葉酸代謝障礙風險人群葉酸干預效果評估

胡允棟 孟慶紅

(1 山東省鄆城縣婦幼保健計劃生育服務中心 山東 菏澤 274700 2 山東省鄆城縣第二人民醫院 山東 菏澤 274700)

前言

葉酸又被稱為維生素B9，屬于水溶性維生素之一。1992年中美預防神經管畸形合作項目啟動，在研究中追蹤了25萬例新婚婦女以及妊娠解決之后發現，準媽媽在備孕時期就堅持服用0.4毫克的葉酸，對于神經管畸形高發區具有80%之上的預防概率，在神經管畸形低發區當中的預防概率也有41%，該科技成果也被全球各個國家廣泛應用[1]。在孕婦妊娠期間如果葉酸攝入缺少將會導致胎兒出現神經管急性等等出生缺陷情況，因此，葉酸被產婦有效利用極為重要。本文正是基于此，主要選擇了2017年1月至2019年7月期間在我院進行產檢的209例葉酸代謝障礙風險孕婦為研究對象，對葉酸代謝障礙風險人群葉酸干預效果進行評估和分析，具體的研究情況報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

本研究重點分析了2017年1月至2019年7月期間在我院進行產檢的209例葉酸代謝障礙風險孕婦，將不依據醫囑補服葉酸的105例孕婦為對照組，將依據醫囑補服葉酸的104例孕婦為觀察組。對照組中產婦的年齡范圍在20歲至32歲間，平均年齡值為(26.92± 4.55)歲，觀察組中產婦的年齡范圍在21歲至35歲間，平均年齡值為(27.83± 4.21)歲，對照組和觀察組中的所有產婦一般資料經過軟件分析后沒有意義，可以進行后續分析。

1.2方法

(1)在孕婦整個孕期當中均對所有產婦進行常規性的孕期營養知識宣教，在日常的飲食當中增加產婦的葉酸攝入量。對照組中產婦未依據醫囑補服葉酸，觀察組當中產婦依據醫囑進行葉酸補服，具體的服用方式為：1、葉酸代謝障礙檢測低度風險產婦：在孕前3個月至整個孕期全程每天增加服用葉酸800μg。2、葉酸代謝障礙檢測后呈中度和高度風險產婦：在產婦孕前3個月至整個孕期每天增補800μg 葉酸，每天補充2.4μg 的維生素B12。

(2)兩個組別產婦均采取血液樣本。使用柱式質粒DNA小量抽試劑盒對樣本DNA進行提取。使用熒光定量PCR方式對相關基因多態性進行檢測，詳細操作如下：1)儀器與試劑：柱式抽提試劑盒(美國ABI公司；)，Taqman Universal Master Mix(美國ABI公司)，同型半胱氨酸監測試劑試劑盒(久強公司)，熒光定量RCR儀(美國ABI公司)，低溫離心機Beckman J-6B(美國貝克曼庫爾特有限公司)，PCR擴增儀(美國ABI公司)，TBA-120FR全自動生化分析儀(日本東芝)，2)方法：首先，提取細胞DNA：取口腔黏膜上皮細胞，取無菌棉簽實施反復刮取，隨后，使用柱式抽提試劑盒，提取樣本DNA。其次，PCR反應體系：1uLDNA模板，5uL的Taqman Universal Master Mix，0.5ul的Taqman -MGB探針，3.5uL 去離子水。3)PCR反應條件：實施預變性，溫度為95℃，持續10分鐘；實施變性，溫度92℃，持續1s。退火延伸，溫度為60℃，持續1分鐘，共循環20次。隨后，在89℃下實施變性，持續15s，在60℃環境下，退火延伸，持續90s，共循環30次。其三，使用熒光定量PCR反應三個位點，應用Taqman_MGB探針，在反應結束后，由ABI7900型熒光定量PCR儀中對樣品孔終點熒光進行讀取，使用分析軟件，對樣本中基因分型的結果進行確定。

1.3觀察指標

對比兩組別產婦妊娠解決，在臨床當觀眾對產婦產房以及產后45天妊娠解決進行追蹤。具體主要有新生兒體重、分娩方式以及妊娠合并癥等指標。

1.4統計學處理

2 結果

2.1兩組新生兒情況分析

對照組中新生兒體重、新生兒體重異常概率、胎兒心臟結構異常發生率高于觀察組，組別之間數據對比存在意義(P<0.05)，具體數據如下表1。

表1 兩組新生兒情況對比

2.2兩組孕婦分娩方式分析

對照組中剖宮產率顯著高于觀察組，產婦的順產概率則低于觀察組，組別之間數據對比存在意義(P<0.05)，具體數據如下表2。

表2 兩組別孕婦分娩方式對比[例(%)]

2.3 兩組妊娠合并癥比較分析

對照組妊娠合并癥出現概率顯著高于觀察組，組別之間數據對比存在意義(P<0.05)，具體數據如下表3。

表3 兩組別妊娠合并癥比較對比[例(%)]

2.4 妊娠合并癥與未發妊娠合并癥的基因多態性分析

妊娠合并癥組C/T高于未合并妊娠合并癥組，差異有統計學意義(P<0.05)；兩組C/C、C、T、T/C頻率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T頻率比較[n(%)]

妊娠合并癥組A/G高于未合并妊娠合并癥組，差異有統計學意義(P<0.05)；兩組A/A、A、G、G/G頻率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表5。

表5 甲硫氨酸合成酶還原酶基因A66G頻率比較[n(%)]

3 討論

3.1 葉酸代謝障礙風險人群的葉酸干預應用效果

眾所周知，新生兒體重是胎兒后續生長和發育過程當中的一大重要標志，其不僅僅胎兒在其胎兒期的生長以及營養狀況進行反映，同時也是能夠對胎兒出生之后的生長發育和健康狀況進行決定[2]。產婦的妊娠期間營養攝入過多或者過少都會對妊娠解決造成一定的影響，造成低體重以及巨大兒的出生概率[3]。對患者進行必要的檢測能夠對孕婦情況進行了解，進而對其采取必要的措施進行干預。在本文的研究當中發現，所選擇的209例產婦同樣屬于葉酸代謝障礙風險的孕婦群體，但是因為后續葉酸干預情況的不同，產婦的妊娠結局也存在一定的差異，在觀察組別當中產婦的新生兒體重異常出現概率顯著低于對照組中產婦。依據以往研究發現，新生兒體重與產婦體內葉酸水平趨勢呈正相關，產婦孕早期期間葉酸水平過低將會大大增加低體重新生兒的發生概率。在本次以研究當中還發現，葉酸代謝風險人群當中產婦的妊娠結局母語并發癥和其葉酸干預情況也所有關系，具體主要表現在妊娠合并高血壓、早產、妊娠合并糖尿病、妊娠合并肝內膽汁淤積綜合癥等等。

3.2 妊娠合并癥與葉酸代謝相關酶基因多態性分析

葉酸在食物中分布很廣，它經過腸道吸收后，在腸壁、肝臟及骨髓等組織，經葉酸還原酶作用，還原成具有生理活性的四氫葉酸，后者作為細胞內一碳單位的載體，參與嘌呤和嘧啶合成，并為DNA、蛋白質的甲基化提供甲基，所示四氫葉酸甲基載體之一的5-甲基四氫葉酸由5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)催化生成，是血液和細胞中存在的主要葉酸類型。5-甲基四氫葉酸參與的唯一已知反應是作為甲基供體，在甲硫氨酸合成酶催化下，以維生素B12為輔酶，促進血液中同型半胱氨酸再次甲基化生成甲硫氨酸(蛋氨酸)，以維持正常的血漿同型半胱氨酸水平。隨后，甲硫氨酸被ATP 磷酸化生成S-腺苷甲硫氨酸。S-腺苷甲硫氨酸參與機體內的生物大分子(包括DNA、蛋白質、脂類等)的甲基化，生成S-腺苷同型半胱氨酸。S-腺苷同型半胱氨酸再重新生成同型半胱氨酸，完成同型半胱氨酸代謝循環。因此，MTHFR 催化生成5-甲基四氫葉酸這步酶促反應至關重要，是葉酸代謝通路中的限速步驟。5-甲基四氫葉酸的存在是同型半胱氨酸向甲硫氨酸轉變的必要條件，也是甲基傳遞的重要載體。在葉酸攝入量不變的情況下，5-甲基四氫葉酸的量受MTHFR 的控制，即MTHFR 酶活性高時5-甲基四氫葉酸的產量高，MTHFR 酶活性低時5-甲基四氫葉酸的產量低。足量的5-甲基四氫葉酸是維持血液中同型半胱氨酸水平的重要因素，也是確保體內甲基化程度正常的保證。

研究指出，在妊娠合并癥患者的發病過程中，伴隨不同程度同型半胱氨酸水平升高現象，在半胱氨酸的代謝中，同型半胱氨酸與蛋白質合成不具有明顯關系，同型半胱氨酸利用誘導細胞，在細胞分裂期快速進入，進而實現細胞增殖；與此同時，在低密度脂蛋白的氧化過程中不斷加速，同型半胱氨酸有助于血小板聚集，對血管內皮細胞產生損傷，使得機體中對于妊娠期高血壓疾病疾病抵抗能力降低。同型半胱氨酸的再甲基化中，5-甲基四氫葉酸能夠合成蛋氨酸、氫葉酸，在此過程中，需要亞甲基四氫葉酸還原酶作用。亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T點突變為臨床常見錯義突變，可使得丙氨酸被纈氨酸所取代，使得亞甲基四氫葉酸還原酶基氨基酸結構發生變化，最終對亞甲基四氫葉酸還原酶活性產生影響。

綜上所述，孕婦進行葉酸干預行為將會對新生兒出生體重造成影響，孕婦的妊娠結局也會存在一定的差異。