1 d嚴(yán)禁性生活、禁止用藥和清潔陰道等，檢查前首先在宮頸涂5%醋酸實(shí)施觀察，之后涂2%碘溶液開展觀察。開展陰道鏡檢查時(shí)，需要重點(diǎn)觀察其宮頸部位異常組織形態(tài)、體積、顏色、血管結(jié)構(gòu)和碘反應(yīng)等情況。針對(duì)有異常情況者，需在異常部位采集組織標(biāo)本實(shí)施病理檢查。對(duì)于無典型異常者，可分別在宮頸3、6、9點(diǎn)以及12點(diǎn)部位采集組織標(biāo)本，使用4%甲醛進(jìn)行固定后送病理檢查。

1.3 觀察指標(biāo)

比較TCT檢查以及HR-HPV檢測陽性率、陰性率以及敏感度。陽性率=（陽性例數(shù)/總例數(shù)）×100%；陰性率=（陰性例數(shù)/總例數(shù)）×100%；敏感度=（組織學(xué)陽性例數(shù)/檢查陽性例數(shù)）×100%。（1）分析TCT檢查與HR-HPV檢測分別聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢陽性例數(shù)以及分布情況。陰道鏡下宮頸組織活檢判斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：使用改良Reid陰道鏡評(píng)分進(jìn)行判斷，其中0分代表宮頸組織正常或有慢性宮頸炎存在；1～2分表示為宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)（CINⅠ）；3～4分代表宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ級(jí)（CINⅡ）；≥5分表示宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅲ級(jí)（CINⅢ）。良性細(xì)胞改變屬于陰性，非典型鱗狀上皮細(xì)胞改變、腺癌以及鱗狀細(xì)胞癌屬于陽性。（2）TCT檢查判斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：使用TBS分級(jí)進(jìn)行判斷，其中正常或是良性改變屬于陰性，非典型鱗狀上皮細(xì)胞改變及以上均屬于陽性，主要包含低度鱗狀上皮內(nèi)病變、鱗狀細(xì)胞癌、高度鱗狀上皮內(nèi)病變以及腺癌。HRHPV檢測判斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：當(dāng)檢測結(jié)果提示大于等于5.0×102拷貝時(shí)表示呈陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 22.0軟件，計(jì)量資料以（±s）表示，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT檢查以及HR-HPV檢測陽性率、陰性率以及敏感度比較

TCT檢查陽性率低于HR-HPV檢測陽性率，但其敏感度高于HR-HPV檢測（P＜0.05），見表1。

表1 液TCT檢查以及HR-HPV檢測陽性率、陰性率以及敏感度對(duì)比

2.2 TCT檢查與HR-HPV檢測分別聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢結(jié)果

TCT檢查聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢提示陽性結(jié)果為34例，陽性率是17.00%（34/200），其中CINⅡ及以上者有21例，占比61.76%（21/34）。HR-HPV檢測聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢提示陽性結(jié)果為50例，陽性率25.00%（50/200），其中CINⅡ及以上者有19例，占比38.00%（19/50）。TCT檢查聯(lián)合活檢診斷CINⅡ及以上者陽性率高于HR-HPV檢測聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢（χ2=18.187，P＜0.05），見表2。

表2 TCT檢查與HR-HPV檢測分別聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢結(jié)果比較[例（%）]

3 討論

子宮頸癌主要是指出現(xiàn)在子宮頸部位的惡性腫瘤，在女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中最為常見，而人乳頭瘤病毒感染是導(dǎo)致疾病發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素。另外，由于受到初產(chǎn)年齡低、口服避孕藥物以及過早性生活等因素影響，導(dǎo)致子宮頸癌發(fā)病出現(xiàn)年輕化趨勢。盡管臨床對(duì)子宮頸癌明確的發(fā)病機(jī)制還尚未完全了解，但臨床普遍認(rèn)為子宮頸癌可通過早發(fā)現(xiàn)、早治療措施進(jìn)行有效預(yù)防。因此，臨床將探尋何種有效的疾病篩查方式作為研究重點(diǎn)。

目前，臨床常用的子宮頸癌篩查診斷方式有宮頸刮片、TCT檢查、HR-HPV檢測以及陰道鏡組織活檢，其中TCT檢查以及HR-HPV檢測因操作方法簡便、檢測費(fèi)用較低等優(yōu)勢在臨床篩查中被廣泛使用[7]。在李琪[8]的研究中，其發(fā)現(xiàn)在子宮頸癌陽性檢出率方面，TCT檢查結(jié)果是79.30%，HR-HPV檢測結(jié)果是84.50%，TCT檢查陽性率低于HR-HPV檢測。在本次研究中，HR-HPV檢測陽性率是30.00%，高于TCT檢查陽性率18.00%，但其敏感度低于TCT檢查（P＜0.05）。另外，TCT檢查聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢CINⅡ及以上者占比是61.76%，高于HR-HPV檢測聯(lián)合陰道鏡下宮頸活檢的38.00%（P＜0.05）。分析結(jié)果可知，子宮頸癌患病同HPV感染相關(guān)，盡管HPV感染過程較長，若病患機(jī)體免疫功能較強(qiáng)，當(dāng)感染HPV病毒時(shí)，通常無顯著臨床表現(xiàn)；但是當(dāng)機(jī)體免疫功能下降后，HPV病毒則會(huì)使宮頸內(nèi)皮出現(xiàn)不典型增生，從而導(dǎo)致子宮頸癌發(fā)生。TCT檢查是采用液基薄層細(xì)胞檢測系統(tǒng)檢測宮頸細(xì)胞并實(shí)施細(xì)胞學(xué)分類診斷，窮屬于國際上較先進(jìn)的一種子宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)，相較于傳統(tǒng)宮頸刮片巴氏涂片檢查，其顯著提升標(biāo)本滿意度和宮頸異常細(xì)胞檢出率。實(shí)施TCT檢查存在制片均勻、圖像清晰度高以及便于判斷等優(yōu)勢，加之TBS分級(jí)系統(tǒng)在臨床的使用，使得TCT檢查準(zhǔn)確度以及特異性均有明顯升高[9]。并且在TCT宮頸防癌細(xì)胞學(xué)檢查中，其不僅能夠檢出癌細(xì)胞，還可發(fā)現(xiàn)部分癌前病變，例如衣原體、病毒、滴蟲以及霉菌等微生物感染，因此TCT檢查是應(yīng)用于婦科宮頸癌篩查的一項(xiàng)先進(jìn)技術(shù)。但是單獨(dú)應(yīng)用該種檢查方式容易受到制片質(zhì)量、閱片經(jīng)驗(yàn)以及取材質(zhì)量等主觀因素影響。導(dǎo)致HR-HPV檢測敏感度下降的因素可能與DNA攝取不足、DNA被污染以及操作不當(dāng)?shù)纫蛩叵嚓P(guān)，從而影響HR-HPV檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[10-11]。上述兩種診斷方式在單獨(dú)使用時(shí)，均會(huì)存在一定誤診和漏診情況。伴隨陰道鏡在臨床的推廣以及使用，利用陰道鏡對(duì)宮頸部位組織進(jìn)行觀察，可采集可疑標(biāo)本實(shí)施病理檢查，可一定程度上提升檢測準(zhǔn)確性[12-14]。將陰道鏡應(yīng)用于宮頸癌前病變檢查中，能夠明確宮頸癌前病變范圍以及嚴(yán)重程度，進(jìn)而直接觀察宮頸上皮以及血管的微小改變，同時(shí)在可疑部位實(shí)施定位活檢，能夠指導(dǎo)手術(shù)范圍，當(dāng)前醋酸檢測以及盧戈氏碘液檢測是陰道鏡下定位活檢最常使用的方式[15]。該種檢測方式操作簡便、價(jià)格低廉，操作者容易掌握，故而在臨床得到廣泛應(yīng)用。因此，將TCT檢查與HR-HPV檢測分別聯(lián)合陰道鏡活檢，在提升宮頸癌以及癌前病變?cè)\斷效果方面具有重要意義[16]。

綜上，TCT檢查與HR-HPV檢測分別聯(lián)合陰道鏡活檢，在宮頸癌以及癌前病變?cè)\斷方面均可發(fā)揮一定效果，有利于疾病早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，維護(hù)病患機(jī)體健康。