羅朝軍,陳 頂,姜應(yīng)杰,趙梓鈞,陳鵬超,謝 杰,盧 玲,張雪芹,梁順線
(1.貴州煙葉復(fù)烤有限責(zé)任公司貴陽(yáng)復(fù)烤廠,貴州貴陽(yáng) 550005;2.中國(guó)煙草貴州進(jìn)出口有限責(zé)任公司,貴州貴陽(yáng) 550003;3.貴州輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院/貴州山地特色水果及其制品工程研究中心,貴州貴陽(yáng) 550025;4.中華人民共和國(guó)貴陽(yáng)海關(guān),貴州貴陽(yáng) 550032)
煙草甲,拉丁名Lasioderma serricorne(F.),英文名Cigarette beetle,屬于竊蠹科Anobiidae 下的鞘翅目Coleoptera。作為世界倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)之一,煙草甲不僅會(huì)對(duì)煙草造成影響,還會(huì)影響國(guó)家的貿(mào)易形象,造成難以估量的損失[1-3]。
煙草作為我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物,在儲(chǔ)藏期間極易受到煙草甲危害而造成品質(zhì)下降,所以需要對(duì)其進(jìn)行防治,但目前對(duì)其的防治方式主要是物理防治[4-6]、生物防治[7-9]和化學(xué)防治[10-12]。即使現(xiàn)在在開(kāi)發(fā)昆蟲(chóng)激素[13-15]等類似對(duì)環(huán)境友好的防治方法目前化學(xué)防治的優(yōu)勢(shì)是簡(jiǎn)便快捷、使用較廣的防治方法,仍是國(guó)內(nèi)外煙草倉(cāng)庫(kù)控制煙草甲時(shí)倉(cāng)庫(kù)清潔的主要輔助手段,如磷化鋁[16-18]、氮?dú)鈁19-21]、氧氣[22]、二氧化碳[23-25]、硫酰氟[26]等化學(xué)氣體熏蒸劑,烯蟲(chóng)酯[27]、高效氯氟氰菊酯[22]、溴氰菊酯[22]等化學(xué)農(nóng)藥都是極佳的化學(xué)防治方式。
氟氯氰菊酯Cyfluthrin[29]、敵敵畏Dichlorvos[30-31]和阿維菌素Abamectin[29]等都是對(duì)煙草甲具有高效滅殺效果的農(nóng)藥,但目前已被國(guó)際煙草科學(xué)研究合作中心的第27 號(hào)指南煙葉生產(chǎn)中高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥的鑒別與消除(Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco,CORESTA Guide N° 27,Identification and Elimination of Highly Hazardous Pesticides (HHPs) in Leaf Tobacco Production)列入高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥名單[32]。為避免我國(guó)出口煙葉被監(jiān)測(cè)到高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥有效成分而被拒收,應(yīng)在煙葉生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)杜絕使用相關(guān)農(nóng)藥,且目前還尚未有研究對(duì)非高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥進(jìn)行經(jīng)濟(jì)分析,在煙草甲的綜合防控中無(wú)對(duì)應(yīng)參考資料。部分地區(qū)的煙草甲已經(jīng)對(duì)磷化鋁產(chǎn)生了抗性。為了避免因煙草甲產(chǎn)生抗性而導(dǎo)致防治效率不高,所以本文以不在高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥名單里面的優(yōu)效農(nóng)藥來(lái)測(cè)定其對(duì)煙草甲試驗(yàn)種群(統(tǒng)一試驗(yàn)種群,減少可變因素)的毒力,并進(jìn)行相對(duì)經(jīng)濟(jì)效益分析,以此為倉(cāng)庫(kù)煙草甲的綜合防治提供參考依據(jù)。
煙草甲在貴州煙葉復(fù)烤有限責(zé)任公司貴陽(yáng)復(fù)烤廠采集,在貴州輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院生態(tài)食品農(nóng)產(chǎn)品工程研究中心昆蟲(chóng)試驗(yàn)室飼養(yǎng)純化10代以上,用自配飼料(玉米、煙沫、啤酒酵母重量比為9∶5∶5,以電子天平稱量,配置好后在電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)70 ℃滅菌30 min)在溫度33 ℃,相對(duì)濕度(75±5)%,光周期10 D∶14 L的條件下飼養(yǎng)。
試驗(yàn)煙葉:云煙85,由貴州煙葉復(fù)烤有限責(zé)任公司貴陽(yáng)復(fù)烤廠提供。用于試驗(yàn)開(kāi)始后供煙草甲取食,避免因無(wú)食物造成煙草甲死亡。
人工智能氣候箱(LAC-450HPY-2、由上海龍躍有限公司提供)、1 000 mL 分體一次性餐盒(布丁盒,用于觸殺試驗(yàn)盛放煙草甲,使用時(shí)需在蓋上戳小孔以保證空氣流通,由安徽穎泉區(qū)樂(lè)淘酒店用品經(jīng)營(yíng)部提供)、電熱鼓風(fēng)干燥箱(101-1AB 型,天津市泰斯特儀器有限公司)、電子天平(JY3002,測(cè)量范圍0.2~300 g,上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司)。
保安定(30%甲基嘧啶磷,英國(guó)先正達(dá)有限公司);凱安保(15%溴氰菊酯,法國(guó)拜耳有限責(zé)任公司);清源保(1.5%除蟲(chóng)菊素,內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司);康寬(13%氯蟲(chóng)苯甲酰胺,河南省鄭州沙隆達(dá)偉新農(nóng)藥有限公司);凱恩(10%茚蟲(chóng)威,美國(guó)富美實(shí)公司);田秀才苯氧威(3%氨基甲酸乙酯,山東省青島泰生生物科技有限公司)。
參照中華人名共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 1154.1—2006(農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則,殺蟲(chóng)劑,第1 部分:觸殺活性試驗(yàn),點(diǎn)滴法),來(lái)進(jìn)行煙草甲的初步毒力測(cè)定。
1.4.1 初步毒力測(cè)定
依據(jù)類似文獻(xiàn)和農(nóng)藥效力設(shè)定大范圍的初濃度3個(gè)(用純水做稀釋),每個(gè)濃度3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭煙草甲。若效果不佳,擴(kuò)大濃度梯度繼續(xù)試驗(yàn)。以此來(lái)確定正式試驗(yàn)的5個(gè)農(nóng)藥梯度。
成蟲(chóng)死亡觀測(cè)方法:用毛刷輕刷成蟲(chóng)身體,觀察1 min,若靜止不動(dòng),則視為死亡,以下類同。
1.4.2 毒力測(cè)定
依據(jù)初步毒力測(cè)定結(jié)果,設(shè)定5 個(gè)濃度梯度,每個(gè)梯度5 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20 頭煙草甲成蟲(chóng),以純水點(diǎn)滴為空白對(duì)照,對(duì)照組重復(fù)及數(shù)量和實(shí)驗(yàn)組相同。每頭煙草甲成蟲(chóng)背板中央點(diǎn)滴1 μL稀釋好的試劑。在第2 天、第4天和第6天觀察并記錄煙草甲成蟲(chóng)死亡數(shù)量。
在Microsoft Excel 2016 進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì),隨后進(jìn)行計(jì)算并分析:
死亡率=死亡蟲(chóng)數(shù)/試驗(yàn)蟲(chóng)數(shù);
矯正死亡率=(對(duì)照組存活率—處理組存活率)/對(duì)照組存活率);
半數(shù)致死量:LC50由SPSS的Probit模擬而得。
相對(duì)毒力分?jǐn)?shù):按第6 天LC50排序,從低到高各自得分6、5、4、3、2、1;
相對(duì)經(jīng)濟(jì)分?jǐn)?shù):按第6 天LC99(Probit 模擬中無(wú)LC100)每667 m2用水50 kg 的防治價(jià)格從低到高各自得分6、5、4、3、2、1,(注:價(jià)格為2021年11月淘寶購(gòu)入價(jià)格,渠道不同價(jià)格會(huì)有所差異);
相對(duì)推薦分?jǐn)?shù)=相對(duì)毒力分?jǐn)?shù)+相對(duì)經(jīng)濟(jì)分?jǐn)?shù)
通過(guò)6 種藥劑對(duì)煙草甲的毒力測(cè)定試驗(yàn),在SPSS的Probit 中模擬了毒力曲線,并獲得了LC50和LC99。相對(duì)毒力大小(使用有效成分從少至多)排列順序?yàn)椋杭谆奏ち住被姿嵋阴ァ迩杈挣ァ⒊x(chóng)菊素、茚蟲(chóng)威和氯蟲(chóng)苯甲酰胺,在第6 天的具體數(shù)值分別 是2.432 mg·L-1、6.519 mg·L-1、109.221 mg·L-1、128.308 mg·L-1、156.306 mg·L-1、564.767 mg·L-1。保安定因效果較好,在Probit 模擬時(shí)并無(wú)LC50的情況,而是LC55,但這對(duì)其所得相對(duì)毒力分?jǐn)?shù)并無(wú)影響。在第2 天、第4天和第6天的毒力曲線及各自的LC50、LC99差異較大,詳見(jiàn)表1。

表1 煙草甲成蟲(chóng)6種優(yōu)效農(nóng)藥毒力回歸方程及LC50(LC50單位:mg·L-1)
在得到6種藥劑對(duì)煙草甲的毒力回歸方程、LC50和LC99后,和原價(jià)及有效成分結(jié)合推算出每667 m2防治價(jià)格(每667 m2用50 kg 水),并獲得相應(yīng)的價(jià)格分?jǐn)?shù)(由低到高):30%甲基嘧啶磷、1.5%除蟲(chóng)菊素、3%氨基甲酸乙酯、10%茚蟲(chóng)威、15%溴氰菊酯和13%氯蟲(chóng)苯甲酰胺,具體價(jià)格以此是2.61 元、29.79 元、36.20 元、75.91 元、247.09 元、298.91 元。并 以 此 得到相對(duì)推薦分?jǐn)?shù)排序(由高到低):30%甲基嘧啶磷、3%氨基甲酸乙酯、1.5%除蟲(chóng)菊素、15%溴氰菊酯、10%茚蟲(chóng)威和13%氯蟲(chóng)苯甲酰胺,各自的分?jǐn)?shù)為:12 分、9分、8分、6分、5分、2分。詳見(jiàn)表2。

表2 煙草甲成蟲(chóng)6種優(yōu)效農(nóng)藥相對(duì)推薦分?jǐn)?shù)表
本研究測(cè)定了煙草甲6 種優(yōu)效防治農(nóng)藥的毒力曲線,并模擬初LC50和LC99,相對(duì)毒力大小由高至低:甲基嘧啶磷、氨基甲酸乙酯、溴氰菊酯、除蟲(chóng)菊素、茚蟲(chóng)威和氯蟲(chóng)苯甲酰胺。并結(jié)合購(gòu)價(jià)和有效成分含量推算出每667 m2防治價(jià)格,并以此排出相對(duì)經(jīng)濟(jì)分?jǐn)?shù)由低至高:30%甲基嘧啶磷、1.5%除蟲(chóng)菊素、3%氨基甲酸乙酯、10%茚蟲(chóng)威、15%溴氰菊酯和13%氯蟲(chóng)苯甲酰胺,以及農(nóng)藥的相對(duì)推薦分?jǐn)?shù)由高至低:30%甲基嘧啶磷、3%氨基甲酸乙酯、1.5%除蟲(chóng)菊素、15%溴氰菊酯、10%茚蟲(chóng)威和13%氯蟲(chóng)苯甲酰胺。
研究中部分農(nóng)藥的有效成分在一些研究中已經(jīng)作了探索,但又有所差異,如薛寶燕等所作甲基嘧啶磷的毒力曲線及LC50不同[30],但他們的飼養(yǎng)條件及飼養(yǎng)飼料與本研究的不同。有研究表明,不同的食物[33-36]和溫濕度[37-38]會(huì)影響煙草甲的生長(zhǎng)發(fā)育,乃至不同的氧氣濃度都會(huì)影響煙草甲的活性[22,39],而從本研究和這些研究者的研究來(lái)看,不同的飼料或溫度會(huì)影響煙草甲對(duì)藥劑的敏感性,而這也會(huì)對(duì)不同地區(qū)的防控造成影響。并且,不同的光周期對(duì)昆蟲(chóng)的行為影響是巨大的[40],但對(duì)不同光周期對(duì)煙草甲的影響尚未研究。