乳腺癌患者改良根治術后核因子κB表達水平與生存時間及生活質量的關系

袁忠，王科軍，馬海南

(邵陽學院附屬第一醫院乳甲外科，湖南 邵陽 422000)

乳腺癌是發生于乳腺導管上皮組織的惡性腫瘤，約占女性常見惡性腫瘤的23%，近年來發病率、病死率有上升趨勢，對女性生命健康、生活質量構成嚴重威脅[1]。乳腺癌根治術是治療乳腺癌的常見術式，通過手術切除病灶及轉移淋巴結的同時最大限度地保留胸大肌、胸小肌，并在切除乳腺的同時放入假體以保證乳腺外形與手術前基本相同，臨床接受度較高[2-3]。乳腺癌發生機制復雜多樣，有研究發現，乳腺癌的發生進展除與第13號染色體乳腺癌易感基因2、第17號染色體乳腺癌易感基因1突變密切相關外，還與多種轉錄因子密切相關[4]。核因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)作為哺乳動物重要的核轉錄因子，可調控血管生成蛋白的表達，影響細胞增殖分化、凋亡、癌變等進程，與腫瘤發生、轉移等密切相關[5]。有研究發現，通過抑制NF-κB信號通路轉導可阻礙乳腺癌進展，NF-κB有望成為乳腺癌潛在預后生物標志物和基因治療的靶點[6]。本研究主要分析乳腺癌患者改良根治術后NF-κB表達水平與生存時間及生活質量的關系，旨在為改善乳腺癌患者預后提供理論依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2018年3月于邵陽學院附屬第一醫院接受改良根治術治療的82例乳腺癌患者為研究對象，均為女性，年齡38～60歲，平均(48±6)歲；病程9～18個月，平均(14.1±3.5)個月。納入標準：①符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2015版)》[7]中乳腺癌相關診斷標準且經術后病理證實為乳腺癌；②孕激素受體或雌激素受體呈陽性；③術后接受輔助內分泌藥物治療。排除標準：①合并嚴重肝腎功能異常、心腦血管疾病或造血系統疾病者；②合并糖尿病、酒精藥物濫用史或其他惡性腫瘤者；③曾接受過系統放化療、內分泌治療或靶向治療者；④存在認知功能障礙且依從性差者；⑤主動退出研究或失訪者。入組患者均簽署了知情同意書，本研究經邵陽學院附屬第一醫院倫理委員會批準。

1.2觀察指標和檢測方法 收集患者臨床資料，包括年齡、腫塊部位、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、組織學分級、淋巴結轉移情況，分析NF-κB不同表達水平與乳腺癌患者臨床病理特征的關系；記錄乳腺癌組織、癌旁組織NF-κB表達情況；隨訪3年，比較不同NF-κB表達水平的乳腺癌患者累積生存率和生活質量。

1.2.1NF-κB表達水平檢測 改良根治術中取患者乳腺癌組織、相應癌旁組織，將癌組織、癌旁組織分別進行切片，厚度約為5 μm，于恒溫箱烘烤2 h后常規脫蠟至水，然后依次采用蒸餾水、磷酸鹽緩沖液沖洗，再采用檸檬酸緩沖液抗原熱修復10 min，冷卻至室溫后采用3%過氧化氫作用10 min。過氧化氫作用完畢后分別滴加一抗(兔抗人單克隆抗體)，于4 ℃條件下孵育過夜，然后滴加二抗(辣根過氧化物酶)，于室溫下作用20 min后再次使用磷酸鹽緩沖液沖洗，最后滴加二氨基聯苯胺染色、蘇木精復染，依次經75%、95%、無水乙醇脫水，采用中性樹脂封片，于顯微鏡下觀察。一抗(批號：20160106)、二抗(批號：20160119)均購自上海酶連生物科技有限公司，二氨基聯苯胺(批號：20160124)、蘇木精(批號：20160116)、乙醇(批號：20160130)均購自上海楷洋生物技術有限公司。

1.2.2結果判定 按照切片中陽性細胞數所占百分比、癌細胞染色強度評估，切片中無陽性細胞計0分，陽性細胞數≤10%計1分，10%<陽性細胞數≤50%計2分，陽性細胞數>50%計3分；癌細胞未著色計0分，癌細胞呈淺黃色計1分，癌細胞呈棕黃色計2分，癌細胞呈棕褐色計3分[8]。切片中陽性細胞數所占百分比計分與切片中癌細胞染色強度計分相乘>3分判定為NF-κB高表達，≤3分判定為NF-κB低表達。

1.2.3隨訪 通過定期復診記錄乳腺癌患者術后生存情況，采用乳腺癌患者生活質量測定量表(functional assessment of cancer therapy-breast cancer，FACT-B)于每次復診時評估乳腺癌患者術后生活質量，FACT-B從生理狀況、情感狀況、功能狀況、社會/家庭狀況、附加關注情況5個維度評估，共包含36個條目，采用Liken 5級評分法分為5個等級，分別賦值0～4分，量表總得分越高提示患者術后生活質量越好[9]。

2 結 果

2.1乳腺癌組織、癌旁組織NF-κB表達水平比較 乳腺癌組織中NF-κB高表達率高于癌旁組織[60.98%(50/82)比8.54%(7/82)](χ2=49.719，P<0.001)，見圖1。

注：NF-κB為核因子κB

2.2改良根治術后患者NF-κB不同表達水平與癌臨床病理特征的關系 NF-κB高表達組(50例)組織學分級Ⅲ級和淋巴結轉移的比例高于NF-κB低表達組(30例)(P<0.05)，兩組年齡、腫塊部位、腫瘤大小、腫瘤TNM分期比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 乳腺癌改良根治術后NF-κB不同表達水平與患者臨床病理特征的關系

2.3改良根治術后患者NF-κB表達水平與生存時間的關系 隨訪3年，82例乳腺癌患者失訪6例，其中癌組織NF-κB高表達4例、低表達2例。乳腺癌組織NF-κB高表達患者術后累積生存率低于NF-κB低表達患者[60.87%(28/46)比83.33%(25/30)](χ2=4.342，P=0.037)，見圖2。

注：NF-κB為核因子κB

2.4乳腺癌改良根治術后NF-κB表達水平與生活質量的關系 乳腺癌組織NF-κB高表達患者FACT-B評分低于NF-κB低表達患者[(92±5)分比(101±6)分](t=6.945，P<0.001)。

3 討 論

癌癥是影響全球范圍內疾病發病率、死亡率的重要原因，其中乳腺癌是引發女性癌癥死亡的常見惡性腫瘤之一，相關統計數據顯示，我國乳腺癌發病率、死亡率分別約占世界的12.2%、9.6%[10-11]。改良根治術是治療乳腺癌的有效術式之一，Xiang等[12]研究發現，改良根治術對乳腺癌患者圍手術期血清應激激素、炎癥應激指標的影響較小，有助于患者術后恢復。但近年來研究發現，乳腺癌患者術后受到相關治療引起的各種癥狀困擾，精神負擔較重，易增加術后復發、轉移風險，嚴重影響患者生活質量，甚至危及生命安全，改善乳腺癌患者預后是臨床研究的重點[13]。

NF-κB信號通路與乳腺癌發生、疾病進展密切相關，不僅參與血管內皮生長因子、趨化因子受體等下游靶基因調控，還可促進癌細胞有絲分裂活動，是引發乳腺癌細胞轉移的重要因素。Wilson等[14]研究核糖核苷酸還原酶亞基M2、NF-κB、突變體腫瘤蛋白p53的分子靶向治療三陰性乳腺癌發現，體外NF-κB活性降低患者激素治療效果優于NF-κB活性升高患者，且生存率高于NF-κB活性升高患者。也有研究在探討鈣蛋白酶小亞基1與NF-κB在乳腺癌中表達及與乳腺癌患者臨床特征的關系時發現，乳腺癌組織NF-κB高表達率明顯高于癌旁組織[56.12%(55/98)比8.16%(8/98)]，證實NF-κB蛋白在乳腺癌組織中高表達[15]。本研究結果顯示，乳腺癌組織中NF-κB高表達率高于癌旁組織(P<0.01)，與上述文獻觀點相符，表明NF-κB表達與乳腺癌發生有關。NF-κB是轉錄蛋白家族成員之一，乳腺癌實體腫瘤微環境中含有的大量炎癥細胞因子刺激NF-κB向細胞核內轉移，繼而調節下游靶基因轉錄、翻譯等。Aktepe等[16]研究發現，許多致癌因素可通過活化NF-κB信號促進癌細胞生長、增殖分化、遠處轉移，同時可調控部分細胞周期基因而加速細胞周期循環，且NF-κB體外活性越高，癌細胞增殖越活躍。本研究結果顯示，乳腺癌組織NF-κB高表達組組織學分級Ⅲ級和淋巴結轉移的比例高于NF-κB低表達組(P<0.05)，且隨訪3年發現，乳腺癌組織NF-κB高表達患者術后累積生存率低于NF-κB低表達患者，證實NF-κB表達水平與乳腺癌患者改良根治術后生存時間有關。有研究認為，NF-κB表達水平影響乳腺癌患者術后生存時間的機制可能是NF-κB高表達激活機體相關炎癥細胞因子后間接刺激第17號染色體乳腺癌易感基因1突變，繼而改變血管通透性，癌細胞血行轉移率升高，患者術后復發風險增加，從而影響乳腺癌患者術后生存情況[17]；也有研究認為，NF-κB通過與機體多種蛋白相互作用形成的結合物可調控下游靶基因表達，繼而調節癌細胞生長增殖相關通路，使調節信號到達細胞核內，進一步活化后促進癌細胞遷移[18]。臨床可進一步探索NF-κB表達水平與乳腺癌患者發生、疾病進展的關系。

生活質量是臨床評估癌癥患者健康及病情變化的常用指標，可全面反映機體健康狀況，而乳腺癌患者術后常需內分泌藥物治療，軀體、心理、社會功能等方面均受到一定影響，評估乳腺癌患者術后生活質量具有重要臨床意義[19]。大量研究顯示，乳腺癌患者改良根治術后藥物治療過程中易產生焦慮、抑郁等負性情緒，從而引起一系列免疫、神經等系統功能紊亂，患者惡性心理應激狀態風險升高，嚴重影響術后生活質量[20-21]。本研究結果還顯示，乳腺癌組織NF-κB高表達患者FACT-B評分低于NF-κB低表達患者，表明NF-κB高表達患者術后生活質量較差。既往研究發現，術后化療、術后放療、部分核轉錄因子水平等均為影響乳腺癌術后生活質量的因素，而NF-κB作為調控細胞凋亡、惡性轉化過程的重要轉錄因子，在癌細胞中高表達對腫瘤壞死因子介導的凋亡具有抵抗作用，可一定程度上促進癌癥復發，這可能是NF-κB高表達乳腺癌患者改良根治術后生活質量降低的原因[22]。臨床可進一步探索影響乳腺癌患者術后生活質量的危險因素，以改善患者預后。

綜上所述，乳腺癌改良根治術后NF-κB低表達患者累積生存率和生活質量高于NF-κB高表達患者，乳腺癌患者改良根治術后遠期預后與NF-κB表達相關，臨床可進一步探討NF-κB表達水平與乳腺癌進展的關系。但因本研究選取樣本量有限，相關結論仍需大樣本多中心臨床試驗進一步佐證。