蛇足石杉孢子離體繁殖技術(shù)研究

毛曉怡，楊 鑫，劉 銳，建德鋒

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院 吉林，吉林 132101）

蛇足石杉（），又名蛇足石松，為石杉科中的一種多年生草本植物，該植物為陰生蕨類植物，全草均可入藥，入藥具有消腫止痛、止血散瘀、清熱除濕等功效，還可以治跌打損傷、內(nèi)傷吐血、燙火傷等癥。隨著蛇足石杉在藥用方面的需求量日益增大,野生資源又極其匱乏,而人工繁殖起來又很不易，導(dǎo)致市場上蛇足石杉藥材稀缺。為此，加速蛇石足杉苗木的培育非常關(guān)鍵，為給其快速繁殖提供參考依據(jù),該試驗以蛇足石杉的孢子為原材料，研究其離體繁殖技術(shù)。

1 材料和方法

1.1 實驗時間及地點

試驗于2020年6月份開始進行，2021年3月份結(jié)束，試驗于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院北校區(qū)組培實驗室進行。

1.2 材料處理

從野外采挖蛇足石杉植株，帶土栽植入花盆中，放入室內(nèi)進行重點養(yǎng)護。接種前采集母株上的孢子葉，在0.1%的升汞（HgCL）溶液中浸泡3 min，再用無菌水沖洗4-5次，瀝干水分，帶入接種室中，放在超凈臺下分三種方式進行接種，分別為：A1.將1cm大小的孢子葉直接接到培養(yǎng)基上；A2.把孢子囊從孢子葉上分離后接種；A3.將孢子囊分離后，放在小塊濾紙上（2cm大小），壓碎取出孢子，連同濾紙一起接種。

1.3 培養(yǎng)基配方

培養(yǎng)基均以MS作為基本培養(yǎng)基，添加糖30g/L，瓊脂7g/L。具體各個階段的配方見表1。

2 結(jié)果和分析

2.1 孢子體不同接種方式對誘導(dǎo)萌發(fā)的影響

外植體以3種不同放置方式接種到6種培養(yǎng)基上，每瓶接1塊原材料，每種培養(yǎng)基接30瓶，每種方式180瓶，共接540 瓶。接種后統(tǒng)計成活數(shù)量、污染數(shù)量、出現(xiàn)愈傷組織數(shù)量，計算出愈率；……