甲基化PAX1在宮頸癌篩查中的臨床應用綜述

蘆曉莉 王亞美 雷林

【中圖分類號】R711.74 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）11--01

一、宮頸脫落細胞PAX1基因甲基化檢測：

PAX1基因是關鍵腫瘤的抑制基因，調控細胞分化成熟，基因異常甲基化與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、細胞癌變有著密切的關系。在宮頸細胞中，基因PAX1啟動子被甲基化后會因此造成該基因沉默或失活，因而喪失抑制腫瘤生長的功能，異常的細胞就失去控制，從而導致宮頸癌變，這一機制已被國際廣泛認可和研究，因此基因PAX1甲基化程度可作為檢測宮頸細胞是否正常，以及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的動態(tài)指標。

二、宮頸癌的發(fā)病機制：

宮頸癌目前仍然是全球女性的第四大常見腫瘤。據(jù)報道，我國每年約有新發(fā)病例13萬，約占世界宮頸癌新發(fā)病例總數(shù)的1/4，現(xiàn)已明確人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染尤其是高危型HPV（16-18）持續(xù)感染是誘發(fā)宮頸癌的明確病因之一，其致癌作用與HPV DNA和宿主DNA的整合有關。90%的單純HPV感染者可在2年內自然轉陰，尤其是<30歲女性。從感染到宮頸癌變，一般要5～20年。

宮頸癌是威脅女性健康的第二大婦科惡性腫瘤，并呈現(xiàn)年輕化趨勢。

因高危型HPV病毒持續(xù)感染引起由癌前病變逐步發(fā)展而來病理類型分為：

鱗癌（80%）? 腺癌（15-20%）? 鱗腺癌

危險因素：性生活過早、多個性伴侶、早孕多產(chǎn)或人流、吸煙、炎癥反復刺激，等。

早期宮頸癌常無明顯癥狀和體征，宮頸可光滑或難與宮頸柱狀上皮異位區(qū)別。頸管型患者因宮頸外觀正常易漏診或誤診。隨病變發(fā)展，可出現(xiàn)以下表現(xiàn)：

1.癥狀

（1）陰道流血早期多為接觸性出血：中晚期為不規(guī)則陰道流血。出血量根據(jù)病灶大小、侵及間質內血管情況而不同，若侵襲大血管可引起大出血。年輕患者也可表現(xiàn)為經(jīng)期延長、經(jīng)量增多：老年患者常為絕經(jīng)后不規(guī)則陰道流血。一般外生型較早出現(xiàn)陰道出血癥狀，出血量多;內生型較晚出現(xiàn)該癥狀。

（2）陰道排液多數(shù)患者有陰道排液，液體為白色或血性可稀薄如水樣或米泔狀，或有腥臭。晚期患者因癌組織壞死伴感染。可有大量米湯樣或膿性亞臭白帶。

（3）晚期癥狀根據(jù)癌灶累及范圍出現(xiàn)不同的繼發(fā)性癥狀。如尿頻、尿急、便秘、下肢腫痛等：癌腫樂迫或累及輸尿管時，可引起輸尿管梗阻、腎盂積水及尿毒癥;晚期可有貧血、惡病質等全身衰竭癥狀。

三、宮頸癌篩查現(xiàn)狀：

宮頸上皮的癌變過程包括許多基因和表觀基因的攻變，DNA甲基化是最常見的表觀遺傳學改變，常發(fā)生于腫瘤抑制基因的啟動子區(qū)域，造成該基因的轉錄失活，從而促使腫瘤的發(fā)生。本研究旨在探討宮頸癌基因甲基化檢測、高危型HPV檢測對宮頸癌篩查的分流作用，甲基化選取的是PAX1.

宮頸癌篩查的手段包括：應用了幾十年的細胞學，這是傳統(tǒng)的篩查手段，但是它存在敏感性不足。另外，HPV是宮頸癌、宮頸病變的最重要的原因之一，因此，檢查HPV是目前篩查宮頸癌重要的手段，但是HPV檢查特異性差，特別是一過性HPV感染，對宮頸病變的發(fā)生影響有限。

常規(guī)檢查的弊端：

（1）TCT：漏診率過高，檢出率降低，宮頸腺癌TCT檢測呈假陰 性。

（2）HPV：靈敏度高，感染非常普遍，40%的女性在一生當中的某個時期都可能感染過HPV病毒，但隨著自身免疫力增強，病毒可以自行消除，發(fā)現(xiàn)陽性不一定有問題，增加患者心理負擔。

（3）活檢：造成創(chuàng)傷，本身感染HPV患者再活檢，增加感染風險。

宮頸脫落細胞PAX1基因甲基化檢測優(yōu)勢：

（1）增加檢出率，減少漏診率。

（2）減少檢查頻率，降低感染風險。

（3）無創(chuàng)傷，精準結果，降低誤診率。

（4）宮頸病變治療的

常規(guī)檢查像腫瘤的診斷和治療即將進入或者逐漸進入分子診斷和分子治療的時代，而宮頸病變的篩查也需要跟隨新技術——生物技術的發(fā)展篩選新的分子標志物。

四、宮頸癌與DNA的甲基化

基因的甲基化可以調控基因的活性。根據(jù)國內外的研究，幾乎所有癌癥都與基因甲基化異常有關，也就是說DNA甲基化是癌癥的必經(jīng)之路。因此研究宮頸病變的發(fā)生發(fā)展就應該重視DNA甲基化的應用。

宮頸癌發(fā)生的機制與甲基化診斷性能，通過臨床應用發(fā)現(xiàn)，HPV感染到正常的宮頸上皮細胞可以引起DNA甲基化繼而引起宮頸的病變甚至發(fā)展為宮頸癌，那么這是有高度的相關性。

在宮頸病變發(fā)展的進程中，宮頸上皮細胞從正常到異常的增生、到癌前病變、到宮頸癌的發(fā)生，需要數(shù)年甚至數(shù)十年發(fā)展的過程，在這個過程中，研究發(fā)現(xiàn)對于低級別宮頸癌前病變短期內進展為癌的風險比較低，如果是宮頸高級別癌前病變，短期內進展為宮頸癌的風險就比較高，發(fā)現(xiàn)在這個風險高低的過程中，伴隨DNA甲基化是密切高度相關，其中有個關鍵基因是PAX1基因。①

五、PAX1基因甲基化檢測的現(xiàn)狀

2019年至今，我院共檢測病例為89例，年齡在28-55歲之間。其中，宮頸癌術后8例、CIN病變6例、常規(guī)檢查75例。對照的方法是組織病理學金標準。PAX1基因甲基化檢測是基于亞洲人群開發(fā)的產(chǎn)品，是根據(jù)以中國人為研究對象的臨床數(shù)據(jù)的研究結果。 甲基化目前來說解決臨床問題如下：

（1）HPV感染造成的恐慌問題。HPV陽性患者可以做一個甲基化檢測，如果是甲基化非常低（△Cp值大），那告訴病人你不用緊張，你可以延長你的篩查周期;如果甲基化比較高（△Cp值小），我們會采取更積極點的處理方式。

（2）宮頸腺癌發(fā)病率確實比以前高了，也可能和我們檢出手段有關系，那甲基化更利于宮頸腺癌的檢出，減少它的漏診;

（3）三型轉化區(qū)婦女;

（4）臨床上可能更多的用于年輕女性未生育的女性CIN2治療的分流。如果報告CIN2，病變也比較局限，我們做一個甲基化的檢測，如果甲基化△Cp值比較高，這部分病人會選擇進行更保守一點的處理，而不是去做LEEP或錐切。

六、小結

PAX1基因甲基化檢測解決臨床問題：HPV持續(xù)感染恐慌問題、宮頸腺癌漏診、三型轉化區(qū)漏診、年輕未生育女性CIN2治療分流、宮頸癌治療過程檢測困擾、手術/隨訪。

PAX1甲基化檢測能更廣泛地應用于宮頸癌臨床篩查，更加精準地對高危型HPV感染的患者進行管理，一方面避免不必要的恐慌，另一方面也加強對真正有風險的患者的診治，有非常重要的臨床價值。甲基化基因檢測能夠對年輕、未生育的女性CIN2治療進行分流，解決HPV持續(xù)感染的恐慌問題，減少宮頸腺癌的漏診等。

①王建六教授 《PAX1甲基化在宮頸癌篩查中的應用》

②崔寶霞教授 《PAX1在宮頸癌篩查中的應用》