口腔鱗狀細胞癌組織中survivin、IL-24的表達及意義

周曉麗 鄭雪莉 李福軍

口腔癌患者口腔內(nèi)部分布多種菌群，由于口腔內(nèi)部具有豐富的血液循環(huán)及頻繁的舌肌運動，癌變后極易出現(xiàn)菌群失調(diào)及口腔感染，部分嚴重患者還易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，具體的發(fā)病機制尚不明確[1]。

研究[2]認為口腔癌的出現(xiàn)不僅表現(xiàn)為細胞異常增殖，也是細胞異常凋亡的結(jié)果，但細胞凋亡機制較為復雜，多種因子參與上述過程中。Survivin是現(xiàn)階段發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制作用最強的基因，但關于口腔癌的研究資料較少[3]。最新的文獻[4]提示IL-24能夠抑制癌細胞浸潤和腫瘤血管的生成、誘導癌細胞凋亡并增強對化療、放療的敏感性，在乳腺癌、卵巢癌、肺癌及黑色素瘤等多種惡性腫瘤中均具有抑制腫瘤細胞生長的作用。本研究探討了口腔鱗狀細胞癌組織中survivin、IL-24表達及意義，現(xiàn)匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2020年3月我院保存的口腔鱗狀細胞癌組織65例，同時選取口腔扁平苔蘚組織40例，正常口腔黏膜組織33例，各組織一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)，見表1。納入標準：①均經(jīng)病理學確診；②臨床病歷資料保存完整；③患者及家屬知情同意。排除標準：①術前行放化療等抗腫瘤治療；②合并有其他系統(tǒng)惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病等。

表1 各組一般資料比較

1.2 實驗方法

免疫組化染色法檢測survivin、IL-24表達。分別取適量口腔鱗狀細胞癌組織、扁平苔蘚組織及正常黏膜組織石蠟包埋后常規(guī)切片，乙醇復水后蒸餾水沖洗，過氧化氫(3%)滅活內(nèi)源性過氧化物酶，修復液抗原修復后牛血清蛋白(5%)封閉，滴加一抗抗體，4℃孵育過夜后滴加羊抗兔二抗，37℃與SABC混合孵育30 min后，DAB染色，蘇木精復染；脫水、透明后中性膠封片，高倍顯微鏡觀察survivin、IL-24表達情況[5]。

1.3 結(jié)果判斷

采用雙盲法，由兩名病理科醫(yī)師每張切片隨機選取10個視野，每個視野計數(shù)100個細胞，其中陽性細胞比例≤5%為0分，>5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%為3分；染色強度無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽性細胞比例和染色強度得分之積≥3分為陽性表達[6]。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果

2.1 各組survivin、IL-24表達比較

口腔鱗狀細胞癌組織survivin陽性表達率明顯高于正常口腔黏膜組織和口腔扁平苔蘚組織(P<0.05)，而IL-24陽性表達率明顯低于正常口腔黏膜組織和口腔扁平苔蘚組織(P<0.05)。見表2。

表2 各組survivin、IL-24表達比較(例，%)

2.2 survivin、IL-24表達與口腔鱗狀細胞癌臨床病理特征的關系

TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者survivin陽性表達率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者IL-24陽性表達率明顯低于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)。見表3。

表3 survivin、IL-24表達與口腔鱗狀細胞癌臨床病理的關系(例，%)

2.3 相關性分析

口腔鱗狀細胞癌組織中survivin與IL-24表達呈負相關(γs=-0.585，P<0.05)，見表4。

表4 相關性分析/例

3 討論

口腔鱗狀細胞癌是指發(fā)生在舌、牙齦、頰、腭、口底等口腔部位的鱗狀上皮癌，屬于口腔癌中最常見的病理類型。口腔的鱗狀上皮癌除了局部增生，侵蝕周圍組織造成功能障礙以外，還經(jīng)常會發(fā)生相應的頸部淋巴引流區(qū)的淋巴轉(zhuǎn)移[7]。但目前關于口腔鱗癌具體的發(fā)生、發(fā)展機制尚不明晰，能夠在早期準確診斷口腔癌，對提高治療效果具有重要意義。

Survivin基因?qū)儆诘蛲鲆种频鞍准易澹蓞⑴c細胞的有絲分裂過程，其異常高表達可促使腫瘤細胞逃避凋亡并促進細胞增殖，具有調(diào)節(jié)細胞增殖和抑制細胞凋亡的雙重作用[8]。IL-24是抗腫瘤基因，具有細胞因子特性，可通過介導多種不同信號通路，調(diào)節(jié)細胞的免疫效應、增殖分化及自噬效應，進而抑制癌細胞浸潤和轉(zhuǎn)移、誘導癌細胞凋亡、抑制血管生成[9]。近年來關于胰腺癌、肺癌及乳腺癌等的研究[10,11]發(fā)現(xiàn)IL-24可抑制上述瘤種的細胞生長，但關于口腔鱗癌的研究資料較少。

本研究結(jié)果顯示口腔鱗狀細胞癌組織survivin陽性表達率明顯高于正常口腔黏膜組織和口腔扁平苔蘚組織，而IL-24陽性表達率明顯低于正常口腔黏膜組織和口腔扁平苔蘚組織。提示survivin、IL-24可以作為口腔癌發(fā)生、發(fā)展的重要標志物，具有成為腫瘤診斷的理想標志物和基因治療的重要靶點的潛力。Survivin以細胞周期依賴方式表達于G2/M期而作用于有絲分裂，能夠使腫瘤細胞克服凋亡調(diào)控點[12]，因而口腔癌組織中存在survivin高表達。

survivin、IL-24表達與口腔鱗狀細胞癌臨床病理關系結(jié)果顯示TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者survivin陽性表達率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者IL-24陽性表達率明顯低于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)。上述結(jié)果說明survivin、IL-24與腫瘤的TNM分期、組織分化及淋巴轉(zhuǎn)移具有相關性，可參與口腔鱗狀細胞癌的發(fā)生、發(fā)展過程，可初步將survivin認為是口腔鱗癌的候補促癌基因，IL-24作為候補抑癌基因。

相關性分析發(fā)現(xiàn)口腔鱗狀細胞癌組織survivin與IL-24表達呈負相關。該結(jié)果說明腔鱗狀細胞癌組織中survivin表達升高，而IL-24表達降低具有相關性，可能是因為survivin可抑制線粒體活化并通過與線粒體的直接結(jié)合，抑制IL-24的表達，進而干預細胞的凋亡進程，但具體機制還有待進一步研究證實。有文獻[13-16]提示IL-24主要通過MARK/ERK、JNK、PI3K-AKT等多條通路誘導癌細胞凋亡及抑制癌細胞增殖，此過程還涉及增加促凋亡蛋白Bax的表達、抑制抗凋亡蛋白Bcl-2級上調(diào)caspase蛋白酶等多種過程，阻斷腫瘤細胞周期，進而促進細胞凋亡。但現(xiàn)階段IL-24作為新型抑癌基因僅為口腔癌的治療提供了部分理論基礎，具體的調(diào)控和作用機制還需要更深入的研究。

綜上所述，口腔鱗狀細胞癌組織中survivin表達升高、IL-24表達降低，且與TNM分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關，值得進一步研究。