PGRN與中性粒細胞型哮喘患兒病情的相關性分析

翟璐璐，靳秀紅，張向峰，李曉燕，駱彩英

［1.鄭州大學附屬兒童醫院（河南省兒童醫院、鄭州兒童醫院）呼吸科，河南 鄭州 450048；2.柘城中醫院 肝膽脾胃科，河南 柘城476200］

中性粒細胞型哮喘多見于重癥哮喘及難治性哮喘中，且無明顯的嗜酸性粒細胞浸潤［1］。目前，該病的發病機制尚未完全明確，可能與感染、吸煙及長期使用糖皮質激素有關，常表現為氣促、胸悶及咳嗽等，多發于兒童群體［2］。因中性粒細胞型哮喘患兒肺功能下降更為嚴重，急性發作次數較多，且標準治療的療效欠佳［3］，故對患兒的病情發展進行評估十分重要，可為臨床治療提供參考依據。血清顆粒蛋白前體（PGRN）是一種多功能蛋白，可調節正常組織的發育、增殖和防御功能［4］。既往研究［5］顯示，PGRN 參與多種自身免疫疾病及炎癥性疾病的發生發展，但是否可作為新型的反映中性粒細胞型哮喘患兒病情嚴重程度的指標尚不清楚。因此，本研究將探討分析PGRN 與中性粒細胞型哮喘患兒病情的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年5 月至2021 年5 月在鄭州大學附屬兒童醫院確診的中性粒細胞型哮喘患兒94 例，根據患兒病情的嚴重程度［6］分為輕度組37 例、中度組32 例及重度組25 例。輕度組男21 例，女16例，年齡7～13 歲，平均（10.16±1.32）歲；中度組男24 例，女8 例，年齡7～13 歲，平均（10.28±1.18）歲；重度組男12 例，女13 例，年齡7～13 歲，平均（10.09±1.41）歲。三組性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標準：①符合中性粒細胞型哮喘診斷標準［7］；②經鄭州大學附屬兒童醫院倫理委員會通過，患兒監護人了解并知情同意。排除標準：①存在其他類型哮喘；②存在惡性腫瘤；③存在肝腎功能不全；④存在精神疾病者。

1.2 方法

1.2.1 肺功能 所有患兒均于入組當日采用德國康訊肺功能機行肺功能檢測，記錄第1 秒用力呼氣容積（FEV1）、用力肺活量（FVC），并計算FEV1/FVC。

1.2.2 PGRN、腫瘤壞死因子（TNF-α）及白細胞介素-8（IL-8）于入組當日采集所有患兒空腹靜脈血液3 mL 置于無抗凝劑的一次性真空采血管中備用，將標本放置在-40℃的條件下保存，待血液完全凝固后進行離心分離血清（8 cm 離心半徑，3 000 r/min 離心10 min）。取上層清液采用酶聯免疫吸附試驗法（ELISA）檢測PGRN、TNF-α 及IL-8水平。儀器：小型VIPAS 全自動熒光酶標儀，試劑和試劑盒均由武漢菲恩生物科技有限公司提供。檢驗過程嚴格按儀器與試劑說明書進行。

1.3 統計學方法

本研究數據采用SPSS 22.0 統計學軟件進行分析，滿足正態分布且方差齊的計量資料用均數±標準差（）表示，采用單因素方差分析比較組間差異；計數資料用百分率（%）表示，采用χ2檢驗。采用Pearson 相關性分析PGRN 水平與FEV1、FVC 及FEV1/FVC 的關系，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組肺功能水平比較

中度組及重度組FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平低于輕度組，差異有統計學意義（P＜0.05）；相較于中度組，重度組FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平更低，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組肺功能水平比較（）

表1 三組肺功能水平比較（）

注：1）與輕度組比較，P＜0.05；2）與中度組比較，P＜0.05。

2.2 三組PGRN、TNF-α 及IL-8 比較

中度組及重度組PGRN、TNF-α 及IL-8 水平均高于輕度組，差異有統計學意義（P＜0.05）；相較于中度組，重度組PGRN、TNF-α 及IL-8 水平更高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組PGRN、TNF-α 及IL-8 比較（）

表2 三組PGRN、TNF-α 及IL-8 比較（）

注：1）與輕度組比較，P＜0.05；2）與中度組比較，P＜0.05。

2.3 PGRN 水平與FEV1、FVC 及FEV1/FVC 的關系

PGRN 水 平 與FEV1（r=-0.241,P=0.015）、FVC（r=-0.252,P=0.012）及FEV1/FVC（r=-0.225,P=0.025）均呈負相關。

3 討論

支氣管哮喘是以氣道出現慢性炎癥反應為主要特征的慢性氣道疾病，具有病死率高及發病率高等特點。根據誘導痰細胞比例可分為嗜酸粒細胞型、中性粒細胞型、混合粒細胞型及寡粒細胞型4 類，其中中性粒細胞型所占比例最高，是哮喘中最重要的表型，也是導致患者病情控制不佳，激素治療反應差的重要原因之一［8-9］。因此，早期對中性粒細胞型哮喘的病情進行評估并制定有效的干預措施，對控制病情的發展和預后具有積極作用。本研究結果顯示，中度組及重度組的FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平低于輕度組，且相較于中度組，重度組的FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平更低，FEV1、FVC 和FEV1/FVC 是反應患者肺功能水平的重要指標，提示中性粒細胞型哮喘兒病情越嚴重，肺功能水平越差。

本研究結果顯示，中度組及重度組的PGRN、TNF-α 及IL-8 水平均高于輕度組，提示隨著中性粒細胞型哮喘兒病情的加重，PGRN、TNF-α 及IL-8 水平存在異常升高。PGRN 是一種分泌型糖蛋白，在多種組織中廣泛表達，在介導胚胎發育、組織損傷中有重要作用，與慢性炎癥性疾病如類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等疾病的嚴重程度密切相關［10-11］。有研究［12］發現，PGRN 在成年人膿毒癥感染中有較高的表達水平，其水解產物顆粒蛋白（GRN）可作為Toll 樣受體9 的信號通路輔助因子參與疾病進展，這與本研究部分結果相一致。且周利航等［13］研究結果發現，PGRN 可參與炎癥反應，而炎癥反應是中性粒細胞型哮喘發生發展的重要因素［14］，由此推測，PGRN 參與中性粒細胞型哮喘的進程中。PGRN 通過刺激單核巨噬細胞分泌TNF-α，促使炎癥反應加重，進而使IL-8 水平升高，此外，PGRN 促使大量的巨噬細胞聚集在脂肪組織中，并將募集到的巨噬細胞轉化為促炎癥細胞，導致大量的促炎癥因子生成［15］，使患兒病情加重，肺功能下降。Pearson 相關性顯示，PGRN 水平與FEV1、FVC 及FEV1/FVC 均呈負相關，提示PGRN 可反映中性粒細胞型哮喘病情的嚴重程度，當PGRN 水平越高時，患兒肺功能越差，病情越嚴重。

綜上所述，PGRN 在中性粒細胞型哮喘患兒中存在明顯高表達，且與病情嚴重程度密切相關，隨著患兒病情的加重，其表達水平隨之增加。