VEGF和CD34在原發(fā)性肝癌TACE術(shù)后的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系

曹志群,燕騰飛,張明光

(亳州市中醫(yī)院 腫瘤科,安徽 亳州236800)

原發(fā)性肝癌屬于臨床上發(fā)生率較高的惡性腫瘤疾病類型，且對(duì)于放療以及化療等治療方式缺乏一定的敏感性。當(dāng)前臨床上大多使用手術(shù)切除方式對(duì)患者實(shí)施治療，其中對(duì)預(yù)后產(chǎn)生影響患的關(guān)鍵性因素為術(shù)后再次復(fù)發(fā)[1]。經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞屬于臨床上治療肝癌疾病較為理想的一種方式，但是仍舊難以徹底替代手術(shù)治療。相關(guān)研究顯示，腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移以及生長(zhǎng)同血管的發(fā)生存在比較密切的聯(lián)系，而肝癌屬于臨床上具有較高典型性的富血管腫瘤類型，其術(shù)后復(fù)發(fā)率以及血行轉(zhuǎn)移率均相對(duì)較高[2]。同時(shí)患者機(jī)體內(nèi)的新生血管會(huì)在一定程度上影響到肝癌細(xì)胞的生物學(xué)行為，且對(duì)患者機(jī)體內(nèi)腫瘤微血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確標(biāo)記，并將微血管密度(MVD)有效計(jì)算出來(lái)，從而能對(duì)腫瘤血管的發(fā)生做一定的間接定量[3]。因而，及時(shí)對(duì)肝癌的血管發(fā)生進(jìn)行科學(xué)精確的反映，有利于對(duì)患者預(yù)后情況做合理評(píng)估，從而盡快為患者提供切實(shí)可行的治療方案，促進(jìn)患者病情以及預(yù)后改善[4]。本研究探討VEGF和CD34在原發(fā)性肝癌TACE術(shù)后的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月-2020年3月經(jīng)TACE術(shù)切除后的肝細(xì)胞癌組織標(biāo)本150例作為研究組，并選擇同期未經(jīng)任何干預(yù)直接接受手術(shù)切除治療的肝細(xì)胞癌組織標(biāo)本150例作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者及其家屬均知情且同意；②患者病情均符合原發(fā)性肝癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者肝癌部位已經(jīng)出現(xiàn)一定程度的破裂；②患者本身伴隨有長(zhǎng)期酗酒等不良飲酒史者。其中對(duì)照組150例，男78例，女72例，年齡43-72歲，平均年齡(56.6±1.2)歲。研究組150例，男80例，女70例，年齡42-73歲，平均年齡(56.5±1.3)歲。且一般資料具有可比性(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1檢測(cè)方式 ?主要試劑：產(chǎn)自于北京中杉金橋生物公司的抗鼠抗兔二抗、CD34單克隆抗體以及VEGF單克隆抗體工作液等。?切片準(zhǔn)備：將每一個(gè)肝癌組織蠟塊標(biāo)本均切成4 μm左右的厚度，且共需要3張切片。?免疫組化染色：應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行常規(guī)性的脫蠟水化等處理，同時(shí)通過(guò)微波修復(fù)方式對(duì)組織抗炎做有效的修復(fù)處理，并將一抗溶入到10%的山羊血清封閉液內(nèi)，同時(shí)將其放置于室溫條件下進(jìn)行60 min左右的孵育處理，之后對(duì)其進(jìn)行有效沖洗并將二抗緩緩滴入，再次將其放置于室溫條件下進(jìn)行10 min左右的孵育處理，然后進(jìn)而二次清洗，并把鏈霉菌抗生物素-過(guò)氧化物酶溶液緩緩滴入進(jìn)去，將其放置于室溫條件下進(jìn)行10 min左右的孵育處理，并做好相關(guān)清洗，同時(shí)使用DAB進(jìn)行有效染色處理，并選用蘇木精做二次染色，之后對(duì)其進(jìn)行密封以及加固處理。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1觀察分析兩組VEGF以及MVD測(cè)值。

1.3.2觀察分析VEGF和CD34與預(yù)后的關(guān)系。

1.3.3觀察分析TACE治療次數(shù)對(duì)VEGF陽(yáng)性表達(dá)水平以及MVD值的影響。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 VEGF以及MVD測(cè)值對(duì)比

與對(duì)照組比，研究組VEGF蛋白陽(yáng)性率相對(duì)較高(P<0.05)，且MVD值也明顯較高(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 VEGF以及MVD測(cè)值

2.2 VEGF和CD34與預(yù)后的關(guān)系對(duì)比

經(jīng)相關(guān)性分析表明，癌旁組織VEGFR以及CD34 的陽(yáng)性表達(dá)同TACE術(shù)后病情早期復(fù)發(fā)具有一定的相關(guān)性(P<0.05)，且癌旁組織VEGFR同CD34 的表達(dá)水平也存在明顯的相關(guān)性(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 VEGF和CD34與預(yù)后的關(guān)系(n，%)

2.3 TACE治療次數(shù)對(duì)VEGF陽(yáng)性表達(dá)水平以及MVD值的影響對(duì)比

不同治療次數(shù)患者的VEGF 表達(dá)水平以及MVD值之間比較不存在顯著差異(P>0.05)，且研究組殘癌組織蛋白陽(yáng)性表達(dá)同MVD值之間呈現(xiàn)出明顯正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 TACE治療次數(shù)對(duì)VEGF陽(yáng)性表達(dá)水平以及MVD值的影響

3 討論

原發(fā)性肝癌屬于臨床上比較多見(jiàn)的惡性腫瘤疾病類型，且大多在機(jī)體干細(xì)胞內(nèi)或者是肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞處多發(fā)[5]。其主要臨床特征為肝區(qū)持續(xù)性疼痛、惡心嘔吐以及食欲不振等，而大多數(shù)患者在疾病早期的臨床癥狀并不具備典型性，患者經(jīng)臨床確診之后其病情往往已經(jīng)發(fā)展到晚期，極易對(duì)患者的生命健康造成嚴(yán)重威脅[6]。當(dāng)前臨床上多通過(guò)手術(shù)以及肝移植等方式對(duì)患者實(shí)施治療，但是手術(shù)結(jié)束之后的5年時(shí)間內(nèi)極易出現(xiàn)再次復(fù)發(fā)以及轉(zhuǎn)移等不良事件，從而使患者生活質(zhì)量進(jìn)一步降低。肝細(xì)胞癌因自身極易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移以及浸潤(rùn)生長(zhǎng)等狀況，所以導(dǎo)致其具有較強(qiáng)的惡性程度[7]。相關(guān)研究表明，腫瘤新生血管的出現(xiàn)同腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移以及浸潤(rùn)生長(zhǎng)之間具有一定的關(guān)聯(lián)性。

近幾年來(lái)，關(guān)于腫瘤血管形成等方面的研究顯示，實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)、惡變以及轉(zhuǎn)移等均同血管形成具有一定的聯(lián)系，而血管生成能夠在一定程度上對(duì)惡性腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及預(yù)后情況等進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷[8]。一般情況下腫瘤細(xì)胞分泌以及產(chǎn)生的血管生成因子能有效調(diào)節(jié)腫瘤新生血管的形成，而且當(dāng)前臨床上已經(jīng)明確了多種血管生成因子[9]。VEGF屬于臨床上比較多見(jiàn)的具有較高選擇性的促內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原之一，它能在一定程度上促進(jìn)血管通透力增加，進(jìn)而使內(nèi)皮細(xì)胞的增殖速度進(jìn)一步加快，并會(huì)極大影響到腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)生長(zhǎng)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。CD34主要在人體內(nèi)皮細(xì)胞以及造血干細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，屬于臨床上比較多見(jiàn)的Ⅰ型跨膜蛋白類型之一[10]。由于肝血竇在超微結(jié)構(gòu)內(nèi)且同其它部位的微血管具有一定的差異性，而其它器官內(nèi)部的多個(gè)微小血管內(nèi)皮能夠進(jìn)行有效的CD34表達(dá)，且CD34表達(dá)為陽(yáng)性時(shí)僅僅只局限在機(jī)體匯管區(qū)。如果肝癌細(xì)胞產(chǎn)生會(huì)伴隨有明顯的新生血管形成，并進(jìn)一步生成腫瘤性毛細(xì)管網(wǎng)，這時(shí)CD34水平會(huì)呈現(xiàn)出明顯的高表達(dá)[11]。當(dāng)前臨床上主要應(yīng)用CD34來(lái)準(zhǔn)確標(biāo)記血管內(nèi)皮，屬于一類比較關(guān)鍵的觀測(cè)患者血管形成狀況的指標(biāo)。血管生成的程度能夠?qū)颊吣[瘤誘導(dǎo)血管生成的能力進(jìn)行科學(xué)反映，進(jìn)而對(duì)腫瘤存在的某些生物學(xué)行為做準(zhǔn)確顯示[12]。而還未完全成熟的新生血管只有對(duì)其在惡性腫瘤血管中的所占比例進(jìn)行詳細(xì)了解，才能進(jìn)一步對(duì)腫瘤的侵蝕性以及活性進(jìn)行準(zhǔn)確反映，進(jìn)而對(duì)預(yù)后情況做科學(xué)的判斷。研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比，研究組VEGF蛋白陽(yáng)性率相對(duì)較高(P<0.05)，且MVD值也明顯較高(P<0.05)，這說(shuō)明原發(fā)性肝癌TACE術(shù)后患者VEGF蛋白陽(yáng)性率以及MVD值均相對(duì)較高。分析原因?yàn)椋夯颊呓邮躎ACE術(shù)治療之后，能夠?qū)δ[瘤組織處的動(dòng)脈血供進(jìn)行有效阻斷，進(jìn)而加快了新生血管形成的速度，因而這兩者的表達(dá)水平會(huì)明顯升高[13]。

TACE術(shù)能使血管生成速度進(jìn)一步加快，而術(shù)后腫瘤組織處的MVD值明顯要比未接受TACE術(shù)治療的患者高，其中缺氧能夠在一定程度上誘導(dǎo)生成腫瘤新生血管[14]。TACE術(shù)能對(duì)肝癌病灶處的正常供血?jiǎng)用}進(jìn)行有效阻斷，從而使殘癌組織處的缺氧程度進(jìn)一步加劇，而殘癌組織始終處于一種長(zhǎng)時(shí)間低氧的狀況之下，這時(shí)它會(huì)利用多種機(jī)制對(duì)血管生成因子的正常表達(dá)進(jìn)行有效的調(diào)促。經(jīng)相關(guān)性分析表明，癌旁組織VEGFR以及CD34 的陽(yáng)性表達(dá)同TACE術(shù)后病情早期復(fù)發(fā)具有一定的相關(guān)性(P<0.05)，且癌旁組織VEGFR同CD34 的表達(dá)水平也存在明顯的相關(guān)性(P<0.05)，這說(shuō)明CD34呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)的患者，其接受治療后病情極易再次出現(xiàn)復(fù)發(fā)，且預(yù)后的效果也難以滿足預(yù)期示，進(jìn)而使生存率明顯降低。

本次研究發(fā)現(xiàn)，不同治療次數(shù)患者的VEGF 表達(dá)水平以及MVD值之間比較不存在顯著差異(P>0.05)，且研究組殘癌組織蛋白陽(yáng)性表達(dá)同MVD值之間呈現(xiàn)出明顯正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，這說(shuō)明TACE術(shù)能在一定程度上加快腫瘤微血管的形成，但是新血管的產(chǎn)生并不會(huì)因治療次數(shù)的逐漸增多而呈現(xiàn)出明顯的升高趨勢(shì)。一般情況下肝癌組織中VEGF的表達(dá)水平以及MVD值變化情況均同TACE術(shù)有密切的聯(lián)系，但是同TACE術(shù)實(shí)施的次數(shù)并不存在顯著的關(guān)聯(lián)性。這可能是因?yàn)門ACE術(shù)結(jié)束后會(huì)進(jìn)一步阻斷肝癌組織動(dòng)脈血供，這時(shí)會(huì)出現(xiàn)明顯的缺氧以及缺血等狀況，而在這種狀態(tài)下會(huì)加快新生血管形成的速度，并同門靜脈之間組成相對(duì)穩(wěn)定的側(cè)支血供，因而進(jìn)行多次TACE術(shù)并不會(huì)進(jìn)一步加劇腫瘤處缺氧以及缺血等狀況，而且會(huì)因腫瘤附近新生血管的產(chǎn)生而使腫瘤發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的幾率也進(jìn)一步提升[15]。