降糖藥物DPP-4i抑制鼻咽癌細胞侵襲的機制研究

徐歡

摘要： 目的 研究降糖藥物二肽基肽酶4抑制劑（DPP-4i）抑制鼻咽癌細胞侵襲的機制。方法 選擇不同分化鼻咽癌細胞株，予以DPP-4i處理，檢查腫瘤細胞的運動情況，選擇Transwell/Transwell+基質膠實驗，觀察細胞侵襲的能力。結果 CNE-2細胞株上，DPP-4i可顯著抑制DPP-4酶的活性。DPP-4i對鼻咽癌細胞的增殖影響并無統計差異（P>0.05）。DPP-4i可抑制鼻咽癌細胞CNE-2的侵襲。結論 DPP-4i能夠抑制鼻咽癌細胞侵襲現象，為臨床治療提供指導意義，并為靶向治療提供新靶點。

關鍵詞：鼻咽癌;二肽基肽酶4抑制劑;細胞侵襲;降糖藥物

【中圖分類號】? R766.3【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）14--01

數據顯示[1]，預計至2030年全球患糖尿病的人數達到3.5億人左右，并成為致死性疾病的第七位。另外有研究發現[2]，糖尿病患者成為各類腫瘤發生的危險因素，同時成為腫瘤患者死亡的主要原因。對此，臨床建議糖尿病患者均應接受腫瘤標志物篩查，且針對糖尿病合并腫瘤或者具備腫瘤風險患者應慎重選擇降糖藥物。而鼻咽癌作為耳鼻喉科最為多見的惡性腫瘤，一旦合并糖尿病后，不僅增加患者痛苦，同時提升臨床治療的困難程度。針對此，臨床應盡早選擇合適的降糖藥物，在控制血糖的基礎上，抑制鼻咽癌細胞侵襲，從而為后續治療提供新思路[3]。本文展開試驗，結果如下：

1 資料與方法

1.1 實驗材料

選擇人低分化非角化性鼻咽癌細胞株（HONE-1、CNE-2）、人高分化角化性鱗狀鼻咽癌細胞株（CNE-1）、攜帶EB病毒基因的人類低分化鼻咽癌細胞株（C666-1）。

1.2 方法

細胞培養：將分化程度不同的人NPC細胞株（HONE-1、CNE-2、CNE-1、C666-1），利用包含10%的小牛血清RPMI-1640培養基，37攝氏度，5%CO2培養。

DPP-4i處理：當DPP-4i劑量≤1000nM后，對鼻咽癌細胞的增殖并無影響。對數生長期細胞使用胰蛋白酶消化制備成單細胞懸液，計數的同時逐級稀釋，接種在6cm直徑的培養皿上。同時在標準狀態下，持續培養12h，直至細胞貼壁，分別采取500nM、1000nM濃度DPP-4i處理。選擇Transwell/Transwell+基質膠實驗，觀察細胞侵襲的能力。

1.3 觀察指標

分析DPP-4i對鼻咽癌細胞株二肽基肽酶IV（DPP-4）酶的影響，并觀察DPP-4i對鼻咽癌細胞株增殖的影響，最后探討DPP-4i對鼻咽癌細胞株侵襲的影響。

1.4 統計學處理

全文數據選擇SPSS 20.0系統計算，x±s為計量數據，選擇t檢驗;百分比為計數數據，選擇χ2檢驗，P<0.05為數據存在統計學差異。

2 結果

2.1 DPP-4i對鼻咽癌細胞株DPP-4酶的影響

鼻咽癌細胞株CNE-2通過1μM Saxagliptin（Sax）、0.6μM Saxagliptin（Sit）處理72h，利用熒光檢測試劑盒測定腫瘤細胞的DPP-4酶活性，結果顯示：CNE-2細胞株上DPP-4i可顯著抑制DPP-4酶的活性，其余三種鼻咽癌細胞株上（HONE-1、CNE-1、C666-1）DPP-4i對DPP-4酶的活性均無明顯影響。見表1。

2.2 分析DPP-4i對鼻咽癌細胞株CNE-2增殖的影響

對鼻咽癌細胞株CNE-2進行50nM、100nM、500nM、1000nM的DPP-4i處理0h、24h、48h、72h、96h，選擇MTT法測定細胞相對數與活力，發現DPP-4i對鼻咽癌細胞的增殖影響并無統計差異（P>0.05）。見表2。

2.3 DPP-4i對鼻咽癌細胞株CNE-2侵襲的影響

對于對數生長的鼻咽癌細胞CNE-2以0.1μM Sax以及0.6μM Sit處理，24h后經Transwell/Transwell+基質膠實驗檢查細胞侵襲能力，結果顯示DPP-4i可抑制鼻咽癌細胞CNE-2侵襲。見表3。

3 討論

當糖尿病與腫瘤共存后，兩者可相互作用，進一步加重病情，導致患者預后較差。曾有報道顯示[4]，糖尿病與腫瘤存在密切關系，兩種疾病存在較多共同的風險因素，例如表觀遺傳變化、高胰島素血癥、肥胖等，另外糖尿病在腫瘤發生發展上具有重要意義，可顯著提升腫瘤出現的幾率。

鼻咽癌屬于臨床較常見的惡性腫瘤，隨著精確放射治療技術的進步發展，加上放化療綜合治療模式的推廣使用，使得我國鼻咽癌患者的生存率獲得明顯改善，但研究發現腫瘤的遷移、侵襲成為疾病治療失敗的主要因素[5]。對此，盡早了解鼻咽癌的分子機制，尋找促進鼻咽癌細胞侵襲的相關因素，以此提升治療鼻咽癌的療效。研究指出[8]，糖尿病作為鼻咽癌上風險因素之一，與鼻咽癌患者的預后存在一定關聯。目前，臨床已發現降糖藥物可對腫瘤的生物學行為造成潛在影響，例如二甲雙胍能夠控制乳腺癌以及子宮內膜癌，不僅能夠控制血糖，同時有助于腫瘤的防治。近些年，臨床發現該藥在臨床應用上存在一定局限性，還需作進一步的探究[9]。上述結果中：四類細胞株上，僅CNE-2細胞株上DPP-4i可抑制DPP-4酶的活性，其余三種鼻咽癌細胞株上（HONE-1、CNE-1、C666-1）DPP-4i對DPP-4酶的活性均無明顯影響。DPP-4i對鼻咽癌細胞的增殖影響并無統計差異。DPP-4i可抑制鼻咽癌細胞侵襲，證實DPP-4i在抑制鼻咽癌細胞CNE-2侵襲上效果更好，可為患者后續治療提供新思路。其中DPP-4i能夠抑制DPP-4活性，并預防胰高血糖素產生，同時增強胰島B細胞數量，對胰腺功能發揮保護作用，并引起降糖效應，成為新型降糖藥物。除此之外，DPP-4作為跨膜糖蛋白，可廣泛分布在多種細胞上，同時可在生命期間上發揮重要的調節功效，并促進腫瘤細胞侵襲。由此可見，DPP-4i可抑制鼻咽癌細胞侵襲，值得推廣。

綜上所述，DPP-4i能夠抑制鼻咽癌細胞侵襲現象，為臨床治療提供指導意義，并為靶向治療提供新靶點，進一步增強臨床效果。

參考文獻：

[1]周洋，石秀錦，彭文星，等.2014–2018年我國七城市DPP-4抑制劑使用現狀調查[J].中國藥物應用與監測，2019，16（6）：369-372，382.

[2]馬慧梅，公丕云，董建軍.二肽基肽酶4抑制劑對2型糖尿病患者心血管疾病的影響[J].中國糖尿病雜志，2020，28（3）：237-240.

[3]錢丹，譚湘萍，梅崢嶸，等.2型糖尿病患者在磺酰脲類藥物治療基礎上加用DPP4抑制劑的療效和安全性Meta分析[J].重慶醫學，2019，48（16）：2814-2821.

[4]馮德翔，楊瀟，呂建成，等.二肽基肽酶-4基因表達促進膀胱癌進展并抑制順鉑化療敏感性[J].中華實驗外科雜志，2021，38（10）：1967-1970.

[5]武僅，張瑩，吳文迅.Graves病合并2型糖尿病患者二肽基肽酶-4水平的變化及使用抑制劑治療的效果[J].中國實用醫刊，2019，46（18）：12-15.

項目：廣西壯族自治區衛生和計劃生育委員會自籌經費科研課題（合同號：Z20170207）

課題名稱：降糖藥物DPP-4i 促進鼻咽癌細胞遷移/侵襲的機制研究