李雨芮,鄧麗玲,汪波瀚
(武漢動物園野生動物保護研究所,湖北武漢430000)
美 洲 紅 鹮(Eudocimus ruber)屬 于 鸛 形 目(Ciconiiformes)、鹮 科(Threskiorothidae)、鹮 亞 科(Threskiornithinae)、美洲鹮屬(Eudocimus),是一種成鳥喙細長而彎曲、全身羽色鮮紅、營群居生活的中小型鳥類[1-2],性格敏感,容易應激。美洲紅鹮原產自南美洲的沿海地帶,主要以棲息地的小魚、各類軟體動物以及蝦、蟹等甲殼類動物為食[3-4]。2012 年,美洲紅鹮野外種群在世界自然保護聯盟(IUCN)瀕危物種紅色名錄中被評定為低危(LC)等級,在我國被認定為Ⅱ級保護動物。
一般情況下,美洲紅鹮在野外的壽命約15 年,飼養下可達20 年。武漢動物園的美洲紅鹮于2012 年2 月自荷蘭引進,飼養于園內雉雞館,以玻璃幕墻和矮灌木叢與游客隔離,已順利進行數輪自然繁殖,大群狀態良好。目前,國內外尚未有美洲紅鹮確診惡性腫瘤的報道,現將武漢動物園發生并確診的一例美洲紅鹮嗉囊腫瘤病例報告如下,以期豐富相關研究資料。
發病美洲紅鹮,成年,雌性,2014年5月由我園紅鹮自然配對繁殖孵化。該紅鹮飼養于雉雞館的半展示性籠舍,內有假山流水。主要飼料為新鮮泥鰍、小魚、胡蘿卜、番茄和雞蛋混合的肉泥,采用玻璃幕墻和寬約60 cm 的綠化帶與游客隔離。
飼養員反映發病美洲紅鹮脖頸處有一塊不明腫物,約乒乓球大小;患鳥近期采食量、排便情況和運動狀況均無明顯異常,大群無明顯異常。考慮該動物難以捕捉,且容易導致大群應激,獸醫建議保守治療,向飼料中添加中藥制劑穿心蓮散以增強體質、涼血消腫,同時加強觀察。
1 個月后,飼養員發現患鳥無力飛上棲架、行動遲緩;運動時腫脹物明顯下墜并壓迫前胸;強壓運步時,身體前傾,步態踉蹌。眼觀發現,患鳥毛色雜亂無光澤,營養狀況較差、胸肌菲薄,脂肪組織極少;脖頸周邊腫物分為兩塊,周圍皮膚由于腫物鼓脹變薄,觸診發現腫物有包膜,不能移動,局部溫度較高,患鳥外觀見圖1。
獸醫對患鳥進行采血檢查、抽吸腫塊內容物并進行細胞學檢查;建立靜脈通路,注射5%葡萄糖、肌苷、三磷酸腺苷(ATP),給予營養和能量支持,但患鳥仍虛弱死亡。獸醫對其進行解剖,頸部切開后見一巨大腫物,外覆包膜;鈍性剝離至嗉囊下端時,發現該腫物與嗉囊相連,無法剝離;嗉囊萎縮,黏膜層有潰瘍;腫物表面凹凸不平,色灰黃,質地堅硬;其余臟器均未見明顯肉眼可見病變。隨后獸醫將病變組織摘除,放入4%多聚甲醛固定液保存后送檢。
2.2.1 患鳥外周血涂片檢查結果(見圖2)
跖靜脈采血,制備血涂片,瑞氏染色后于光學顯微鏡下觀察。
由圖2可知,患鳥血涂片中以成熟粒細胞為主,偶見幼稚粒細胞;紅細胞大小均一,血小板少見,未見血液寄生蟲。
2.2.2 患鳥腫瘤抽吸液涂片檢查結果(見圖3)
使用注射器將患鳥頸部腫塊中的液體抽出、制備涂片,使用迪夫快速染液染色后于光學顯微鏡下鏡檢。
由圖3可知,腫塊內容液組成成分為大量細胞碎片、裸核及血細胞,無定型成分,不具備診斷意義。
2.2.3 患鳥腫瘤印片細胞學檢查結果(見圖4~圖6)
由圖4可知,腫物位于嗉囊,呈不規則球形,大小約為6 cm×8 cm,包膜不完整;腫物四周存在大量增生血管和結締組織,可鈍性分離;切面淡黃色或淡紅色,伴有出血、壞死、潰瘍;嗉囊明顯萎縮,黏膜層有潰瘍。
將摘下的腫塊制造一新鮮切面,制備組織印片,使用迪夫快速染液染色,并于光學顯微鏡下觀察。
由圖5、6可知,鏡下細胞成團分布,除崩解的細胞碎片外,還有多量體積較小的、被染為深紫色的、幾乎無胞質的細胞以及較多的紅細胞和一種體積較大、形狀無規則、胞質豐富、胞核卵圓形的細胞。組織印片使用瑞氏染液染色,鏡下可見成團分布的分類不明細胞,特點為成團分布、胞體較大、胞質粗糙,核仁顯隱不一、染色質豐富而呈泡沫樣感,推斷該種細胞為上皮樣細胞。
2.2.4 患鳥腫瘤組織病理學檢查結果(見圖7)
將摘下的腫塊取樣并用4%多聚甲醛固定保存后送檢,制備病理切片并進行HE染色后觀察。
由圖7可知,鏡下可見異型增生的鱗狀上皮和腺上皮,呈浸潤性生長,部分間質發生黏液變性,可見軟骨細胞增生、梭形細胞增生。
根據臨床癥狀、剖檢病變以及病理學組織學檢查結果,確診患鳥的頸部腫物為嗉囊惡性腫瘤,最終因營養衰竭死亡。
目前,國內學者針對禽類的腫瘤學研究主要仍集中于可導致禽類腫瘤的馬立克氏病、禽白血病和禽網狀內皮組織增生癥等傳染病方面,研究對象也以家禽和特種經濟動物為主,野生鳥類的相關研究因動物的珍稀性與連續檢測的困難等因素影響而相對受限。
在上述傳染性腫瘤性疾病方面的研究也仍然限于不可辨別至種的野生鳥類糞便流調檢測和易于與野生鳥類直接或間接發生接觸的山雞、家鴿等動物的病原檢測[5-8],且野生鳥類的陽性檢出率均較低。曹霞[9]對內蒙古的兩家野生動物園進行了5年內的動物腫瘤病例收集并計算發病率,結果顯示,兩家野生動物園的腫瘤發病率分別為0.16%和0.47%,且均未發現鳥類腫瘤病例。
Effron等[10]對圣地亞哥動物學會收集的圈養野生動物死亡病例進行調查,結果發現,5 957 只鳥類中有1.89%患有腫瘤,多為淋巴肉瘤。Hawkins 等[11]對446 只鶴的尸檢和組織學報告進行了回顧性研究,結果發現,腫瘤的總患病率為7.35%,其中34.0%為惡性腫瘤,老年鶴最常見(60%),消化道是腫瘤最常發生的部位(27.3%)。Gonzalez等[12]對12例鸚鵡的消化道鱗狀上皮癌進行了報道,結果發現,患病鸚鵡的年齡為15~29歲,口腔、食管、腺胃均為發生部位,常見臨床癥狀主要包括吞咽困難、嗜睡及體重減輕;組織學上,因消化道鱗狀上皮癌具有局部侵襲性,導致腫瘤發生部位常伴隨黏膜潰瘍。
引起動物發生腫瘤的原因較為復雜,目前認為比較重要的包括遺傳因素、物理性致癌因素、化學性致癌因素及某些致癌病毒。除上述因素之外,動物的品種、年齡、性別及營養狀況也與腫瘤的發生具有密切的關系,如多數年齡較大的動物腫瘤發病率較高,部分雌性動物腫瘤總發生率高于雄性動物。
生物性致癌因素在腫瘤的發生中也具有相當重要的作用,如霉菌及寄生蟲;霉菌本身具有一定的致癌和促癌作用,寄生蟲對動物的侵襲也易引發腫瘤。在為數不多的散發野生鳥類腫瘤病例中,鄧長林等[13]關于火烈鳥肝臟腫瘤的病例報道中提到,長期、慢性的器官損傷與病變多與飼料、環境因素有關,尤其容易導致消化系統發生癌變。
結合本次美洲紅鹮的病變情況,患病動物的親族及同群紅鹮均無腫瘤病例發生,患病美洲紅鹮無既往病史,推測環境因素和飼料因素可能占較大影響。該紅鹮所飼養的紅鹮館內有高大植物,采光不足,館舍內陰暗處易滋生病菌,且館舍內水管易堵塞,排水不暢,流水極易蓄積成死水坑,滋生病菌。同時,不排除長期吞咽小魚、泥鰍等或進食方式不當導致嗉囊黏膜損傷、長期慢性刺激下誘發嗉囊上皮細胞最終發生癌變,導致該紅鹮在腫瘤侵襲和長期進食困難下最終衰竭死亡。
由于野生動物的敏感、易受驚、具有攻擊性、機體代償能力較強等特性,動物園內野生動物患腫瘤疾病被發現時往往已經錯過最佳治療時間。因此,對動物園內各種野生動物的醫療行為訓練以及定期體檢在此時顯得尤為重要。理論上,對于動物的腫瘤的治療應首選手術摘除,若對鳥類進行手術治療,術前應盡可能有針對性地評估鳥類的心血管健康情況,并完善的評估麻醉風險,尤其是更敏感、應激反應更大的野生鳥類。Perrin 等[14]在物理保定的情況下,對飼養的44只美洲紅鹮進行了體格檢查、采血檢查和心臟超聲檢查;結果發現,有4只美洲紅鹮存在血清心肌鈣蛋白濃度升高的現象,提示可能存在心肌損傷。
此外,隨著各類新技術問世,近年來中藥成分及其制劑在現代臨床醫學上的應用也越來越廣。穿心蓮作為我國一味傳統中藥材,也有研究表明了其對禽類的免疫功能的具有顯著作用,可對免疫器官(胸腺、脾臟)指標產生良性影響,顯著提高血清溶菌酶活性和血清IL-2含量,且效果均優于同條件下的抗生素效果[15]。研究表明,維生素C作為一種抗氧化劑可有效地預防某些腫瘤的發生[16],微量元素硒水平降低容易引發某些惡性腫瘤。
在本研究中,因受限于美洲紅鹮集群棲息、性格敏感易受驚的特點,當發現大群中某些個體出現病因暫時難明的異常時,相較于強行捕捉、隔離飼養,獸醫選擇向大群集體用中藥制劑對野生動物的刺激較小,利于自限性疾病的恢復。此外,也有相關報道指出,禽類干擾素具有良好的抗腫瘤、免疫調節活性[17],若能夠在野生動物疾病方面投入應用,可有效地改善動物園野生動物普遍存在的抗生素耐藥現象。
本研究中,首先通過對該患病美洲紅鹮的臨床癥狀、剖檢病變進行觀察,初步判斷期頸部腫物為腫瘤的可能性較大;繼而結合病理組織學切片檢查分析,發現患病美洲紅鹮的頸部腫物切片中多為浸潤式生長的異型增生的鱗狀上皮和腺上皮;由此推測可能由于環境多植被且較為陰暗潮濕,而飼料中含有較多的甲殼類食物,容易對動物嗉囊造成機械損傷。多方面因素長期作用下,導致患病美洲紅鹮嗉囊發生惡性腫瘤,最終因營養衰竭死亡。