支氣管鏡冷凍肺活檢聯合血清CCR3、LDH、IL-33在周圍型肺癌檢出率及病理分型判斷中的應用

康貝貝

隨著近年來環境污染愈發嚴重，肺癌發病率與死亡率較高，且癌組織轉移快且發展迅速，故早期診斷肺癌并及時治療對患者具有重要價值。肺活檢為臨床診斷肺癌金標準，為不可或缺的技術[1-2]。肺活檢常用方式有外科肺活檢、超聲或X線引導下經皮肺穿刺活檢、經支氣管鏡鉗夾活檢等，其中經支氣管鏡鉗夾活檢因對機體損傷小，能重復操作而成為肺癌診斷重要方式，但該方式獲得的組織標本小，診斷價值受限。隨著醫療技術的不斷發展，經支氣管鏡冷凍肺活檢在臨床中得到較好發展，不僅有低損傷、重復操作等優勢，還能獲得較大組織標本，具有一定診斷價值[3]。CC趨化因子受體3(CCR3)為CC趨化因子受體的一種，主要由單一肽鏈形成的螺旋反復穿透細胞形成的跨膜區組成，屬于G受體蛋白耦聯受體，與配體結合后激活受體，通過信號傳導產生效應，在細胞遷移及顆粒釋放變化中發揮作用。乳酸脫氫酶(LDH)為糖酵解酶，機體正常狀態下含量較低，當腫瘤細胞損傷后，在病理狀態下代謝紊亂，釋放入血而使其酶量上升；血清LDH為惡性腫瘤預后有效因素，水平上升能反映病灶腫塊大小及對治療的有效性。白介素33(IL-33)為IL-1家族成員，多表達于多種組織細胞中，特別是在呼吸道黏膜系統中具有高水平表達；正常生理狀態下，IL-33可維持黏膜系統屏障功能，當機體受到外源刺激或組織發生損傷壞死等情況，誘導IL-33釋放于細胞外，結合特異識別受體而發揮作用[4]。為此，本研究觀察支氣管鏡冷凍肺活檢聯合血清CCR3、LDH、IL-33對周圍型肺癌的檢出率并判斷病理分型情況，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2020年4月我院收治的78例確診為周圍型肺癌的患者。納入標準：符合《中國臨床腫瘤學會肺癌診療指南(2018版)》標準[5]且經胸部CT、病理檢查確診為周圍型肺癌[6]；簽署知情同意書。排除標準：肺部嚴重感染患者；支氣管哮喘發作患者、肝腎功能不全患者；精神疾病患者；昏迷或意識障礙患者。納入的患者中男性51例，女性27例；年齡為43～70歲，平均為(57.39±10.94)歲；病理類型：腺癌39例、鱗癌19例、小細胞癌12例、其他類型肺癌8例；病灶直徑：<2 cm 12例、2～6 cm 51例、>6 cm 15例。

1.2 方法

經支氣管鏡冷凍肺活檢方法：患者手術前4 h開始禁食，取仰臥位并給予吸氧，使用心電監護儀對患者生命體征進行監測。采用超聲霧化吸入2%利多卡因對患者進行麻醉或靜脈誘導麻醉，使用多功能冷凍儀對患者行冷凍活檢處理，操作步驟：患者處于麻醉狀態后，使用冷凍探頭插入軟鏡工作通道中，探頭至病變部位或緊靠病變中心(探頭與胸膜保持超過2 cm)，冷凍時間為3～6 s，待探頭周圍出現冷凍結晶后取出軟鏡與黏附于探頭上的標本，摘除探頭上病變組織，當未發現氣胸或出血等嚴重情況，可再次重復上述步驟取病變組織，使用多聚甲醛對組織進行固定，通過病理切片檢查；當患者發生出血，采取止血措施處理[7]。

血清學檢查方法：取患者空腹靜脈血，離心后分離血清，放于冰箱中備用。采用酶法測定LDH水平，LDH參考范圍為100～225 U/L；采用酶聯免疫吸附測定法檢測IL-33水平，IL-33正常值為100～2000 pg/ml。各指標檢測結果不足正常值下限表示陰性，高于正常值上限表示陽性[8]。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 患者經支氣管鏡冷凍肺活檢、血清CCR3、LDH、IL-33檢出率比較

經支氣管鏡冷凍肺活檢、血清CCR3、LDH、IL-33單獨及聯合檢查的陽性檢出率分別為82.05%(64/78)、62.82%(49/78)、58.97%(46/78)、51.28%(40/78)、92.31%(72/78)，經支氣管鏡冷凍肺活檢聯合血清CCR3、LDH、IL-33的檢出率高于單獨檢查(P<0.05)。

2.2 經支氣管鏡冷凍肺活檢、血清CCR3、LDH、IL-33對病理分型判斷的符合率比較

支氣管鏡冷凍肺活檢聯合血清CCR3、LDH、IL-33對腺癌、鱗癌、小細胞癌及其他類型肺癌陽性判斷的符合率高于單獨檢測(P<0.05)。見表1。

表1 對病理分型判斷的符合率比較(例，%)

2.3 經支氣管鏡冷凍肺活檢、血清CCR3、LDH、IL-33對病灶直徑檢出率比較

隨著病灶不斷增大，各檢測方法陽性檢出率逐漸增高。支氣管鏡冷凍肺活檢聯合血清CCR3、LDH、IL-33對病灶直徑<2 cm、2～6 cm、>6 cm陽性檢出率高于單獨檢測(P<0.05)。見表2。

表2 對病灶直徑檢出率比較(例，%)

3 討論

隨著近年來環境惡化，肺癌發病率較高且呈上升趨勢，對人類健康及生命有嚴重威脅。肺癌常見癥狀為咳嗽，伴有聲音沙啞、咳血、胸痛、發熱及體型消瘦等表現，嚴重者出現癌細胞轉移與外侵，損傷機體器官，最終致使患者昏迷及死亡。周圍型肺癌是發生于三級支氣管以下、呼吸性支氣管以上的肺癌，發病原因為肺部細胞癌變，吸煙、肺部感染、電離輻射及遺傳等因素均可誘發病變，由于周圍型肺癌病灶處于肺葉或肺段支氣管遠端，常規柔性支氣管鏡在直視下無法觀察，故難以進行病理活檢。周圍型肺癌病變于肺部外周，起源支氣管遠端，多數在支氣管鏡下無法觀察，病理標本較難獲得，延誤診斷結果和及時治療[9-10]。肺癌治療的關鍵是早發現、早診斷，這對提高患者預后極為重要。

支氣管鏡檢是一種微創方法，具有較高的安全性，在臨床診斷與鑒別呼吸疾病中具有重要作用。目前臨床確診肺癌的診斷方式主要有支氣管鏡下活檢、經皮肺活檢及外科肺活檢，不同肺活檢方式優缺點不同，采用何種方式診斷周圍型肺癌目前無確切定論。在CT引導下經皮肺活檢因受到解剖部位干擾而較難定位，且取材較少無法確診；外科肺活檢確診率較高，但該方式對機體創傷較大、操作較難，且術后有較多并發癥而不被患者接受。經支氣管肺活檢對機體損傷小，能重復操作，是診斷周圍型肺癌的重要方式，但該方法取出的組織標本小，需反復操作檢查，增加患者痛苦，尤其是老年患者，其耐受度較低、操作風險相對于年輕患者較大，對診斷價值有極大影響。隨著醫療水平與器械不斷進步發展，經支氣管鏡冷凍技術應用于氣道性疾病中，尤其是氣道腫物介入治療，具有良好效果[11-13]。支氣管鏡冷凍肺活檢是將冷凍的探頭插入軟鏡工作通道內，探頭至病變位置或緊靠病變部位內中心位置后進行3～6 s冷凍，待其周圍出現冷凍的結晶，一同取出黏附與探頭上的標本及軟鏡，除去探頭上病變組織，若患者無氣胸、出血等情況可再次重復上述步驟取組織標本。該方式取得的標本質量較高、對機體創傷較小、檢查費用低且術后并發癥較少，廣泛應用于臨床。

CCR3為G蛋白耦聯受體超家族，多表達于嗜酸粒細胞上，介導患者氣道中大多數嗜酸粒細胞浸潤，并活化該細胞，促進其脫顆粒，產生多種效應因子而出現咳嗽等癥狀。該物質最初從嗜酸性粒細胞與單核細胞中分離得到，研究顯示其與膠質母細胞瘤、前列腺癌等侵襲遷移有關。抑制CRR3可抑制CCL7介導肺癌細胞侵襲與轉移力，降低肺癌細胞水平和破骨細胞分裂。LDH是廣泛存在于機體肝腎、骨骼肌等組織中的糖酵解酶，在腫瘤組織中也具有豐富含量。該酶水平變化與肺癌發生發展密切相關，研究顯示腫瘤組織中的糖酵解高于正常組織，故參與糖酵解的LDH水平上升。癌細胞壞死、細胞膜通透性變化及代謝加快等使腫瘤組織中的酶釋放入血，導致血清LDH水平上升[13-14]。LDH濃度為惡性腫瘤預后因素，水平上升反映腫塊大小及對治療有效性。隨著癌癥病程進展及原發腫塊變大、病灶轉移、胸腔積液產生等，LDH呈上升趨勢。血清LDH在病情不同階段水平有明顯不同，說明觀察不同時期血清LDH水平能了解患者病情變化情況，尤其是在隨訪期間復查血清LDH驟增，提示LDH水平突然上升對局部晚期肺癌有診斷價值。IL-33為白介素超級家族的成員，在內皮細胞細胞核中呈高表達，也稱高內皮細胞來源的核因子。IL-33多存在于多種腫瘤組織間質及血清中，呈多樣化表達。研究報道[15]，IL-33在乳腺癌血清、結直腸癌癌旁組織及非小細胞癌患者血清中呈高表達。相比于健康人群，肺癌患者血清中IL-33水平高低不同。周圍型肺癌病變位置多發生于段支氣管下方，病灶在常規支氣管鏡下難以觀察，故支氣管鏡肺活檢存在盲目性，尤其是難以確定活檢鉗是否位于病灶中心、外周、壞死組織內，進而影響診斷準確率；病灶病變大小與位置對診斷陽性率具有重要判斷價值。隨著病灶逐漸增大，診斷陽性率也得到提高[16-18]。病灶位置對活檢陽性率也有一定影響，病變位于下葉背段、上葉尖端活檢陽性率低于其他部位，可能與解剖結構有關，該些部位病變，采用支氣管鏡檢查需行較大彎曲角度而使活檢鉗無法進入，增加取材難度，很難取得較佳的組織標本。研究顯示[19]，經支氣管鏡冷凍肺活檢應在全身麻醉下采用氣管插管或硬質氣管鏡進行。由于冷凍探頭位置極為重要，與胸膜太靠近易增加氣胸風險；靠近中央無法獲得肺組織標本，且易撕裂無軟骨保護的血管，提高出血風險。

綜上所述，支氣管鏡冷凍肺活檢聯合血清CCR3、LDH、IL-33檢測周圍型肺癌相對于單項檢查，具有更高的檢出率，病理分型判斷更準確，推薦臨床使用。