2種石房蛤毒素完全抗原交聯(lián)方法的比較及多克隆抗體的制備

陳 睿， 高燁宏， 趙學(xué)楠， 楊敏儀， 吳惠娟， 王榮智， 汪世華

生物農(nóng)藥與化學(xué)生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建省病原真菌與真菌毒素重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002

石房蛤毒素(saxitoxin， STX)是一種毒素極強(qiáng)的胍胺類神經(jīng)毒素，為麻痹性貝類毒素(paratic shellfish position)的主要成分之一，該毒素主要來(lái)源于海水或淡水中的膝溝藻、海洋甲藻、淡水藍(lán)藻等有害浮游生物，通過(guò)食物鏈積累于蛤類、貝類以及蟹類等水產(chǎn)中，哺乳動(dòng)物食用了這些被污染后的水產(chǎn)后，會(huì)引發(fā)呼吸麻痹、死亡等一系列中毒反應(yīng)(李淑冰等，2000)。STX對(duì)小鼠的半致死劑量LD50為10 μg·kg-1(陳常英等，1994)。STX在世界分布廣泛，在我國(guó)的山東、福建、廣東等地均發(fā)生過(guò)人類誤食STX污染的水產(chǎn)品后引發(fā)的中毒事件(孔凡洲等，2007)。因此,漁業(yè)生產(chǎn)中亟需一種簡(jiǎn)便、快速、靈敏的STX檢測(cè)方法。

目前，國(guó)際上用于檢測(cè)貝類毒素的方法主要為理化分析法和生物測(cè)定法。理化分析法包括高效液相色譜法(high performance liquid chromatography， HPLC)、液相色譜(liquid chromatograph-mass spectrometer， LC-MS)、分光光度法、免疫化學(xué)法。其中，較常用的HPLC能精確測(cè)定毒素的種類和含量，但樣品前處理較繁瑣且需要昂貴的儀器(馬燕玲，2013)。生物測(cè)定法包括小鼠生物測(cè)定法(mouse bioassay， MBA)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linked immunosorbnent assay， ELISA)、家蠅生物分析法(house-fly biassay)、蝗蟲生物分析法(locust bioassay， LBA)、神經(jīng)細(xì)胞生物分析法(neurional bioassay)等。其中,MBA是國(guó)際上較通用的方法，該方法方便、快捷且成本低廉，但測(cè)定結(jié)果受小鼠個(gè)體的影響較大，誤差大、重現(xiàn)性差，不能分析樣品中的具體組分；ELISA簡(jiǎn)便、快速、靈敏、成本低，同MBA及HPLC相比，更快速經(jīng)濟(jì)，以滿足大批量樣品快速篩查的需要(Zhietal.，2018)。……