湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預新型冠狀病毒肺炎的網絡藥理學研究

姚昆鵬　劉起立　張道平　劉佑暉　蔡虎志　陳新宇

〔摘要〕 目的 采用網絡藥理學及分子對接技術研究湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預新型冠狀病毒肺炎（corona virus disease 2019， COVID-19）的藥物成分、作用靶點及潛在通路。方法 利用TCMSP、BATMAN-TCM數據庫篩選湖南省新冠肺炎新版成人預防方的活性成分及藥物作用靶點，應用GeneCards等平臺檢索COVID-19的疾病靶點，采用Cytoscape 3.8.0軟件構建 “藥物-成分-靶點”網絡圖，運行STRING數據庫進行靶蛋白質相互作用（protein-protein interaction， PPI）分析，使用R語言數據包進行基因本體功能富集（gene ontology， GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomics， KEGG）富集分析，預測其潛在機制，運用AutoDock Vina 1.5.6和 PyMol 2.4.0軟件對湖南省新冠肺炎新版成人預防方中的關鍵活性成分與PPI中的核心蛋白進行分子對接驗證。結果 經過篩選，得到湖南省新冠肺炎新版成人預防方的有效成分198種，涉及靶標175個，“藥物-成分-靶點”圖中篩選出94個交集基因。PPI網絡顯示，湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預COVID-19主要涉及PTSG2、HSP90AA1、ESR1等核心蛋白，共有靶標的GO及KEGG富集分析結果主要涉及炎癥-免疫調節、胞內信號轉導、細胞凋亡、基因調控等多種生物學途徑以及IL-17、TNF、HIF-1、AGE-RAGE等相關通路。分子對接驗證提示槲皮素與核心靶蛋白MAPK3結合情況最佳，MAPK3為與關鍵化學成分結合活性最優的靶蛋白。結論 湖南省新冠肺炎新版成人預防方中主要化學成分可能作用于MAPK3、MAPK1、TP53、AP-1、p38等多種核心靶蛋白，激活/抑制IL-17、TNF等信號通路，介導炎癥-免疫調節等生物學過程，從而發揮干預COVID-19的作用。

〔關鍵詞〕 COVID-19;湖南省;新冠肺炎新版成人預防方;網絡藥理學;分子對接;核心靶蛋白;信號通路

〔中圖分類號〕R289? ? ? ?〔文獻標志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2022.05.016

Network pharmacology study on the intervention of the new version of adult

prevention prescription in Hunan Province on COVID-19

YAO Kunpeng LIU Qili ZHANG Daoping LIU Youhui CAI Huzhi CHEN Xinyu

（1. Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China;

2. The First Affiliated Hospital of

Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410007， China）

〔Abstract〕 Objective To study the drug components， targets and potential pathways of the new version of adult prevention prescription in Hunan Province on COVID-19 based on network pharmacology and molecular docking technology. Methods The TCMSP and BATMAN-TCM databases were used to screen the active components and drug targets of the new version of adult preventive prescriptions in Hunan Province on COVID-19. The disease targets of COVID-19 were searched by GeneCards and other platforms. The Cytoscape 3.8.0 software was used to construct the "drug-component-target" network diagram. The STRING database was used for protein-protein interaction （PPI） analysis. The R language packet was used for gene ontology （GO） and Kyoto encyclopedia of genes and genomics （KEGG） enrichment analysis to predict its potential mechanism. AutoDockVina 1.5.6 and PyMol 2.4.0 software were used to verify the molecular docking between the key active components in the new version of adult preventive prescriptions in Hunan Province on COVID-19 and the core proteins in PPI. Results After screening， a total of 198 active ingredients， involving 175 targets， of the new version of adult preventive prescriptions in Hunan Province on COVID-19 were obtained. In the "drug-component-target" diagram， 94 intersection genes were screened. The PPI network of the new version of adult preventive prescriptions in Hunan Province on COVID-19 was mainly involved in PTSG2， HSP90AA1， ESR1 and other core proteins. GO and KEGG enrichment analysis results of common targets were mainly involved in inflammatory-immune regulation， intracellular signal transduction， apoptosis， gene regulation and other biological pathways， as well as IL-17， TNF， HIF-1， AGE-RAGE and other related pathways. Molecular docking showed that quercetin had the best binding activity with the core target protein MAPK3， and MAPK3 was the target protein with the best binding activity of the key chemical components. Conclusion The main chemical components in the new version of adult prevention prescription in Hunan Province on COVID-19 may act on a variety of core target proteins such as MAPK3， MAPK1， TP53， AP-1 and p38， activate/inhibit signaling pathways such as IL-17 and TNF， mediate biological processes such as inflammation and immune regulation， thus playing a role in the intervention of COVID-19.78AA3A73-5F25-4904-BEF0-C2A8ADCD54D3

〔Keywords〕 COVID-19; Hunan Province; the new version of adult prevention prescription on COVID-19; network pharmacology; molecular docking; core target protein; signaling pathway

自2019年12月以來，全球已有237個國家及地區受到新型冠狀病毒肺炎（corona virus disease 2019， COVID-19）疫情的影響。截至2021年5月31日，全球共累計有170 104 245例確診患者，累計死亡人數達3 657 083人[1]。由于新型冠狀病毒（severe

acute respiratory syndrome coronavirus 2， SARS-CoV-2）的高度傳染性及高度變異性，疫情雖經短暫控制，但在全球尚未完全建立大規模群體免疫的情況下，印度變種病毒德爾塔又蔓延至中國及全球若干國家[2-3]。盡管國內措施相對完善，但仍未能避免COVID-19變種病毒的侵襲，目前的防疫形勢依然嚴峻。

COVID-19歸屬于中醫學“疫病”范疇[4]。中醫藥傳承至今，積累了許多防治疫病的經驗，中醫藥的使用貫穿抗擊疫情的全過程。根據COVID-19的臨床表現，將其分為輕型（包括寒濕郁肺證、濕熱蘊肺證）、普通型（包括濕毒郁肺證、寒濕阻肺證）、重型（包括疫毒閉肺證、氣營兩燔證）、危重型（包括內閉外脫證）、恢復期（包括肺脾氣虛證、氣陰兩虛證）[5]。“三藥三方”（即連花清瘟膠囊、金花清感顆粒、血必凈注射液、清肺排毒湯、宣肺敗毒方、化濕敗毒方）等中藥的使用在抗擊疫情方面發揮了重要作用[6-8]。

由于德爾塔變種病毒的侵襲，使得國內防疫形勢再度嚴峻。根據時令節氣，結合本次德爾塔變種病毒的特點，從“三因制宜”抗擊COVID-19角度出發，湖南省中醫藥管理局制訂了《湖南省新冠肺炎疫情防控中醫藥診療方案（2021年第二版）》，對臨床治療方案及預防方案作了若干調整，根據本輪疫情起于夏季，暑熱之氣盛行，擬定了湖南省新冠肺炎新版成人預防方。目前，對于湖南省新冠肺炎新版成人預防方的研究處在起始階段，尚待進一步研究。基于此，本文運用網絡藥理學方法，以《湖南省新冠肺炎疫情防控中醫藥診療方案（2021年第二版）》中發布的新冠肺炎新版成人預防方為切入點，從分子層面研究新版成人預防方干預COVID-19的潛在機制，為后續研究提供一定借鑒。

1 材料與方法

1.1? 有效成分及作用靶點獲取

湖南省新冠肺炎新版成人預防方系湖南省中醫藥管理局于2021年7月31日發布的《湖南省新冠肺炎疫情防控中醫藥診療方案（2021年第二版）》中所發布的新版預防方，由8味中藥組成：黃芪、防風、金銀花、藿香、薄荷、連翹、滑石、甘草。將湖南省新冠肺炎新版成人預防方的中藥單體分別錄入中藥系統藥理學數據庫與分析平臺（traditional chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform， TCMSP），設定篩選條件以獲取有效成分：口服生物利用度（oral bioavailability， OB）≥30%，類藥性（drug-likeness， DL）≥0.18;使用中藥分子機制生物信息學分析數據庫（bioinformatics analysis tool for molecular mechanism of traditional chinese medicine， BATMAN-TCM），設定預測候選目標（包括已知目標）得分不小于每個成分得分分界的20%，Adjust P-value設為0.05，獲取候選目標的藥物成分和相應靶點。將有效成分導入TCMSP數據庫獲取有效成分的作用靶點，將上述靶點導入UniProt數據庫（https：//www.uniprot.org/），獲取靶點對應的基因名。

1.2? 疾病靶點檢索

為獲得疾病對應的靶點信息，使用“COVID-19” “2019-nCoV”“Novel coronavirus pneumonia”作為關鍵詞，檢索GeneCards（https：//www.genecards.org/）、OMIM（https：//omim.org/）、PharmGkb（https：//www.pharmgkb.org/）、TTD（http：//db.idrblab.net/ttd/）和DrugBank（https：//go.drugbank.com/）數據庫，獲得COVID-19的疾病相關靶點。

1.3? 藥物-成分-靶點圖構建

將湖南省新冠肺炎新版成人預防方中藥單體對應的靶點與COVID-19的疾病靶點取交集，獲取藥物-疾病交集基因，繪制韋恩圖。將交集基因匯總，導入Cytoscape 3.8.0軟件，運用內置Network Analyzer功能，構建“藥物-成分-靶點”網絡圖。

1.4? 靶蛋白質相互作用（protein-protein interaction， PPI）網絡及拓撲分析

將交集靶基因導入STRING數據庫（https：//string-db.org/），物種設定為“Homo sapiens”，最低互動得分（combined score）設置為0.9，并去除游離節點，得到PPI網絡。將PPI網絡導入Cytoscape 3.8.0軟件進行可視化。利用CytoNCA插件，進一步根據PPI網絡中心度進行拓撲分析，獲得核心靶點。

1.5? GO/KEGG富集分析

利用R語言DOSE、clusterProfiler、enrichplot、pathview等相關程序包對交集基因進行基因本體功能富集（gene ontology， GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomics， KEGG）富集分析，選擇顯著富集的生物學過程（biolog-ical process， BP）、細胞成分（cell component， CC）、分子功能（molecular function， MF）前10項繪制柱狀圖，選擇顯著富集的前30條通路繪制氣泡圖。78AA3A73-5F25-4904-BEF0-C2A8ADCD54D3

1.6? 分子對接驗證

選擇“藥物-成分-靶點”圖中度值排名前3的活性化合物作為小分子配體：槲皮素（quercetin）、木犀草素（luteolin）、漢黃芩素（wogonin），與PPI拓撲分析后獲取的13個關鍵靶點的前3個靶點蛋白，即MAPK3、MAPK1、TP53進行分子對接。于PubChem CID平臺（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）下載活性成分的2D結構的SDF文件，在蛋白質結構數據庫（protein data bank， PDB）下載核心基因相關蛋白的2D結構，使用PyMOL 2.4.0軟件去除靶蛋白中的配體和非蛋白分子（如水分子），保存為pdb格式文件。使用AutoDock Tools 1.5.6軟件對晶體結構進行加氫處理，并計算蛋白質電荷，所有配體和受體文件均保存為pdb格式。使用AutoDock Vina 1.1.2軟件進行分子對接，計算最低結合能，使用PyMol 2.4.0軟件進行可視化。

2 結果

2.1? 有效成分及作用靶點獲取

共檢索到藥物成分共198種：于TCMSP平臺檢索到黃芪20種、防風18種、金銀花23種、藿香11種、薄荷10種、連翹23種、甘草92種;根據BATMAN-TCM數據庫檢索滑石化合物1種。獲取有效成分對應的靶點信息，利用UniProt數據庫對有其進行標準化轉換，選擇“Reviewed”“Human”下載標準靶點名。匹配后刪除重復值，最終獲得靶點175個。

2.2? 疾病靶點檢索

通過檢索GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD和DrugBank數據庫，分別得到COVID-19疾病靶點為1660、229、15、91、28個，篩選并去重后得到靶點1474個。藥物與疾病的交集靶點為94個（見圖1）。

2.3? 藥物-成分-靶點圖構建

運用Cytoscape 3.8.0軟件內置的Network Analyzer功能，將交集靶點導入，構建“藥物-成分-靶點”網絡圖（見圖2）。共有238個節點，1230條邊。據圖可知，甘草、防風的成分對應的相關靶基因最多，有效成分槲皮素、木犀草素、漢黃芩素分別與67、31、25個靶點相關。其中，PTSG2（132個）是有效成分對應靶點數量最多的基因，HSP90AA1（96個）和ESR1（95個）次之。

2.4? PPI網絡及拓撲分析

通過STRING平臺上傳94個共同靶點，物種先定位“Homo sapiens”最低互動得分設置為0.9，并去除游離節點，得到PPI網絡。將數據導入Cytoscape

3.8.0進行可視化（見圖3）。PPI網絡中涉及節點89個、邊397條，靶基因用節點表示，靶基因間的相互作用關系用邊表示。利用Cytoscape 3.8.0插件CytoNCA行拓撲分析，選擇指標：介度中心性（betweenness centrality， BC）、接近中心性（closenesscentrality， CC）、借助度中心性（degree centrality， DC）、特征向量中心性（eigenvector centrality， EC）、局部邊連通性（localaverage

connectivity， LAC）和網絡中心性（network centrality， NC），對基因相關指標進行篩選，選擇大于所有指標中位數的基因進行后續分析。兩次篩選標準如下：第1次，BC 28.00、CC 0.23、DC 7.00、EC 0.06、LAC 2.67、NC 3.83;第2次：BC 9.78、CC 0.60、DC 10.5、EC 0.15、LAC 6.44、NC 7.40。經過兩次篩選，最終獲得核心基因13個，依據DC排序，核心基因分別是MAPK3、MAPK1、TP53、STAT3、JUN、MAPK14、MAPK8、AKT1、RELA、ESR1、IL2、NR3C1、EGFR（見圖4）。

2.5? GO及KEGG富集分析

對湖南省新冠肺炎新版成人預防方的94個潛在靶點進行富集分析。借助R語言DOSE、clusterProfiler、enrichplot、pathview、ggplot2等程序，獲得GO富集條目2304個，其中BP、CC、MF分別為2109、56、139個。各取BP、CC、MF排名前10的GO條目繪制柱狀圖，取KEGG前30的條目繪制氣泡圖（見圖5）。結合文獻，發現GO富集中炎癥-免疫調節、胞內信號轉導、細胞凋亡、基因調控等生物過程均在湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預COVID-19中發揮作用。KEGG富集分析表明，通路富集主要在炎癥-免疫相關通路，如IL-17、TNF、HIF-1、VEGF等。此外，其他如糖尿病并發癥AGE-RAGE、皰疹病毒感染、人類巨細胞病毒感染、甲型流感、mTOR等信號通路均參與對COVID-19的干預。上述結果表明，湖南省新冠肺炎新版成人預防方可能通過介導炎癥-免疫反應、調控細胞活性周期等方面發揮干預COVID-19的作用。結合KEGG數據庫對主要通路進行分析，進一步繪制通路圖（見圖6）。如圖所示，AP-1、p38、IL-1、IL-8、COX2、Fos、JUN、NF-κB等靶點參與IL-17、TNF、HIF-1、AGE-RAGE等通路，表明上述靶點、通路是本研究中的關鍵部分。

2.6? 分子對接驗證

使用Autodock Vina軟件進行分子對接。選擇“藥物-成分-靶點”圖中度值排名前3的活性化合物作為小分子配體：槲皮素、木犀草素、漢黃芩素，與拓撲分析得到度值排名前三的靶蛋白進行分子對接：MAPK3、MAPK1、TP53。計算各個蛋白與小分子配體的最低結合能（見表1）。一般而言，結合能越小，受體與配體的親和力越強，空間構象愈穩定。78AA3A73-5F25-4904-BEF0-C2A8ADCD54D3

結果顯示，各化學成分與靶蛋白對接的結合能均小于-7.0 kcal·mol^-1，說明活性成分與靶蛋白結合緊密。與MAPK3親和力最高的為槲皮素，與MAPK1親和力最高的為木犀草素，與TP53親和力最高的為槲皮素。借助PyMol軟件對將分子對接驗證可視化（見圖7）。

3 討論

湖南省新冠肺炎新版成人預防方由黃芪、防風、金銀花、藿香、薄荷、連翹、滑石、甘草8味中藥組成，具有益氣固表、辛涼御邪、清暑祛濕之功效。《素問·熱論》云：“先夏至日者為病溫，后夏至日者為病暑。”歲在辛丑，暑濕流連，暑熱蒸騰[9]。而湖南地區又水系密布，地處潮濕之地，又感暑熱之氣，疫癘之邪多兼夾暑熱而發，故新版成人預防方結合湖南所特有的氣候及地域特點，圍繞“疫病”“暑濕”而組方。方中黃芪、防風取“玉屏風散”之意，奏益氣固表之功。黃芪擅補肺脾之氣，防風擅祛衛表之風，兩藥合用，則衛氣實而風氣去[10]。黃芪的化學成分包括多糖類、黃酮類、皂苷類等，其主要包含黃芪皂苷、芒柄花素、黃芪多糖等物質[11-12]。現代藥理學研究表明，在機體免疫水平低下的情況下，黃芪具有提高機體免疫水平的功效，其提高機體適應性主要通過維持自然殺傷細胞（natural killer cell， NK）和調節性T細胞（Treg）水平，調節Treg/Tδγ平衡來實現[13]。防風主要包含色原酮類、香豆素類、有機酸、多糖類、聚炔類、甾醇類等，目前對于防風的研究主要集中在免疫調節、抗微生物、抗炎、解熱鎮痛等方面[14]。在對過敏性鼻炎大鼠模型進行研究時發現，防風多糖能改善鼻癢、流涕、打噴嚏等過敏性鼻炎癥狀，通過實驗室分析表明，防風多糖可以上調Th向Th1分化，抑制Th2的表達，從而調節Th1/Th2淋巴細胞亞群平衡，減輕嗜酸性粒細胞浸潤，降低相關炎癥因子的表達，從而提高機體免疫應答水平[15]。金銀花、連翹為歷代醫家治療外感風熱常用之品，二者清熱解毒、疏風散熱為佳，而銀花兼解暑熱，連翹又有散結消腫之功，再與辛涼之薄荷合用，方可御暑熱之邪。Zhou等[16]研究發現，金銀花介導miR2911從而抑制SARS-CoV-2的復制，加速感染患者的轉陰;連翹的主要化學成分包括木素類、樹脂醇類、樹脂酸等，具有顯著的抗病毒、抗氧化、抗腫瘤作用[17]。動物實驗證實，連翹可以降低TNF-α、IL-1β、IL-6，從而發揮抗炎、抗氧化的功效[18]。藿香為暑濕季節常用之品，功擅發表解暑、化濕止嘔。滑石性寒味甘，清熱解暑之余，兼有利尿通淋之功，合甘草清熱解毒，三藥合用，有清暑祛濕之效。隨著提取與鑒定手段的愈趨豐富，有研究發現，藿香的成分主要分為揮發性成分（集中在揮發油，包括廣藿香醇、廣藿香酮等）及非揮發性成分（包括田薊苷、大豆腦苷、香草酸等）[19]。體外實驗表明，廣藿香醇對于急性淋巴髓單核白血病、結直腸癌、肺癌、淋巴瘤等疾病的體外細胞株均有廣泛抗細胞凋亡的作用，其作用機制與NF-κB、p-OKM2、Caspase-3的蛋白量改變有關[20]。滑石歸屬于礦物藥的范疇，由于其獨特的分子結構及理化性質，目前僅已知其為含水鎂質硅酸鹽礦物，國內外尚缺乏對其成分的深入研究[21]。目前，對于甘草的研究頗多，已知甘草包括化學成分400余種，主要為黃酮類及三萜類化合物，學者目光主要聚焦在其抗腫瘤、抗炎等方面[22]。結合上述研究結果，湖南省新冠肺炎新版成人預防方的組方圍繞益氣固表、辛涼御邪、清暑祛濕三方面而設，其各中藥單體分別具有調節機體免疫反應、介導炎癥應激的功效。綜合本研究的結果發現，湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預COVID-19的作用發揮主要依賴于介導炎癥-免疫反應、調控細胞活性周期。基于此推測，湖南省新冠肺炎新版成人預防方抗擊SARS-CoV-2極有可能通過減輕“炎癥風暴”，提升機體免疫水平，從而起到大規模加強個體免疫功能的作用。

本研究采用網絡藥理學方法及分子對接技術，從分子層面對湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預COVID-19的潛在機制進行探討。前文已經對湖南省新冠肺炎新版成人預防方的組方特色及現代藥理學內涵進行論述，可以明確的是，從組方特色及中藥單體的現代藥理學研究方面而言，湖南省新冠肺炎新版成人預防方切合本次COVID-19發病的特點，是較為理想的預防方。然而，對于本方尚缺乏細胞、動物、臨床方面的實驗研究。作為中藥復方，作用機制尚不明晰，無法明確其具體作用的通路及靶點。本研究發現，湖南省新冠肺炎新版成人預防方中中藥單體的有效成分槲皮素、木犀草素、漢黃芩素對應最多的靶基因，PTSG2、HSP90AA1、ESR1對應最多的靶點數。經過PPI網絡圖構建及拓撲分析后，共篩選出MAPK3、TP53、STAT3、IL2、EGFR、JUN、AKT1、ESR1、NR3C1等13個核心靶點。GO與KEGG富集分析發現，炎癥-免疫調節、胞內信號轉導、細胞凋亡、基因調控等生物過程以及IL-17、TNF、HIF-1、VEGF、AGE-RAGE、mTOR等信號通路均參與對COVID-19的干預。通過查閱文獻發現，IL-17與MAPK、NF-κB等通路交互，其下游的IL-6、IL-3、IL-1β、IFN-γ、COX2、TNF-α等與炎癥刺激、免疫反應、細胞凋亡密切相關[23]。近年來，隨著免疫學研究的深入發現，IL-17促進基質細胞分泌集落刺激因子和前列腺素E2等的表達，促進中性粒細胞增殖、成熟與趨化，并調節T細胞的組織浸潤，IL-17通路的激活與免疫反應密切相關[24]。隨著TNF通路的激活，其下游的TNF-α、IL-5、IL-6、IL-10等靶點也受到不同程度的影響，在COVID-19患者中，上述炎癥因子表達增高，其預后愈差[25]。在COVID-19的發病中，“炎癥風暴”是一個重要特點，機體在遭遇病原體侵襲后，免疫細胞因子與免疫細胞之間的反饋機制受到破壞，體液中產生大量的免疫細胞因子，導致持續而強烈的炎癥反應，從而加劇組織器官的損傷[26]。高通量測序表明，IL-1、IL-6、IL-10、IL-19、MCP-2、MCP-3、CXCL9等炎癥指標在COVID-19患者血清均有不同程度的上升[27]。對持續感染的COVID-19患者進行血清檢測，發現其NK細胞、CD14單核減少，而調節T細胞增加，炎癥因子如IL-2、TNF、LT-α含量下降，表明在COVID-19的持續感染下，機體的免疫功能受到抑制，存在持續的病毒脫落[28]。通過運用中藥復方“清肺排毒湯”對COVID-19患者進行干預后，發現重癥患者血清中高表達的CXCR4、ICAM1、CXCL8、CXCL10、IL6、IL2、CCL2、IL1B、IL4、IFNG等基因表達受到抑制，進一步利用計算機進行KEGG富集發現，TNF、IL-17、NF-κB、HIF-1、JAK-STAT、Th17細胞分化、Toll樣受體此7條通路受到不同程度的激活/抑制[29]。此外，干預AGE-RAGE等信號通路也可能起間接干預COVID-19的作用。目前，已知AGE-RAGE信號通路的激活與糖尿病的發生密不可分，其原因可能是高血糖所致非酶性糖基化反應明顯加速AGE的生成，而前者的蓄積導致RAGE表達增加，加劇機體的氧化應激反應，加速細胞生物學進程，導致異常的細胞增殖與凋亡[30]。國外一項對于SARS-CoV-2的轉錄組分析表明，COVID-19的感染伴隨著COX-2、IL-6、CXCL1等蛋白表達的升高，且與AGE-RAGE通路的激活呈正相關[31]。課題組綜合本研究“藥物-成分-靶點”分析、PPI網絡構建、GO/KEGG富集分析及分子對接，結合查閱文獻，初步提出假設：湖南省新冠肺炎新版成人預防方干預COVID-19可能與激活/抑制IL-17、TNF、HIF-1、AGE-RAGE等通路，調節下游AP-1、p38、IL-1、IL-8、COX2、Fos、JUN、NF-κB等靶點相關。78AA3A73-5F25-4904-BEF0-C2A8ADCD54D3

綜上所述，本研究結果顯示，新版成人預防方從組方角度及物質基礎上都具有針對性，對于夏季時令爆發的德爾塔變種病毒應具有較好的預防作用，從理論上為《湖南省新冠肺炎疫情防控中醫藥診療方案（2021年第二版）》中推薦的新版成人預防方的合理性提供了一定依據。然而，由于當前人類對COVID-19的認識有限，且受數據庫收錄、更新狀態限制，對藥物與疾病信息的收集尚不全面，未來尚需進一步完善數據分析并開展體內外實驗進行驗證。

參考文獻

[1] 張榮娜，武潔雯，楊昕娉，等.2021年5月全球新型冠狀病毒肺炎疫情風險評估[J].疾病監測，2021，36（6）：521-525.

[2] 杜? 之，黃? 鵬.SARS-CoV-2的結構特點及其與SARS-CoV差異的概述[J].南昌大學學報（醫學版），2020，60（3）：1-5，8.

[3] RIAD A， SCH?NEMANN H， ATTIA S， et al. COVID-19 vaccines safety tracking （CoVaST）： Protocol of a multi-center prospective cohort study for active surveillance of COVID-19 vaccines' side effects[J]. International Journal of Environmental Research and Public Health， 2021， 18（15）： 7859.

[4] 仝小林，李修洋，趙林華，等.從“寒濕疫”角度探討新型冠狀病毒肺炎的中醫藥防治策略[J].中醫雜志，2020，61（6）：465-470，553.

[5] 中華人民共和國國家衛生健康委員會辦公廳，國家中醫藥管理局辦公室.新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第八版）[J].中國醫藥，2020，15（10）：1494-1499.

[6] SHI N N， LIU B， LIANG N， et al. Association between early treatment with Qingfei Paidu Decoction and favorable clinical outcomes in patients with COVID-19： A retrospective multicenter cohort study[J]. Pharmacological Research， 2020， 161： 105290.

[7] LIU M， GAO Y， YUAN Y， et al. Efficacy and safety of integrated traditional Chinese and western medicine for corona virus disease 2019 （COVID-19）： A systematic review and meta-analysis[J]. Pharmacological Research， 2020， 158： 104896.

[8] GUO H， ZHENG J Y， HUANG G， et al. Xuebijing injection in the treatment of COVID-19： A retrospective case-control study[J]. Annals of Palliative Medicine， 2020， 9（5）： 3235-3248.

[9] 魏自太，李? 卉，吳利強，等.基于氣象數據的六淫中暑的本質及溫與暑的區別分析[J].中華中醫藥雜志，2015，30（12）：4502-4504.

[10] 張? 勝，賈? 波.黃芪、防風配伍探析[J].中醫藥信息，2004，21（2）： 31-32.

[11] 陳? 萌，李愛平，李? 科，等.防己黃芪湯及其組方化學成分與分析方法研究進展[J].中草藥，2018，49（7）：1695-1702.

[12] 姜? 輝，顧勝龍，張玉婷，等.黃芪化學成分和藥理作用研究進展[J].安徽中醫藥大學學報，2020，39（5）：93-96.

[13] LATOUR E， ARLET J， LATOUR E E， et al. Standardized Astragalus extract for attenuation of the immunosuppression induced by strenuous physical exercise： Randomized controlled trial[J]. Journal of the International Society of Sports Nutrition， 2021， 18（1）： 57.

[14] 劉雙利，姜程曦，趙? 巖，等.防風化學成分及其藥理作用研究進展[J].中草藥，2017，48（10）：2146-2152.

[15] 耿玉梅，張振巍，石? 磊.防風多糖對過敏性鼻炎大鼠免疫因子的影響[J].中國藥師，2017，20（7）：1188-1191.

[16] ZHOU L K， ZHOU Z， JIANG X M， et al. Absorbed plant MIR2911 in honeysuckle decoction inhibits SARS-CoV-2 replication and accelerates the negative conversion of infected patients[J]. Cell Discovery， 2020， 6（1）： 54.78AA3A73-5F25-4904-BEF0-C2A8ADCD54D3

[17] 齊麗娜，陳炫好，金? 華，等.中藥連翹化學成分及藥理活性研究進展[J].天津中醫藥大學學報，2021，40（2）：168-175.

[18] LONG S F， HE T F， WU D， et al. Forsythia suspensa extract enhances performance via the improvement of nutrient digestibility， antioxidant status， anti-inflammatory function， and gut morphology in broilers[J]. Poultry Science， 2020， 99（9）： 4217-4226.

[19] 吳卓娜，吳衛剛，張? 彤，等.不同產地廣藿香化學成分及藥理作用研究進展[J].世界科學技術-中醫藥現代化，2019，21（6）：1227-1231.

[20] 楊雨婷，何貝軒，何育霖，等.廣藿香醇通過PKM2和NF-κB誘導MV4-11細胞凋亡相關機制[J].中國實驗方劑學雜志，2016，22（6）： 99-103.

[21] 朱? 禹，岳仁宋.滑石的歷史沿革、化學成分及其致癌性的研究進展[J].中藥材，2021，44（5）：1276-1281.

[22] 李葆林，麻景梅，田宇柔，等.甘草中新發現化學成分和藥理作用的研究進展[J].中草藥，2021，52（8）：2438-2448.

[23] 施沛青，朱? 書，錢友存.IL-17的信號傳導及功能研究[J].中國細胞生物學學報，2011，33（4）：345-357.

[24] 陳? 立，林文源.IL-17+ γδT細胞在相關疾病中的免疫作用[J].中國免疫學雜志，2018，34（11）：1756-1761.

[25] ZHANG Z C， AI G， CHEN L P， et al. Associations of immunological features with COVID-19 severity： A systematic review and meta-analysis[J]. BMC Infectious Diseases， 2021， 21（1）： 738.

[26] RAMASAMY S， SUBBIAN S. Critical determinants of cytokine storm and type I interferon response in COVID-19 pathogenesis[J]. Clinical Microbiology Reviews， 2021， 34（3）： e00299-e00220.

[27] SIMS J T， KRISHNAN V， CHANG C Y， et al. Characterization of the cytokine storm reflects hyperinflammatory endothelial dysfunction in COVID-19[J]. The Journal of Allergy and Clinical Immunology， 2021， 147（1）： 107-111.

[28] YANG B， FAN J P， HUANG J， et al. Clinical and molecular characteristics of COVID-19 patients with persistent SARS-CoV-2 infection[J]. Nature Communications， 2021， 12（1）： 3501.

[29] LI X H， XIANG L， LIN Y， et al. Computational analysis illustrates the mechanism of qingfei paidu decoction in blocking the transition of COVID-19 patients from mild to severe stage[J]. Current Gene Therapy， 2022， 22（3）： 277-289.

[30] 張? 霞，劉建英.AGEs-RAGE系統與二甲雙胍抗腫瘤作用研究進展[J].中國新藥雜志，2014，23（4）：441-444.

[31] ALSAMMAN A M， ZAYED H. The transcriptomic profiling of SARS-CoV-2 compared to SARS， MERS， EBOV， and H1N1[J]. PLoS One， 2020， 15（12）： e0243270.

（本文編輯? 匡靜之）78AA3A73-5F25-4904-BEF0-C2A8ADCD54D3