一例豬場(chǎng)豬偽狂犬病的凈化處理

文│杜明倉（云南省保山市隆陽區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心） 唐懿 劉國(guó)民 徐佳（金宇保靈生物藥品有限公司）

豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒引起的一種傳染性疾病。會(huì)導(dǎo)致母豬流產(chǎn)，3周內(nèi)的仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，育肥豬伴隨呼吸道癥狀。自2011年以來，從華東地區(qū)到華北地區(qū)免疫Bartha-K61株的豬場(chǎng)逐有g(shù)E轉(zhuǎn)現(xiàn)象，特別是種豬公司損失嚴(yán)重，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，越來越多的規(guī)模豬場(chǎng)選用人工致弱的C株疫苗、SA215株、HB-98、HB-2000株進(jìn)行免疫防控，使豬偽狂犬疫情得到有效控制。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)豬場(chǎng)。該豬場(chǎng)選取基礎(chǔ)母豬500頭，自繁自養(yǎng)，同時(shí)進(jìn)行跟蹤服務(wù)，血清及抗原送檢單位為金宇保靈生物藥品有限公司技術(shù)服務(wù)部中心實(shí)驗(yàn)室。

2.抗體、病原的檢測(cè)方法。抗體主要利用ELISA方法檢測(cè)，抗原主要利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)方法檢測(cè)，試劑盒參考表1。

表1 試劑盒明細(xì)

二、豬偽狂犬案例發(fā)病情況

2016 年6 月，云南某豬場(chǎng)母豬在產(chǎn)房出現(xiàn)16.95%～31.5%死胎和木乃伊胎，產(chǎn)房死淘率為19.4%～42.8%，保育期、育肥期正品率分別為94.4%～95.2%、95.1%～95.6%。2016年9～12月，該場(chǎng)生產(chǎn)數(shù)據(jù)最差，而后整場(chǎng)生產(chǎn)成績(jī)逐漸好轉(zhuǎn)。2018年3月部分豬場(chǎng)生產(chǎn)指標(biāo)見表7。

表2 各階段死、淘豬抗原陽性檢出率 %

1.流行病學(xué)調(diào)查。通過引種跟蹤及流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該場(chǎng)后備豬有傳染性胃腸炎、流行性腹瀉發(fā)病史。該場(chǎng)2016年7月從江蘇某種豬場(chǎng)引進(jìn)125頭種豬后，出現(xiàn)疑似豬偽狂犬病感染。

2.臨床解剖。哺乳仔豬感染后表現(xiàn)震顫、共濟(jì)失調(diào)、角弓反張、發(fā)熱高于41℃，具有神經(jīng)癥狀和壞死性扁桃體炎，肝、脾、腎可見灰白色或黃白色壞死灶。

3.實(shí)驗(yàn)室診斷。選取10頭1～2胎齡的母豬，10頭3～4胎齡的母豬，10頭5～6胎齡的母豬，10頭大于等于7胎齡的母豬，后備豬、公豬全部采樣，對(duì)2、4、7、10、13、16、20、24、30周齡商品豬每組采樣10頭。檢測(cè)gE、gB基因抗體、圓環(huán)抗體、藍(lán)耳抗體、豬瘟抗體、口蹄疫O型A型抗體。對(duì)流產(chǎn)胎兒或臍帶血進(jìn)行病原檢測(cè)（豬瘟、藍(lán)耳、偽狂犬、圓環(huán)、細(xì)小、乙腦）。

◎圖1 不同豬群偽狂犬病、豬瘟、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、圓環(huán)感染比例

通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)產(chǎn)母豬、公豬gE抗體陽性率100%、53.84%，說明全群經(jīng)產(chǎn)母豬已感染偽狂犬病毒。從仔豬臍帶血、死胎、產(chǎn)房仔豬、保育豬、育肥豬群中均能檢出病原。由血清普查結(jié)果可知，口蹄疫、豬瘟、細(xì)小、乙腦均有較理想的免疫狀態(tài)。本豬場(chǎng)未做藍(lán)耳病免疫，S/P平均值均小于1.5，藍(lán)耳抗體陽性率為81.71%，說明各階段豬只出現(xiàn)藍(lán)耳病繼發(fā)性不穩(wěn)定。綜上所述，偽狂犬病仍是導(dǎo)致豬場(chǎng)各區(qū)間不穩(wěn)定，生產(chǎn)指標(biāo)低下的主要因素。

三、豬偽狂犬凈化處理方法

1.商品豬偽狂犬疫苗毒株對(duì)比及篩選。偽狂犬疫苗對(duì)比試驗(yàn)共分3組，具體分組見表3，各組商品豬分別在2、4、7、10、13、16、20、24周齡隨機(jī)選擇20頭檢測(cè)gE、gB抗體，各階段死、淘豬只均用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)PRV。記錄各試驗(yàn)組的分娩時(shí)間、母豬耳號(hào)、初生總仔數(shù)、初生活仔數(shù)、木乃伊胎數(shù)、死胎數(shù)、斷奶數(shù)、保育轉(zhuǎn)出數(shù)、育肥出欄數(shù)。死/淘豬只PRV陽性檢出率。篩選阻斷效果好、各階段成活率/正品率高的疫苗毒株。

表3 各試驗(yàn)組偽狂犬免疫程序

2.種豬凈化方案。具體偽狂犬凈化方案。

四、豬偽狂犬凈化效果與跟蹤

1.偽狂犬疫苗不同毒株免疫效果對(duì)比。商品豬偽狂犬gE、gB結(jié)果見表4。試驗(yàn)組2在16、24周齡的gE抗體陽性率為0，說明gE陽性母豬能產(chǎn)下gE陰性的個(gè)體。2、4周齡的豬群gE陽性抗體主要來源于被動(dòng)免疫，隨著4周齡后的斷奶，gE抗體陽性率降低，gB抗體陽性率保持穩(wěn)定，說明注射疫苗后產(chǎn)生的抗體被檢出。16、24周齡的豬只gE抗體不轉(zhuǎn)陽，說明疫苗抗體能有效阻斷病毒在豬群間的橫向傳染。此結(jié)果讓同場(chǎng)自留后備豬篩選gE陰性后備，進(jìn)行種群更新成為可能。

表4 偽狂犬疫苗對(duì)比試驗(yàn)中g(shù)E、gB抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)比其他兩組，后期gE轉(zhuǎn)陽沒有得到明顯改善。說明免疫對(duì)應(yīng)毒株疫苗，不能阻斷病毒在豬群間的橫向傳播，該批次的其他生產(chǎn)成績(jī)見表5。gE陽性豬只不一定全部致病或致死，但會(huì)不同程度地影響生產(chǎn)成績(jī)。

表5 偽狂犬疫苗對(duì)比實(shí)驗(yàn)各試驗(yàn)組豬生產(chǎn)數(shù)據(jù)

綜上所述，本次偽狂犬疫情豬場(chǎng)應(yīng)選用C株疫苗進(jìn)行后繼處理。

2.種豬凈化方案及執(zhí)行效果。

豬場(chǎng)于2018.9.27、2018.10.25、2019.2.28、2019.6.27、2019.10.24進(jìn)行經(jīng)產(chǎn)母豬群及公豬的全群C株偽狂犬疫苗免疫。分別在2019.4.10普檢血清。結(jié)果見表6，豬偽狂犬抗體普查結(jié)果顯示，商品豬疫苗免疫后母源gE陽性抗體衰減較上次血檢逐步提前，說明gE抗體陽性母豬注射疫苗能降低病毒在體內(nèi)的活躍度，緩解癥狀，母體內(nèi)gE陽性抗體逐步減少。在13周齡后未有g(shù)E陽性豬只，說明能有效阻斷病毒后期感染。在新補(bǔ)充的一胎母豬、二胎母豬及后備豬中，無gE抗體陽性豬只，說明C株疫苗抗體能有效阻斷gE陽性病毒感染，從血檢指標(biāo)看符合預(yù)期。從部分豬場(chǎng)生產(chǎn)數(shù)據(jù)看，豬場(chǎng)分娩率隨疾病的控制能達(dá)到85%以上，死胎、木乃伊胎及不到7千克的弱仔比例明顯降低，產(chǎn)房健仔率均高于92%。

表6 豬偽狂犬抗體普查結(jié)果

表7 豬場(chǎng)部分生產(chǎn)數(shù)據(jù)

五、總結(jié)

1.不斷優(yōu)化豬場(chǎng)設(shè)施，制定合理的規(guī)章制度，強(qiáng)化人員防疫意識(shí)及執(zhí)行力，強(qiáng)化豬場(chǎng)生物安全，是防止外來病毒進(jìn)入豬場(chǎng)最有效的辦法。

2.重視實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行正常豬群的安全監(jiān)測(cè)，及時(shí)確診死/淘豬只，并對(duì)整體豬群疫病進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。精準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果可以給豬場(chǎng)重大事項(xiàng)決策提供科學(xué)依據(jù)。尤其是非洲豬瘟、偽狂犬和藍(lán)耳病的評(píng)估。

3.樹立系統(tǒng)的觀念，同步重視品種、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境及疫病防控。目前，更重要的是建立積極、健康的養(yǎng)殖團(tuán)隊(duì)。管重于防，防重于治。豬場(chǎng)出現(xiàn)最多的是管理問題。

4.快速處理豬場(chǎng)疾病，精準(zhǔn)診斷，合理制定治療方案，持之以恒、不打折扣的執(zhí)行，并及時(shí)追蹤處理效果。